Aceite de Clavo (Eugenol®) como Anestésico en la Especie Panaque Cochliodon-Steindachner, 1879 (Cucha de Ojos Azules) / Clove Oil (Eugenol®) as an Anesthetic in the Species Panaque Cochliodon-Steindachner, 1879 (Blue-Eyed Pleco) / Óleo de Cravo (Eugenol®) como Anestésico na Espécie Panaque Cochliodon-Steindachner, 1879 (Cascudo De Olhos Azuis)

Resumen Introducción: la cucha de ojos azules (Panaquecochliodon) es una especie endémica de la cuenca del Cauca y el Magdalena. Sin embargo, no se tiene mucha información sobre esta especie, incluida la ausencia de un protocolo de sedación adecuado para el trabajo en cautiverio con esta especie. Objetivo: estandarizar un protocolo de sedación del P. cochliodon. Materiales y métodos: se evaluaron diferentes concentraciones del sedante Eugenol que iban desde 20 a 40 mg/L; se adoptaron 4 tipos de sedación y 5 tipos de recuperación, encontrando así los grados de sedación adecuados para los diferentes procedimientos de manejo en confinamiento que se realizaron con esta especie. Resultados: todos los ejemplares alcanzaron la sedación tipo 4 y la recuperación tipo 5 sin mortalidad. Significativamente la concentración a la cual los ejemplares demoraron más tiempo en alcanzar la sedación tipo 4 y recuperación tipo 5 fue la de 20 mg/L, las demás concentraciones no presentaron diferencias entre sí, pero indican una tendencia inversa con respecto a la concentración y el tiempo. Conclusiones: todas las concentraciones evaluadas son seguras para el manejo de P. cochliodon de 314±11,6 gr, no se presentó mortalidad; las concentraciones de 30 a 35 mg/L, ofrecen 2,6 minutos de trabajo, sin efectos deletéreos aparentes sobre la especie.

Abstract Introduction: the blue-eyed pleco {Panaque cochliodon) is a species endemic to the Cauca and Magdalena basin. However, not much information is available on this species, including the absence of an adequate sedation protocol for captive work with this species. Objetive: this research standardizes a sedation protocol for P. cochliodon. Materials and methods: for this purpose, different dosages and concentrations of the sedative Eugenol ranging from 20 to 40 mg/L were evaluated and 4 types of sedation and 5 types of recovery were adopted, thus finding the appropriate degrees of sedation for the different confinement management procedures that were performed with this species. Results: all specimens reached type 4 sedation and type 5 recovery without mortality. Significantly, the concentration at which the specimens took the longest time to achieve type 4 sedation and type 5 recovery was 20 mg / L, the other concentrations did not show differences between them, but indicate an inverse trend with respect to the concentration and experimental time. Conclusions: all the concentrations evaluated are safe for the management of P. cochliodon of 314 ± 11.6 gr, there was no mortality; concentrations of 30 to 35 mg / L, offer 2.6 minutes of work, without apparent deleterious effects on the species.

Resumo Introdução: o cascudo de olhos azuis {Panaquecochliodon) é uma espécie endémica da bacia do Cauca e Magdalena. Contudo, não há muita informação disponível sobre esta espécie, incluindo a ausência de um protocolo de sedação adequado para o trabalho em cativeiro com esta espécie. Objetivo: Esta investigação padronizou um protocolo de sedação para o P. cochliodon. Materiais e métodos: para tanto, foram avaliadas diferentes dosagens e concentrações do sedativo Eugenol variando de 20 a 40 mg/l e adotados 4 tipos de sedação e 5 tipos de recuperação, encontrando-se assim os graus de sedação adequados para os diferentes confinamentos procedimentos de manejo que foram realizados com esta espécie. Resultados: todos os espécimes alcançaram sedação tipo 4 e recuperação tipo 5 sem mortalidade. Significativamente, a concentração na qual as amostras demoraram mais tempo para atingir a sedação do tipo 4 e recuperação do tipo 5 foi de 20 mg/l, as demais concentrações não apresentaram diferenças entre si, mas indicam uma tendência inversa em relação à concentração e ao tempo. Conclusões: todas as concentrações avaliadas são seguras para o manejo de P. cochliodon de 314 ± 11,6 gr, não houve mortalidade; concentrações de 30 a 35 mg/l, oferecem 2,6 minutos de trabalho, sem efeitos deletérios aparentes para a espécie.

Impact of inorganic salts on vase life and postharvest qualities of the cut flower of Perpetual Carnation / Investigar os efeitos dos sais inorgânicos na vida dos vasos e nas qualidades pós-colheita da flor de corte do Cravo Perpétuo

Abstract This study was carried out in the laboratory of Shangqiu Institute of Technology, Henan to investigate the effect of a different combination of inorganic salt on the quality and physiological characteristics of cut flowers (CFs) of Perpetual Carnation. Furthermore, to find out the best preservation solution of inorganic salt that can enhance the ornamental value of CFs of Carnation and prolong its vase life. Sucrose, 8-hydroxyquinoline, paclobutrazol, salicylic acid and different kinds of inorganic salts were added as a preservation solution. And the same amount of distilled water was used as control. The effects of these various inorganic salts on the morphological characteristics including vase life, changes in flower stems, fresh weight (FW) and water balance and the physiological characteristics including contents of malondialdehyde (MDA), cell membrane permeability and the contents of proline of carnation were investigated. The CFs placed in vase solution with inorganic salts showed significant changes in its morphology and physiological characteristics as compared to control. The changes in flower diameter (FD), FW, malondialdehyde and cell membrane permeability showed an increasing trend first and then decreasing. The value of water balance was observed with a downward trend. However, the vase life, FD, the contents of malondialdehyde, contents of proline and FW of CFs held in the preservative solution containing inorganic salts were increased than that of control. The fresh preservative solution contained sucrose 3% + 8-hydroxyquinoline (8-HQ) (200 mg·L‾1) + paclobutrazol (100 mg·L‾1) + salicylic acid (SA) (25 mg·L‾1) + CaCl2 (100 mg·L‾1) has the best effect on longevity (34 days), FW and FD of carnation CFs. This solution has improved the ornamental and physiological characteristics of fresh carnation CFs.

Resumo Este estudo foi realizado no laboratório do Instituto de Tecnologia de Shangqiu, Henan, para investigar o efeito de diferentes combinações de sal inorgânico na qualidade e características fisiológicas de flores cortadas do Cravo Perpétuo. Além disso, para descobrir a melhor solução de preservação de sal inorgânico que pode aumentar o valor ornamental das flores cortadas de Cravo e prolongar a vida do vaso. Sucrose, 8-hidroxiquinolina, paclobutrazol, ácido salicílico e diferentes tipos de sais inorgânicos foram adicionados como uma solução de preservação. E a mesma quantidade de água destilada foi usada como controle. Os efeitos destes vários sais inorgânicos sobre as características morfológicas incluindo a vida dos vasos, alterações nos caules, peso fresco e balanço hídrico e as características fisiológicas incluindo conteúdo de malondialdeído (MDA), permeabilidade da membrana celular e conteúdo de prolina de cravo foram investigados. As flores de corte colocadas em solução de vaso com sais inorgânicos apresentaram mudanças significativas em sua morfologia e características fisiológicas em relação ao controle. As alterações no diâmetro das flores, no peso fresco, no malondialdeído e na permeabilidade da membrana celular mostraram uma tendência crescente primeiro e depois decrescendo. O valor do balanço hídrico foi observado com tendência de queda. No entanto, a vida útil do vaso, o diâmetro da flor, o conteúdo de malondialdeído, o conteúdo de prolina e o peso fresco de flores cortadas mantidos na solução preservativa contendo sais inorgânicos foram aumentados em relação ao controle. A solução conservante fresca continha sacarose 3% + 8-hidroxiquinolina (8-HQ) (200 mg·L‾1) + paclobutrazol (100 mg·L‾1) + ácido salicílico (SA) (25 mg·L‾1) + CaCl2 (100 mg·L‾1) tem o melhor efeito na longevidade (34 dias), peso fresco e diâmetro de flor de flores cortadas de cravo. Esta solução melhorou as características ornamentais e fisiológicas das flores frescas de cravo.

