Inhibition of carrageenan-induced expression of tissue and plasma prekallikreins mRNA by low level laser therapy in a rat paw edema model / Inibição da expressão de RNA mensageiro de pré-calicreínas tecidual e plasmática pela laserterapia em modelo de edema de pata induzido pela carragenina em ratos

BACKGROND: Low level laser therapy (LLLT) has been used clinically in order to treat inflammation, where tissue and plasma prekallikrein have crucial importance. Plasma prekallikrein (PPK) is synthesized by the hepatocytes and secreted into the bloodstream, where it participates in the surface-dependent activation of blood coagulation, fibrinolysis, kinin generation and inflammation. Tissue prekallikrein is associated with important disease states (including cancer, inflammation, and neurodegeneration) and has been utilized or proposed as clinically important biomarker or therapeutic target of interest. OBJECTIVE: To evaluate if LLLT modulates tissue and plasma prekallikreins mRNA expression in the carrageenan-induced rat paw edema. METHODS: Experimental groups were assigned as followed: A1 (Control-saline), A2 (Carrageenan-only), A3 (laser 660nm only) and A4 (Carrageenan + laser 660nm). Edema was measured by a plethysmometer. Subplantar tissue was collected for the quantification of prekallikreins mRNA by Real time-Polymerase Chain Reaction. RESULTS: A significantly decrease in the edema was observed after laser irradiation. Expression of prekallikreins increased after carrageenan injection. Tissue and plasma prekallikrein mRNA expression significantly decreased after LLLT's 660nm wavelength. CONCLUSION: These results suggest that expression of tissue and plasma prekallikreins is modulated by LLLT, which can be used in clinical practice due to its anti-inflammatory effects.

CONTEXTUALIZAÇÃO: A laserterapia de baixa potência tem sido usada para o tratamento de processos inflamatórios diversos em que a calicreína tecidual e a plasmática possuem participação ativa. A pré-calicreína plasmática (PPK) é sintetizada pelos hepatócitos e secretada na corrente sanguínea, onde participa da ativação da coagulação, fibrinólise, geração de cininas e inflamação. A pré-calicreína tecidual está associada com importantes doenças (incluindo câncer, inflamação e neurodegeneração) e tem sido utilizada ou sugerida clinicamente como importante biomarcador ou alvo terapêutico. OBJETIVO: Avaliar se a laserterapia altera a expressão gênica da pré-calicreína tecidual e da plasmática no modelo de inflamação aguda induzida pela carragenina. MÉTODOS: Quarenta ratos foram separados em quatro grupos experimentais: A1 (controle), A2 (carragenina, apenas), A3 (laser 660nm, apenas) e A4 (Carragenina + laser 660nm). O edema foi medido por um pletismômetro. Tecido subplantar foi coletado para a quantificação de RNA mensageiro (RNAm) de pré-calicreínas tecidual e plasmática por PCR em tempo real. RESULTADOS: Observou-se uma diminuição significativa no volume de edema após irradiação com laser 660nm. A expressão de RNAm de pré-calicreínas tecidual e plasmática aumentou após a inoculação de carragenina, entretanto a expressão gênica das pré-calicreínas diminuiu significantemente após laserterapia de baixa potência de 660nm. CONCLUSÃO: Os resultados sugerem que a expressão de RNAm das pré-calicreínas tecidual e plasmática é modulada pela laserterapia de baixa potência, podendo ser alvo terapêutico para tratamento de processos inflamatórios.

Action of plant proteinase inhibitors on enzymes of physiopathological importance

Obtained from leguminous seeds, various plant proteins inhibit animal proteinases, including human, and can be considered for the development of compounds with biological activity. Inhibitors from the Bowman-Birk and plant Kunitz-type family have been characterized by proteinase specificity, primary structure and reactive site. Our group mostly studies the genus Bauhinia, mainly the species bauhinioides, rufa, ungulata and variegata. In some species, more than one inhibitor was characterized, exhibiting different properties. Although proteins from this group share high structural similarity, they present differences in proteinase inhibition, explored in studies using diverse biological models.

Obtidas de sementes leguminosas, várias proteínas inibem proteinases de origem animal, incluindo humanas, e podem ser consideradas para o desenvolvimento de compostos com atividade biológica. Inibidores da família Bowman-Birk e da família Kunitz vegetal tem sido caracterizados em relação a especificidade para proteinase, estrutura primária e sitio reativo. O nosso grupo majoritariamente vem estudando o gênero Bauhinia, principalmente as espécies bauhinioides, rufa, ungulatae variegata. Em algumas espécies, mais de um inibidor com propriedades diferentes foi caracterizado. Embora tais proteínas apresentem alta similaridade estrutural, diferem quanto à inibição de proteinases, e foram exploradas em estudos utilizando diversos modelos biológicos.