Essential oils in the management of soft rot of kale in the brazilian semiarid region / Óleos essenciais no manejo da podridão mole em couve no semiárido brasileiro

The aim of this study was to analyze the effect of essential oils on the control of soft rot of kale. Clove essential oil at 0.25%, lemongrass and palmarosa essential oils at 0.5%, melaleuca and orange essential oils at 0.75%, bergamot, rosemary, sage and ginger essential oils at 1% were evaluated for the in vitro inhibition of Pectobacterium carotovorum subsp. brasiliensis (Pcb) and control of soft rot of kale, sprayed 72 hours before or seven hours after inoculation. Clove, citronella, bergamot, rosemary, palmarosa, sage, melaleuca, and lemongrass oils completely inhibited the growth of Pcb. Lemongrass oil (0.5%) caused 0% of disease incidence (INC), providing 100% of disease control in both periods of inoculation. Clove oil (0.25%) showed a lower INC (25%) when applied after inoculation, providing a control percentage of 71.42%. The lemongrass and clove essential oils were analyzed by GC/FID (Gas Chromatography ­ Flame Ionization Detector) and by GC/MS (Gas Chromatography /Mass Spectrometer). The major components were eugenol (91,9%) for clove oil and citral, isometric mixture of neral (34,1%) and geranial (42,9%) for lemongrass oil. The Minimum inhibitory concentration (MIC) of lemongrass, clove oils and their major components (citral and eugenol, respectively) was determined by using a broth macrodilution technique, as well as they were evaluated at different concentrations on the control of soft rot of kale, sprayed according descriptions above. The MIC was 0.03125% for citral, and 0.0625 and 0.125% for lemongrass and clove oils, respectively. Eugenol didn't show MIC. Lemongrass oil at 0.125% (post-inoculation) and citral at 0.125% (pre and post-inoculation) provided the highest percentages of disease control (33.33, 50, and 100%, respectively). Clove oil at 0.125% (post-inoculation) showed better effectiveness than eugenol (0.25%), providing a percentage of disease control of 16.67%. Lemongrass and clove essential oils were the most effective in control of soft rot of kale, suggesting that these oils have a potential to be used as antibacterial agents.

O objetivo do estudo foi avaliar o efeito de óleos essenciais no controle da podridão mole em couve. Os óleos essenciais de cravo a 0,25%, capim-limão e palmarosa a 0,5%, citronela, melaleuca e laranja a 0,75%, bergamota, alecrim, sálvia e gengibre a 1% foram avaliados na inibição in vitro de Pectobacterium carotovorum subsp. brasiliensis (Pcb) e controle da podridão mole em couve, pulverizados 72 horas antes ou sete horas após a inoculação. Os óleos essenciais de cravo, citronela, bergamota, alecrim, palmarosa, sálvia, melaleuca e capim-limão inibiram completamente o crescimento de Pcb. O óleo de capimlimão (0,5%) promoveu 0% de incidência (INC) da doença (percentual de controle de 100%), em ambos os períodos de inoculação. O óleo de cravo (0,25%) proporcionou menor INC (25%) quando aplicado após inoculação (percentual de controle de 71,42%). Os óleos essenciais de capim-limão e cravo foram analisados por GC/FID (cromatografia gasosa/detector por ionização de chama) e por GC/MS (cromatografia gasosa/ espectometria de massas). Os componentes majoritários foram eugenol (91,9%) no óleo de cravo e citral (neral34,1% e geranial- 42,9%) no óleo de capim-limão. A concentração inibitória mínima (CIM) dos óleos essenciais de capim-limão e cravo e de seus componentes majoritários (citral e eugenol, respectivamente) foi determinada por meio da técnica de macrodiluição em caldo, bem como foram avaliados, em diferentes concentrações, no controle da podridão mole em couve, pulverizados conforme descrito acima. A concentração inibitória mínima (CIM) foi de 0,03125% para o citral, e de 0,0625 e 0,125% para os óleos de capim-limão e cravo, respectivamente. O eugenol não apresentou CIM. O óleo de capim-limão a 0,125% (pós-inoculação) e o citral (0,125%), em ambos os períodos de inoculação, proporcionaram os maiores percentuais de controle (33,33; 50 e 100%, respectivamente). O óleo de cravo a 0,125% (pós-inoculação) mostrou maior eficiência que o eugenol (0,25%), promovendo um percentual de controle de 16,67%. Os óleos essenciais de capim-limão e cravo destacaram-se na eficiência de controle da podridão mole em couve, sugerindo que esses óleos têm potencial para serem utilizados como agentes antibacterianos.

Selección de genes de referencia para análisis transcripcionales en el modelo clavel (Dianthus Caryophyllus L.) - Fusarium oxysporum f. sp. Dianthi / Selection of reference genes for transcriptional analysis in the pathosystem carnation (Dianthus Caryophyllus L.) - Fusarium oxysporum f. sp. dianthi / Seleção de genes de referência para análise de transcrição no modelo cravo (Dianthus Caryophyllus L.) - Fusarium oxysporum f. sp. dianthi

Resumen En el presente trabajo se seleccionaron y validaron genes de referencia para estudios transcripcionales en el modelo clavel -Fusarium oxysporum f. sp. dianthi. Para ello, se seleccionaron genes asociados a procesos básicos celulares que han sido usados como genes de referencia en otros modelos planta-patógeno y se determinó el efecto de la inoculación del patógeno sobre su expresión. Se realizó un diseño de cebadores para los diferentes genes candidatos con el fin de verificar tanto su presencia en el genoma de claveles cultivados en Colombia, como su transcripción constitutiva en los diferentes tejidos por medio de la técnica de transcripción reversa y posterior reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR por sus siglas en ingles). Posteriormente, se evaluaron los niveles transcripcionales de los genes candidatos usando RT-qPCR en tallos y raíces de dos variedades con diferentes niveles de resistencia a la enfermedad, que fueron inoculados con este patógeno. La validación estadística realizada, usando ANOVA y los programas GeNorm y Normfinder, determinó que los genes codificantes para una histona H3 y el ARNr18S no presentan variación en sus niveles de expresión por efecto de la inoculación, permitiendo su uso como genes de referencia en estudios transcripcionales en esta interacción planta-patógeno.

Abstract In this research, reference genes were validated for transcriptional studies in the pathosystem carnation - Fusarium oxysporum f. sp. dianthi. Genes associated with basic cellular processes that have been used as reference genes in other plant-pathogen models were selected and the effect of the inoculation with the pathogen on their expression was determined. For this, it was necessary to design primers for each candidate genes to check their presence in the genome of carnations grown in Colombia and their constitutive transcription in different tissues of the plant using reverse transcription subsequent polymerase chain reaction (RT-PCR). The transcriptional levels of the candidate genes were evaluated using RT-qPCR in stems and roots inoculated with this pathogen for two cultivars with different levels of resistance to the disease. According to the statistical validation carried out using ANOVA and the GeNorm and Normfinder programs, the genes coding for a histone H3 and rRNA18S did not show any significant variation in their expression levels due to inoculation, so they can be used as reference genes in transcriptional studies in this plant-pathogen interaction.

Resumo Neste trabalho foram validados genes de referencia para estudos de transcrição no modelo cravo - Fusarium oxysporum f. sp. dianthi. Genes associados a processos básicos celulares, anteriormente usados como genes de referencia noutros modelos planta-patógeno, foram selecionados e se determinou o efeito, sobre a sua expressão, que apresentava a inoculação com o patógeno. Foi realizado um desenho de iniciadores para os diferentes genes candidatos para verificou a sua presença no genoma de cravos cultivados na Colômbia, e uma transcrição constitutiva em diferentes tecidos da planta com a técnica de transcrição reversa e posterior reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). Em seguida, os níveis de transcrição dos genes candidatos foram avaliados por RT-qPCR em caules e raízes de duas variedades com diferentes níveis de resistência à doença, que tinham sido inoculados com o patógeno. A validação estatística realizada por ANOVA y com os programas GeNorm y Normfinder, permitiram determinar que os genes que codificam para uma histona H3 y para o ARNr 18S, não apresentam variação nos seus níveis de expressão por efeito da inoculação, sugerindo que podem ser usados como genes de referencia em estudos de transcrição nesta interação planta-patógeno.

Antioxidant activity of essential oils from condiment plants and their effect on lactic cultures and pathogenic bacteria / Atividade antioxidante do óleo essencial de plantas condimentares e efeito sobre culturas lácticas e bactérias patogênicas

ABSTRACT: Studies about preservative and antioxidant activity of essential oils have been encouraged in recent years, given their importance to food industry. The aim of the current study was to evaluate the antioxidant properties and antimicrobial activity of essential oils deriving from Syzygium aromaticum, Cymbopogon citratus and Lippia alba against lactic and pathogenic bacteria responsible for food-borne diseases. Essential oil antibacterial activity was assessed through disc diffusion and macrodilution tests conducted in a mixed lactic culture of Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus and Streptococcus thermophilus (YF-L903) and of Escherichia coli (ATCC 8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Salmonella enterica (ATCC 6017) strains. Based on the chromatographic analysis results, the essential oils shown to be composed of eugenol (79.41%) which was the prevalent compound in S. aromaticum, geranial (31.89%), neral (24.52%) and β-myrcene (25.37%) in C. citratus, as well as of geranial (33.80%) and neral (25.63%) in L. alba. The observed antibacterial activity confirmed the dose-dependent effect of these three oils on all the assessed bacteria; there was halo inhibition at concentration 20μL mL-1. The essential oil of S. aromaticum presented better antioxidant activity, with IC50 equal to 5.76μg mL-1 and antioxidant activity index of 6.94, and it was considered strong (AAI>2.0) in comparison to the other evaluated oils. This essential oil also presented excellent antioxidant activity at concentrations lower than the one required to inhibit lactic cultures. Based in this outcome, the essential oil from S. aromaticum can be used as preservative agent in processed food whose formulation presents lactic cultures.

RESUMO: A atividade conservante e antioxidante de óleos essenciais são importantes ferramentas para uso na indústria de alimentos e pesquisas são estimuladas na atualidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar as propriedades antioxidantes e a atividade antimicrobiana de óleos essenciais de Syzygium aromaticum, Cymbopogon citratuse Lippia alba (LA) contra bactérias lácticas e patogênicas com importância em doenças transmitidas por alimentos. A atividade antibacteriana dos óleos foi avaliada por testes de disco-difusão e macrodiluição em caldo, utilizando-se cultura láctica mista de Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus e Streptococcus thermophilus (YF-L903), e Escherichia coli (ATCC 8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Salmonella enterica (ATCC 6017). Os compostos dos óleos essenciais foram identificados por cromatografia, mostrando eugenol (79,41%) como composto predominante em S. aromaticum, geranial (31,89%), neral (24,52%) e β-mirceno (25,37%) em C. citratus, e o geranial (33,80%) e neral (25,63%) em L. alba. A atividade antibacteriana confirmou o efeito dose-dependente dos três óleos para todas as bactérias avaliadas, apresentando halos de inibição a partir da concentração de 20μL mL-1. O óleo essencial de S. aromaticum apresentou melhor atividade antioxidante, com IC 50 IC50 (at concentration capable of generating 50% inhibition) igual a 5.76μg mL-1 e índice de atividade antioxidante (AAI) de 6,94, considerado forte (AAI>2,0) em relação aos demais óleos avaliados. O óleo essencial de S. aromaticum apresentou excelente atividade antioxidante em menor concentração que anecessário para inibir a cultura láctica, indicando que este óleo pode ser usado como conservante em alimentos processados contendo culturas lácticas.

Impact of inorganic salts on vase life and postharvest qualities of the cut flower of Perpetual Carnation

Abstract This study was carried out in the laboratory of Shangqiu Institute of Technology, Henan to investigate the effect of a different combination of inorganic salt on the quality and physiological characteristics of cut flowers (CFs) of Perpetual Carnation. Furthermore, to find out the best preservation solution of inorganic salt that can enhance the ornamental value of CFs of Carnation and prolong its vase life. Sucrose, 8-hydroxyquinoline, paclobutrazol, salicylic acid and different kinds of inorganic salts were added as a preservation solution. And the same amount of distilled water was used as control. The effects of these various inorganic salts on the morphological characteristics including vase life, changes in flower stems, fresh weight (FW) and water balance and the physiological characteristics including contents of malondialdehyde (MDA), cell membrane permeability and the contents of proline of carnation were investigated. The CFs placed in vase solution with inorganic salts showed significant changes in its morphology and physiological characteristics as compared to control. The changes in flower diameter (FD), FW, malondialdehyde and cell membrane permeability showed an increasing trend first and then decreasing. The value of water balance was observed with a downward trend. However, the vase life, FD, the contents of malondialdehyde, contents of proline and FW of CFs held in the preservative solution containing inorganic salts were increased than that of control. The fresh preservative solution contained sucrose 3% + 8-hydroxyquinoline (8-HQ) (200 mg·L1) + paclobutrazol (100 mg·L1) + salicylic acid (SA) (25 mg·L1) + CaCl2 (100 mg·L1) has the best effect on longevity (34 days), FW and FD of carnation CFs. This solution has improved the ornamental and physiological characteristics of fresh carnation CFs.

Resumo Este estudo foi realizado no laboratório do Instituto de Tecnologia de Shangqiu, Henan, para investigar o efeito de diferentes combinações de sal inorgânico na qualidade e características fisiológicas de flores cortadas do Cravo Perpétuo. Além disso, para descobrir a melhor solução de preservação de sal inorgânico que pode aumentar o valor ornamental das flores cortadas de Cravo e prolongar a vida do vaso. Sucrose, 8-hidroxiquinolina, paclobutrazol, ácido salicílico e diferentes tipos de sais inorgânicos foram adicionados como uma solução de preservação. E a mesma quantidade de água destilada foi usada como controle. Os efeitos destes vários sais inorgânicos sobre as características morfológicas incluindo a vida dos vasos, alterações nos caules, peso fresco e balanço hídrico e as características fisiológicas incluindo conteúdo de malondialdeído (MDA), permeabilidade da membrana celular e conteúdo de prolina de cravo foram investigados. As flores de corte colocadas em solução de vaso com sais inorgânicos apresentaram mudanças significativas em sua morfologia e características fisiológicas em relação ao controle. As alterações no diâmetro das flores, no peso fresco, no malondialdeído e na permeabilidade da membrana celular mostraram uma tendência crescente primeiro e depois decrescendo. O valor do balanço hídrico foi observado com tendência de queda. No entanto, a vida útil do vaso, o diâmetro da flor, o conteúdo de malondialdeído, o conteúdo de prolina e o peso fresco de flores cortadas mantidos na solução preservativa contendo sais inorgânicos foram aumentados em relação ao controle. A solução conservante fresca continha sacarose 3% + 8-hidroxiquinolina (8-HQ) (200 mg·L1) + paclobutrazol (100 mg·L1) + ácido salicílico (SA) (25 mg·L1) + CaCl2 (100 mg·L1) tem o melhor efeito na longevidade (34 dias), peso fresco e diâmetro de flor de flores cortadas de cravo. Esta solução melhorou as características ornamentais e fisiológicas das flores frescas de cravo.

Anticancer activity of eugenol is not related to regulation of the oncogenic transcription factor Forkhead Box M1 / Atividade anticarcinogênica do eugenol não se deve à modulação do fator de transcrição oncogênico Forkhead Box M1

Genome-wide gene expression profiling of cancers has consistently identified the FOXM1 as one of the most commonly upregulated genes in cancer cells that plays an essential role in the regulation of a wide spectrum of biological processes, including inhibition of apoptosis. Since the anticancer activity of EUG reported in the literature is related to induction of apoptosis in cancer cells, we hypothesized that there is a correlation between the EUG-induced apoptosis effect and downregulation of FOXM1. A series of experiments were conducted to evaluate the effect of EUG on cellular viability of cancer cells (MTT) and its potential regulatory effect on FOXM1 protein levels (western blots). Our findings confirm the anticancer effect of EUG on different human cancer cell lines as previously reported in the literature (SKBR3 LC50: 318.6; HT29 LC50: 525.5; and HepG2 LC50: 2090.0 µM). However, we demonstrated that EUG does not regulate the FOXM1. The results evidenced the anticancer effect of EUG on three cancer cell lines and showed that the EUG- apoptosis induced effect is not related to regulation of FOXM1 at the protein level. Further studies must be done to provide information on the mechanism of action of this agent.

Estudos do genoma de células tumorais identificaram o FOXM1 como o fator de transcrição mais expresso, desempenhando papel essencial em uma gama de processos biológicos, incluindo a inibição da apoptose celular. A atividade anticarcinogênica do EUG, relatada na literatura, está relacionada à indução de apoptose em células cancerosas, por isso geramos a hipótese de que pode existir correlação entre este efeito indutor de apoptose e a supressão do FOXM1. Um conjunto de experimentos foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito do EUG na viabilidade celular (MTT) e o potencial regulatório sobre o nível de proteínas do FOXM1, em células cancerosas (western blots). Nossos resultados corroboram o efeito anticancerígeno do EUG relatado na literatura em diferentes linhagens celulares (SKBR3 LC50: 318.6; HT29 LC50: 525.5; e HepG2 LC50: 2090.0 µM). Entretanto ficou demonstrado que o EUG não interfere no nível proteico do FOXM1. Em nosso estudo demonstramos o efeito citotóxico do EUG em três linhagens celulares de câncer, sendo evidenciado que o efeito indutor de apoptose promovido pelo mesmo não é dependente da regulação do fator de transcrição FOXM1. Estudos mais detalhados serão conduzidos no intuito de esclarecer os mecanismos de ação desde agente anticarcinogênico.

Efeitos in vitro e in situ da adição de extrato aquoso de cravo sobre o desenvolvimento microbiano / Effects in vitro and in situ addition of aqueous clove extract on microbial

Foram avaliados os efeitos da adição in situ e in vitro, de extrato aquoso de botões de cravo-da-índa (Syzygium aromaticum) sobre Escherichia coli (ATCC 8739) e Staphylococcus aureus (ATCC 25923). Para o estudo in vitro foram empregadas concentrações de 100%, 75%, 50% e 25% (v/v) de extrato de cravo, diluídas em água destilada estéril, utilizando a técnica de difusão em ágar por disco. O estudo in situ foi conduzido inoculando amostras de doce de abóbora em pasta, adicionadas ou não de extrato aquoso de cravo puro, com as cepas bacterianas (108 UFC/g), separadamente. Os resultados revelaram que o extrato aquoso de cravo propiciou um aumento na contagem in vitro de E. coli e S. aureus. De modo análogo, no estudo in situ, a contagem de S. aureus foi favorecida pela adição do extrato puro de cravo em doce de abóbora em pasta. Sugere-se, portanto, estudos mais detalhados sobre o emprego de extratos aquosos de especiarias em alimentos a fim de elucidar o efeito sobre o desenvolvimento microbiano e possíveis interações com a composição dos alimentos em que são empregados.

Atividade antifúngica, in vitro, do óleo de café verde / Antifungal activity, in vitro, of the green coffee oil

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do contato direto e da fração volátildo óleo de café verde, testado nas concentrações de 500, 1.000, 1.500 e 2.000 µL L-1, sobre o crescimento micelial e a esporulação dos fungos Penicillium roqueforti e Rhizopus stolonifer. O óleo essencial de cravo-da-índia na concentração de 800 µL L-1 foi utilizado para comparação. Nas concentrações de 1.500 e 2.000 µL L-1, o óleo de café verde em contato direto proporcionou redução da esporulação do fungo R. stolonifer , sendo estatisticamente semelhante ao óleo de cravo-da-índia. Na fração volátil do óleo de café verde, observou-se redução significativa da esporulação de P. roqueforti e R. stolonifer na concentração de 2.000 µL L-1. O óleo de café verde, em contato direto ou por volatilização, reduziu significativamente o crescimento micelial e a esporulação de ambos os fungos em comparação com a testemunha.(AU)

The objective of this study was to evaluate the effect of direct contact and volatile fraction of from green coffee oil, tested at concentrations of 500, 1,000, 1,500 and 2,000 µL L-1, on mycelial growth and sporulation of Penicillium roqueforti and Rhizopus stolonifer . The essential oil of clove at a concentration of 800 µL L-1 was used for comparison. At concentrations of 1,500 and 2,000 µL L-1, the green coffee oil in direct contact caused a reduction of sporulation for R. stolonifer, similar to clove oil. In the volatile fraction of the green coffee oil, there was a significant reduction in sporulation of P. roqueforti and R. stolonifer at a concentration of 2,000 µL L-1. The green coffee oil, in direct contact or by volatilization, significantly reduced the mycelial growth and sporulation of both fungi compared to the control.(AU)

Total biomass and essential oil composition of Ocimum gratissimum L. in response to broiler litter and phosphorus / Produção de biomassa e composição do óleo essencial de Ocimum gratissimum L. cultivado em solo com cama-de-frango e fósforo

The aim of this experiment was to evaluate the biomass yield and chemical composition of the essential oil of clove basil in response to doses of broiler litter (0, 5, 10, 15 and 20 t ha-1) added in presence of triple superphosphate (200 kg ha-1) or without it. Before the first harvest, the height of the plants increased significantly (34.42 cm) when 15 tonnes ha-1 broiler litter were added to the soil. However, after resprouting, the plant heights ranged only as a function of the vegetative cycle, with maximum height (76.0 cm) observed at 60 days. Phosphate fertilization also significantly influenced the leaf area (1.771 cm2 plant-1) during the first harvest. The fresh weight of leaves increased linearly in response to the addition of broiler litter (20 ton ha-1) with maximum yields of 1,709 and 7,140 kg ha-1 during the first harvest and regrowth, respectively. On average, the oil content of the leaves was 0.7%, with maximum performance (3.8 L ha-1) when 20 tonnes ha-1 of broiler litter were added on the soil. Eugenol was found to be the major compound of the essential oil (71.65%).

O objetivo do trabalho foi avaliar a produção de biomassa e a composição do óleo essencial da alfavaca-cravo cultivada com adição ao solo de cama-de-frango de corte, na ausência ou presença de fósforo. Foram estudadas cinco doses de cama-de-frango semi-decomposta (0, 5, 10, 15 e 20 t ha-1), na ausência ou presença de fósforo (200 kg ha-1), na forma de superfosfato triplo. A altura das plantas na primeira colheita foi maior sob a dose de 15 t ha-1 de cama-de-frango (34,42 cm), ou sem o uso de fósforo (32,4 cm); na rebrota, a altura variou apenas em função do ciclo, sendo máxima (76,0 cm) aos 60 dias após a rebrota. A adubação fosfatada influenciou significativamente a área foliar da primeira colheita, que foi maior com fósforo (1.771 cm2 planta-1). As produções de massas frescas de folhas cresceram linearmente com as doses de cama-de-frango, com máximas de 1.709 e 7.140 kg ha-1 na primeira colheita e na rebrota, respectivamente, sob 20 t ha -1. O teor de óleo essencial foi em média de 0,7% e o rendimento máximo de 3,8 L ha-1 sob a dose de 20 t ha-1 de cama-de-frango; o principal constituinte foi o eugenol, com teor médio de 71,65%.

Potencial alelopático de Tynanthus micranthus Corr. Mello ex. Schum. (Bignoniaceae) sobre diásporos de Lactuca sativa L. / Allelopathic effects of Tynanthus micranthus Corr. Mello ex. Schum. (Bignoniaceae) on diaspores of Lactuca sativa L.

A alelopatia estuda os efeitos direto ou indireto que uma planta exerce sobre outra pela produção de compostos químicos liberados no ambiente. O presente trabalho teve como objetivo analisar o potencial alelopático da espécie Tynanthus micranthus Corr. Mello ex. Schum. sobre diásporos de Lactuca sativa L. Foram determinados os índices de velocidade de germinação dos diásporos e os percentuais de crescimento das plântulas em presença de diferentes concentrações das amostras. A fração clorofórmica do caule inibiu a germinação na concentração de 0,8 mg e a hidroalcoólica remanescente das folhas aumentou a germinação em todas as concentrações analisadas. A fração clorofórmica do caule estimulou o crescimento do hipocótilo em todas as concentrações testadas. Estes resultados sugerem que a espécie possui compostos ativos capazes de interferir em sistemas biológicos.

Allelopathic agents are secondary metabolites produced by plants and microorganisms that have positive or negative effects on the growth and development of biological systems. The aim this study was to assess the allelopathic effects of Tynanthus micranthus on diaspores of Lactuca sativa L. The germination speed indices of the diaspores and the percent growth of seedlings were determined in the presence of various concentrations of the samples. The chloroform fraction of the stem inhibited germination at a concentration of 0.8 mg and a hydroalcoholic fraction of the leaves increased germination at all concentrations analyzed. The chloroform fraction of the stem stimulated hypocotyl growth at all concentrations tested. These results suggest that the species has active compounds capable of interfering with biological systems.

REGULACIÓN ESPACIO-TEMPORAL DE FENILALANLNA AMONIO LIASA EN CLAVEL (Dianthus caryophyllus L.) DURANTE SU INTERACCIÓN CON EL PATÓGENO Fusarium oxysporum f. sp. dianthi / SPATIO-TEMPORAL REGULATION OF PHENYLALANINE AMMONIA LYASE ENZYME IN CARNATION (Dianthus caryophyllus L.) DURING ITS INTERACTION WITH THE PATHOGEN Fusarium oxysporum f. sp. dianthi / REGULAÇÃO ESPÁCIO-TEMPORAL DA ENZIMA FENILALANINA AMÔNIO LIASA (PAL) EM CRAVO (Dianthus caryophyllus L.) DURANTE A SUA INTERACÇÃO COM O PATOGÉNICO Fusarium oxysporum f. sp. dianthi

Se estudió la regulación espacio-temporal de la actividad enzimática y de los niveles transcripcionales de la enzima fenilalanina amonio liasa (PAL por sus siglas en inglés) en clavel (Dianthus caryophyllus L.) inoculado con el patógeno causal del marchitamiento vascular. Se inocularon con Fusarium oxysporum f. sp. dianthi esquejes de dos variedades con diferencias en los niveles de tolerancia a la enfermedad -Kiss (tolerante) y Uconn (susceptible)- y se realizaron muestreos posinoculación a diferentes horas, tanto en el tallo como en la raíz, con el fin de evaluar los parámetros en estudio. Se determinó que durante la infección con el patógeno, la variedad tolerante presentó inducción de la actividad PAL en la raíz a las 48 horas de la inoculación. Esto indica que en este órgano de la planta se estimula la ruta fenilpropanoide, responsable de la generación de metabolitos fenólicos presentes en una alta diversidad de fenómenos asociados a resistencia vegetal. Considerando que durante la evaluación de los niveles de transcripción en este órgano de la planta mediante la técnica semicuantitativa de transcripción reversa y la posterior reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR por su nombre en inglés) no se presentó aumento importante en los niveles de mRNA para esta enzima, se evidencia la participación de mecanismos de regulación postranscripcional que determinan la generación de la enzima activa. En el tallo no se presentaron cambios en la actividad enzimática ni en los niveles transcripcionales, lo cual indica que la regulación de la respuesta de defensa de la planta está determinada por el órgano involucrado en el proceso de infección.

The spatio-temporal regulation of enzymatic activity and that of transcriptional levels of phenylalanine ammonia lyase enzyme in cuttings of carnation infected with the pathogen responsible of vascular wilting were studied. Carnation cuttings of two varieties which differ in disease tolerance-Kiss (tolerant) and Uconn (sus-ceptible)-were inoculated with Fusarium oxysporum f sp. dianthi and samplings were taken from root and stem at different times after inoculate them, to evaluate the parameters of interest. During infection, the tolerant variety showed an induction of PAL at 48 hours post-inoculation in roots, showing in this organ that the phenylpropanid pathway is stimulated. This pathway is responsible for producing phenolic metabolites that participate in phenomena associated with plant resistance. Having in account that during the evaluation of transcription levels in root, measured with semiquantitative technique RT-PCR, the levels of PAL mRNA were not increased, the participation of post-transcriptional regulation mechanisms for this active enzyme is evident. Taking in consideration that stem not presented differential induction in the enzymatic activity nor in levels of mRNA, we evidenced that regulation of responses of plant defense in this model is determined by the organ of the plant involved in the infection process.

com o fungo patogênico que causa o murchamente vascular. Inocularam-se estacas de cravo de duas variedades com diferentes niveles de tolerância à doença, Kiss (tolerante) e Uconn (susceptível) com uma Nesta investigação foi estudada a regulação espaço-temporal da atividade enzimática e dos níveis transcripcionais da enzima fenilalanina amônio liasa em estacas de cravo inoculadas cepa de Fusarium oxysporum f. sp. dianthi, e realizaram-se amostragens no caule e na raiz em diferentes horas pós-inoculação com a finalidade de avaliar os parâmetros em estudo. Foi determinado que durante a infecção com o fungo patogénico, a variedade tolerante Kiss apresenta uma indução da atividade PAL às 48 horas pós-inoculação na raiz, indicando que neste órgão da planta se estimula a via fenilpropanoide, responsável da geração de metabolitos de tipo fenólico que participam numa alta diversidade de fenómenos associados à resistência vegetal. Da mesma forma, considerando que durante a avaliação dos níveis de transcrição neste órgão da planta usando a técnica semi-quantitativa de RT-PCR não se apresentou aumento importante nos níveis de mRNA para esta enzima, se evidencia a participação de mecanismos de regulação postranscripcional que determinam a geração da enzima ativa. No caule não se apresentaram modificações na actividade enzimática, nem nos níveis de transcrição, indicando que a regulação da resposta de defesa da planta está determinada pelo órgão implicado no processo de infecção.

Ação do óleo essencial de Syzygium aromaticum (L.) Merr. & L.M.Perry sobre as hifas de alguns fungos fitopatogênicos / Action of Syzygium aromaticum (L.) Merr. & L.M.Perry essential oil on the hyphae of some phytopathogenic fungi

Atualmente o uso de métodos alternativos para o controle de doenças e pragas na agricultura, visando minimizar os danos ao meio ambiente e à saúde pública é uma prática reconhecida e necessária. Este trabalho objetivou investigar a ação do óleo essencial de Syzygium aromaticum (L.) Merr. & L.M.Perry sobre o crescimento micelial in vitro dos fungos fitopatogênicos Rhizoctonia solani, Fusarium solani, Fusarium oxysporum e Macrophomina phaseolina. A análise por cromatografia gasosa acoplada com espectrometria de massa possibilitou a identificação de eugenol (83,6 por cento), acetato de eugenila (11,6 por cento) e cariofileno (4,2 por cento). A avaliação microscópica dos micélios dos fungos evidenciou diversas alterações morfológicas, como a presença de vacúolos, desorganização dos conteúdos celulares, diminuição na nitidez da parede celular, intensa fragmentação e menor turgência das hifas. O óleo essencial de cravo apresentou atividade fungicida na concentração de 0,15 por cento sobre o crescimento de R. solani, F. oxysporum e F. solani, entretanto não demonstrou essa atividade sobre M. phaseolina. Esses resultados indicam perspectivas favoráveis para posterior uso do óleo de cravo no controle desses fitopatógenos na agricultura.

Currently, the use of alternative methods to control diseases and pests in agriculture has been a recognized and necessary practice to minimize damages to the environment and public health. This study aimed to investigate the action of clove [Syzygium aromaticum (L.) Merr. & L.M.Perry] essential oil on the in vitro mycelial growth of the phytopathogenic fungi Rhizoctonia solani, Fusarium solani, Fusarium oxysporum and Macrophomina phaseolina. Analysis by gas chromatography-mass spectrometry allowed the identification of eugenol (83.6 percent), eugenyl acetate (11.6 percent) and caryophyllene (4.2 percent). Microscopic evaluation of mycelia showed several morphological changes such as presence of vacuoles, cell content disorganization, decreased cell wall clearness, intense fragmentation and lower turgescence of hyphae. Clove essential oil showed fungicidal activity at 0.15 percent on the growth of R. solani, F. oxysporum and F. solani, but not for M. phaseolina. These results indicate favorable perspectives for future use of clove essential oil to control these phytopathogens in agriculture.

Efeito in vitro do óleo essencial e extrato aquoso de Ocimum gratissimum colhido nas quatro estações do ano sobre fitopatógenos / In vitro effect on phytopathogens of essential oil and aqueous crude extract of Ocimum gratissimum harvested in the four seasons

O trabalho foi desenvolvido para verificar o efeito do óleo essencial e do extrato bruto de alfavaca-cravo (Ocimum gratissimum), coletado nas quatro estações do ano, no crescimento micelial in vitro dos fungos Rhizoctonia solani, Sclerotium rolfsii, Phytophthora sp. e Alternaria alternata. Para avaliar o efeito do óleo essencial no crescimento micelial dos fungos, alíquotas de 20 ?L, 40 ?L e 60 ?L de óleo esterilizado foram distribuídas na superfície de meio BDA (batata-dextrose-ágar) antes da repicagem dos fungos. O extrato bruto aquoso (EBA) foi filtrado e incorporado em BDA nas concentrações de 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25% e 50%. Os resultados indicaram que houve inibição total do crescimento micelial dos fungos nas diferentes alíquotas de óleo essencial. O EBA das plantas colhidas no outono proporcionou os melhores resultados, sendo que nesta estação do ano o EBA na concentração de 5% foi suficiente para promover 100% de inibição do crescimento micelial dos fitopatógenos A. alternata e S. rolfsii.

The present >work aimed to evaluate the effects of the essential oil and crude extract of wild basil (Ocimum gratissimum), harvested in different seasons, on the in vitro mycelia growth of Rhizoctonia solani, Sclerotium rolfsii, Phytophthora sp. and Alternaria alternata. To evaluate the effect of the essential oil, sterilized oil aliquots of 20 ?L, 40 ?L and 60 ?L were distributed on the surface of potato-dextroseagar (PDA). The aqueous crude extracts (ACE) were filtrated and incorporated in PDA at 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25% and 50%. The results showed total inhibition of mycelial growth in the different aliquots of essential oil. The ACE collected from plants in autumn had better results; in this season the ACE at 5% was enough to provide 100% of mycelia growth inhibition of A. alternata and S. rolfsii.

Anesthesia of silver catfish with eugenol: time of induction, cortisol response and sensory analysis of fillet / Anestesia de jundiás com eugenol: tempo de indução, resposta ao cortisol e análise sensorial do filé

The aim of this study was to identify the time of anesthetic induction and recovery of silver catfish (Rhamdia quelen) exposed to eugenol. It was also determined the efficacy of the anesthetic as a stress reducing agent and performed a sensory analysis of the fillets from fish exposed to this substance. The silver catfish were exposed to air for 1min to carry out biometry, and blood was collected at 0, 1 and 4 hours later. Eugenol can be used in the range of 20-50mg L-1 for anesthetic induction in silver catfish, and recovery time from anesthesia was not affected by eugenol concentration. The control group showed significantly higher cortisol levels 4 hours after biometry than at time zero. Fish anesthetized with eugenol (50mg L-1) presented significantly lower plasma cortisol levels than control fish at the same time. These data indicate that eugenol inhibits the rise of cortisol in the blood. The sensory analysis test demonstrated that eugenol modifies the flavor of the fillet and therefore is contra-indicated for anesthetization of silver catfish that are intended for human consumption.

O objetivo deste estudo foi identificar o tempo de indução e recuperação anestésica de jundiás (Rhamdia quelen) expostos ao eugenol, bem como a eficácia desse anestésico na inibição do estresse e realizar análise sensorial dos filés dos peixes expostos a essa substância. Os jundiás foram expostos ao ar por um minuto para realização da biometria, e o sangue foi coletado zero, uma e quatro horas depois. O eugenol pode ser usado na faixa de 20-50mg L-1 para a indução da anestesia em jundiás, e o tempo de recuperação da anestesia não foi afetado pela concentração do eugenol. O grupo de controle mostrou níveis significativamente mais elevados do cortisol quatro horas após a biometria que no tempo zero. Os peixes anestesiados com eugenol (50mg L-1) apresentaram níveis significativamente mais baixos do cortisol plasmático do que peixes do grupo de controle do mesmo tempo. Esses dados indicam que o eugenol inibe o aumento do cortisol no sangue. O teste sensorial demonstrou que o eugenol modifica o sabor dos filés e consequentemente é contra-indicado para a anestesia do jundiá quando o filé for destinado ao consumo humano.

INDUCCIÓN DIFERENCIAL DE LA ENZIMA PEROXIDASA Y SU RELACIÓN CON LIGNIFICACIÓN EN LOS MECANISMOS DE DEFENSA DEL CLAVEL (Dianthus caryophyllus L.) DURANTE SU INTERACCIÓN CON Fusarium oxysporum f. sp. Dianthi / DIFFERENTIAL INDUCTION OF PEROXIDASE ENZYME AND ITS RELATIONSHIP WITH LIGNIFICATION IN CARNATION DEFENSE (Dianthus caryophyllus L.) MECHANISM AGAINST Fusarium oxysporum f. sp. Dianthi / INDUCAO DIFERENCIAL DA ENZIMA PEROXIDASEEASUARELACAO COM A LENHIFICACAO NOS MECANISMOS DE DEFESA DE CRAVO (Dianthus caryophyllus L.) DURANTE A SUAINTERACCAO COM Fusarium oxysporum f. sp. Dianthi

Se evaluó la actividad enzimática peroxidasa (POD) y el contenido de lignina en tallos de esquejes de clavel (Dianthus cayophyllus L.) inoculados con el hongo Fusarium oxysporum f.sp. dianthi (Fod) raza 2, con el fin de determinar su posible participación en la respuesta de defensa y en la resistencia de la planta al marchitamiento vascular. Inicialmente se seleccionaron las condiciones para la extracción y determinación de la actividad enzimática. Se encontró que el tratamiento con buffer citrato 100 mM pH 5,0 con 3% de PVPP presentó los mejores resultados de actividad peroxidasa para la extracción de la enzima a partir de tallos de clavel. Se determinaron las mejores condiciones para la medida de actividad enzimática POD a través de la reacción de oxidación de o-dianisidina con H2O2 seguida a 460 nm. Una mezcla de reacción con una concentración 0,6 mM de o-dianisidina y 2,0 mM de H2O2 en buffer citrato 100 mM a pH 5,5 y 45°C, presentó los mejores resultados para la cuantificación de la enzima. Una vez establecidas las condiciones, esquejes de clavel de una variedad tolerante y una susceptible al marchitamiento vascular fueron inoculados con el patógeno y se evaluaron los niveles de actividad de POD y de acumulación de lignina a diferentes tiempos pos-inoculación. La variedad tolerante (Bárbara), presentó inducción de dicha enzima a las 8 y 48 h pos-inoculación y aumento en el contenido de lignina a 48 y 72 h. A su vez, en la variedad susceptible (Delphi) no se encontraron cambios significativos en los niveles de POD ni en el contenido de lignina. Se estableció, por tanto, que la inducción de la actividad POD está asociada a la lignificación, que a nivel del tallo, hace parte de los mecanismos asociados a defensa en el modelo clavel-Fusarium oxysporum f. sp. dianthi.

Peroxidase (POD) enzymatic activity and lignin content in carnation stems (Diant-hus cayophyllus L.) infected with the fungus Fusarium oxysporum f.sp. dianthi race 2 were evaluated with the purpose of determining the possible enzyme participation in the plant defense response and in the resistance to the vascular wilting. Initially, the conditions for extraction and determination of enzymatic activity were selected. It was found that when citrate buffer 100 mM pH 5.0 with 3% PVPP was employed, the results of POD activity in enzyme extract obtained from carnation stems were higher. Best conditions were set for POD activity measure through oxidation reaction of o-dianisidine and H2O2 at 460 nm. A reaction mixture with a concentration of o-dianisidine 0,6mM and H2O2 2.0 mM in citrate buffer 100 mM pH 5.5 at 45 ºC displayed the best results for enzyme quantification. Once conditions were established, tolerant and susceptible vascular wilting carnation cuttings were inoculated with the pathogen. In each treatment at stem level, different postinoculation times were evaluated for enzyme activity levels and lignin accumulation. Tolerant variety (Barbara) showed a POD induction at 8 and 48 h pos-inoculation and an increase in lignin content at 48 and 72 h. At the same time, in susceptible variety (Delphi) there were no significant changes in POD levels or lignin contents. Therefore, it was established that POD activity induction is associated to lignification which, at stem level, is part of the mechanisms associated to defense in carnation (Dianthus caryophyllus L.) against Fusarium oxysporum f. sp. dianthi.

Foram avaliadas a actividade enzimática peroxidasa (POD) e o conteúdo de lignina em talos de estacas de cravo (Dianthus cayophyllus L.) inoculados com o fungo Fusarium oxysporum f.sp. dianthi raça 2, com o propósito de determinar a sua possível participação na resposta de defensa e à resistência da planta ao murchamento vascular. Inicialmente foram seleccionadas as condiciones para a extracção e determinação da actividade enzimática. Foi encontrado que o tratamento com buffer citrato 100 mM pH 5,0 com 3% de PVPP, apresentou os melhores resultados de actividade peroxidasa na extracção da enzima a partir de talos de cravo. Foram determinadas as melhores condições para medir a actividade enzimática POD a través da reacção de oxidação de o-dianisidi na com H2O2 e com seguimento a 460 nm. Uma mistura de reacção com uma concentração 0,6 mM de o-dianisidina e 2,0 mM de H2O2 em buffer citrato 100 mM a pH 5,5 e 45 °C, apresentou os melhores resultados para a quantificação da enzima. Uma vez estabelecidas as condições, estacas de cravo de uma variedade tolerante e uma susceptível ao murchamento vascular foram inoculadas com o fungo patogénico, e se avaliaram a diferentes tempos pos-inoculação os níveis de actividade desta enzima e de acumulação de lignina. A variedade tolerante (Bárbara), apresentou uma indução de POD às 8 e 48 h pos-inoculação e um aumento no conteúdo de lignina às 48 y 72 h. Por outro lado, na variedade susceptível (Delphi) não se encontraram mudanças significativas nos níveis de POD nem no conteúdo de lignina. Se estabeleceu, por tanto, que a indução da actividade POD está associada à lignificação que a nível de talo faz parte dos mecanismos associados à defesa no modelo cravo-Fusarium oxysporum f. sp. dianthi raça 2.

Anti-inflammatory and antinociceptive activities a of eugenol essential oil in experimental animal models / Atividades antiinflamatória e antinociceptiva do eugenol em modelos experimentais em animais

Eugenia caryophyllata, popularmente conhecida como "cravo-da-índia", cresce naturalmente na Indonésia e é cultivada em várias partes do mundo, incluindo o Brasil. O cravo-da-índia é utilizado em culinária, em farmácia, perfumaria e cosméticos. O óleo essencial extraído do cravo-da-índia cujo principal componente é o eugenol tem sido utilizado em odontologia como anti-séptico e analgésico. O objetivo deste estudo foi avaliar as atividades antiinflamatória e antinociceptiva do eugenol de uso odontológico, administrado oralmente, em modelos experimentais in vivo. A atividade antiinflamatória do eugenol foi avaliada através do volume de exsudato e migração leucocitária no teste de pleurisia e do edema de pata de rato induzido pela carragenina. A atividade antinociceptiva foi avaliada através dos testes de contorções induzidas pelo ácido acético e da placa quente. O eugenol (200 e 400 mg/kg) reduziu o volume de exsudato pleural sem interferir na contagem de leucócitos totais presentes na pleura. Na dose de 200 mg/kg, o eugenol inibiu significativamente o edema de pata, 2-4 h após a injeção do agente flogístico. No teste da placa quente, a administração do eugenol (100 mg/kg) mostrou atividade significativa à reação de desconforto-tempo dependente, avaliada como a latência da resposta, inibida pela meperidina. Eugenol na doses de 50, 75 e 100 mg/kg apresentou efeito antinociceptivo significativo no teste de contorções abdominais induzidas pelo ácido acético em comparação com o grupo controle. Os dados obtidos indicam que o eugenol apresenta atividade antiinflamatória e antinociceptiva periférica.

Eugenia caryophyllata, popular name "clove", is grown naturally in Indonesia and cultivated in many parts of the world, including Brazil. Clove is used in cooking, food processing, pharmacy; perfumery, cosmetics and the clove oil (eugenol) have been used in folk medicine for manifold conditions include use in dental care, as an antiseptic and analgesic. The objective of this study was evaluated the anti-inflammatory and antinociceptive activity of eugenol used for dentistry purposes following oral administration in animal models in vivo. The anti-inflammatory activity of eugenol was evaluated by inflammatory exudates volume and leukocytes migration in carrageenan-induced pleurisy and carrageenan-induced paw edema tests in rats. The antinociceptive activity was evaluated using the acetic acid-induced writhing and hot-plate tests in mice. Eugenol (200 and 400 mg/kg) reduced the volume of pleural exudates without changing the total blood leukocyte counts. At dose of 200 mg/kg, eugenol significantly inhibited carrageenan-induced edema, 2-4 h after injection of the flogistic agent. In the hot-plate test, eugenol administration (100 mg/kg) showed unremarkable activity against the time-to-discomfort reaction, recorded as response latency, which is blocked by meperidine. Eugenol at doses of 50, 75 and 100 mg/kg had a significant antinociceptive effect in the test of acetic-acid-induced abdominal writhing, compared to the control animals. The data suggest that eugenol possesses anti-inflammatory and peripheral antinociceptive activities.

INDUCCIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA FENILALANINA AMONIO LIASA EN CLAVEL (Dianthus caryophyllus L) POR ELICITORES DEL HONGO Fusarium oxysporum f. sp. Dianthi raza 2 / PHENYLALANINE AMMONIUM LIASE INDUCTION ON CARNATION (Dianthus caryophyllus L) BY ELICITORS FROM Fusarium oxysporum f. sp. Dianthi race 2 / INDUÇÃO DA ACTIVIDADE FENILALANINA AMONIO LIASA EM CRAVO (Dianthus caryophyllus L) POR ELICITORES DO FUNGO Fusarium oxysporum f. sp. Dianthi raça 2

Con el fin de evaluar el comportamiento a nivel del tallo de la enzima fenilalanina amonio liasa (PAL, por su nombre en inglés phenylalanine ammonia liase), durante la interacción clavel-Fusarium oxysporum f. sp. dianthi raza 2, se seleccionaron las condiciones para su extracción y cuantificación de la actividad. Para la extracción a partir de tallos y raíces se seleccionó un tratamiento previo del material vegetal con acetona y posterior extracción con buffer borato pH 8,8 con EDTA 2mMy ß-mercaptoetanol 18 mM. Para su cuantificación a nivel del tallo se debe realizar un ensayo discontinuo por 10 min, a 37 oC, pH 8,0 y a una concentración de sustrato de 35 mM. Adicionalmente se muestra mediante un ensayo in vivo el efecto que tiene, como inductor de esta enzima, la aplicación de un extracto crudo del patógeno. Los resultados observados indican que esta enzima se induce significativamente en tallos de claveles de la variedad tolerante “Kiss” durante el tratamiento por aspersión con el extracto crudo del patógeno, mientras que dicha inducción fue inexistente para la infección directamente con el patógeno. La inducción en esta variedad indica que en este extracto del patógeno se presentan elicitores potenciales para la inducción de esta enzima y por ende de la ruta fenilpropanoide.

The conditions of extraction and quantification of activity during interaction of carnation and Fusarium oxysporum f. sp. dianthi race 2 were selected to evaluate the dynamics of the enzyme Phenylalanine Ammonium Lyase (PAL) at the carnations steam. For the extraction from roots and stems a previous treatment with acetone and extraction with borate pH 8.8, EDTA 2 mMand mercaptoethanol 18 mM buffer were selected. For the quantification at steam level a discontinous assay for 10 min at 37 °C, pH 8.0 and substrate concentration 35mMshould be done. In addition an in vivo assay shows the effect that the applications of a raw extract of the pathogen as inductor of this enzyme. The results show that the enzyme is significantly induced in carnations stems of the tolerant variety “Kiss” during the treatment by aspersion with raw extract of the pathogen while the induction was non existing for direct infection with the pathogen. The induction in this variety shows that in the pathogen extract are present elicitors for the induction of this enzyme and thus the phenylpropanoid path.

Para avaliar o comportamento da enzima fenilalanina amonio liasa (PAL, pelo seu nome em inglês phenylalanine ammonia liase) no caule durante a interação cravo- Fusarium oxysporum f. sp. dianthi raça 2, foram seleccionadas as condiçes ideais para a sua extração e quantificação na atividade. Para a extração a partir de caules e raízes foi seleccionado um tratamento prévio do material vegetal com acetona e posterior extração com borato pH 8,8 com EDTA 2 mMe ß-mercaptoetanol 18 mM. Para a quantificação da enzima no caule, deve-se realizar um ensaio descontínuo por 10 min., a 37 °C, pH 8,0 e a uma concentração de substrato de 35 mM. Além do mais, mostra-se mediante um ensaio in vivo, o efeito que tem como inductor desta enzima a aplicação de um extracto cru do patógeno. Os resultados observados indicam que esta enzima é induzida significativamente en caules de cravos da variedade tolerante “Kiss” durante o tratamento por aspersão com o extrato cru do patógeno, enquanto que esta indução foi inexistente para a infecção directa com o patógeno. A indução apresentada nesta variedade indica que neste extrato do patógeno estão presentes potencias elicitores para a indução desta enzima e portanto da rota fenilpropanoide.

Sistema radicular de três porta-enxertos para lima ácida 'tahiti' no estado do Piauí / Evaluation of three rootstocks root system for acid lime 'tahiti' at Piauí state

O objetivo deste trabalho foi avaliar o desenvolvimento radicular de três porta-enxertos para lima ácida‘Tahiti’ [Citrus latifolia (Yu.Tanaka) Tanaka]: limão Cravo (C. limonia Osbeck); citrumelo Swingle[Poncirus trifoliata (L.) Raf. x C. paradisi Macf.]; trifoliata Flying Dragon (P. trifoliata (L.) Raf.var. (FD),no município de José de Freitas, Piauí, localizado a 04º 52’ latitude S e 42º 42’ longitude W, e altitude de110m, onde predomina clima Aw. Foram abertas trincheiras com quatro repetições, para colocação dequadro-gabarito de madeira, com divisórias de 0,1 m na profundidade por 0,2 m na largura, perfazendocinco camadas na profundidade e seis posições na largura, definindo quadrículas de 200 cm2 na parededas trincheiras, de onde foram obtidas fotografias digitais. Estas fotografias foram analisadas pelosoftware SIARCS 3.0 para dimensionamento do sistema radicular e os dados obtidos, submetidos àanálise de variância e posteriormente ao teste de Tukey, ao nível de 5% de probabilidade. O delineamentoexperimental foi inteiramente casualizado. Os sistemas radiculares dos porta-enxertos tiveramconcentração de 90% até a profundidade de 0,4 m, sendo que nos primeiros 0,2 m concentrou-se 60% docomprimento das raízes. O sistema radicular do limão Cravo demonstrou ser superior, em comprimento(cm.200 cm-2), aos dos porta-enxertos trifoliata Flying Dragon e citrumelo Swingle.

The objective of this work was to evaluate the development of the root system of three rootstocks for'Tahiti'acid lime [Citrus latifolia (Yu.Tanaka) Tanaka]: Rangpur lime (C. limonia Osbeck); Swinglecitrumelo [Poncirus trifoliata (L.) Raf. x C. paradisi Macf.]; Flying Dragon trifoliate (P. trifoliata (L.)Raf.var. (FD) ­ in the soil and environment conditions of the county of José de Freitas, Piauí, located on04º 52' latitude S and 42º 42' longitude W and 110 m of altitude, in Aw climate. It was used the trenchmethod. A wooden frame divided into 0.1 x 0.2 m parts was fixed in the soil profile and a digital photographwas taken from each part. These photographs were analyzed by software SIARCS 3.0 for sizing of theroot system and the data gotten, submitted to the analysis of variance with Tukey test at the level of 5%of probability. The experimental design was entirely randomized, with three treatments (rootstocks) andfour replications (trenches). The root systems of the rootstocks had 90% of concentration until thedepth of 0,4 m, and it was observed that 60% of the roots were concentrated in the first 0,2 m. The rootsystem of the Rangpur lime demonstrated to be superior, in lenght (cm.200 cm-²) to the Flying Dragontrifoliate and Swingle citrumelo root systems.