Hemoglobina Glicada como ferramenta na avaliação do controle glicêmico de pacientes / The Glycated Hemoglobin as an evaluation tool on glycemic control of diabetic patients

Diabetes mellitus é uma síndrome de etiologia múltipla, caracterizada por hiperglicemia crônica que pode levara alterações estruturais de tecidos e funções através da promoção da glicação de proteínas, entre elas a hemoglobina. Adeterminação da hemoglobina glicada é parâmetro de escolha para a monitorização do controle glicêmico do paciente diabético e sua dosagem deve ser feita, pelo menos, duas vezes por ano, uma vez que está ligada à evolução das complicações da doença. Após aprovação junto ao Comitê de Ética em Pesquisa envolvendo seres humanos, foram analisados os resultados das dosagens de hemoglobina glicada e dados como idade e gênero dos pacientes atendidos no primeiro semestre de 2006, no Laboratório de Análises Clínicas da UNIPAR, Umuarama, Paraná. As dosagens foram realizadas pela técnica de cromatografia de troca iônica em minicoluna. Foram atendidos 183 pacientes e 38% estavam com o controle glicêmico comprometido, não havendo diferença significativa entre gênero e idade dos pacientes. Trintapacientes realizaram duas dosagens neste período e pôde-se notar diminuição significativa na concentração de hemoglobina glicada. A manutenção do nível de hemoglobina glicada nos valores de referência é considerada a principal meta no controle do diabetes.

Diabetes mellitus is a syndrome of multiple etiologies, characterized by chronic hyperglycemia which can leadto any functional and tissue alteration throughout the protein gaining, among them, the hemoglobin. The glycatedhemoglobin determination is considered a model of choice to control the level of glycemia on patients who suffers of diabetes and its dosage must be done, at least, twice a year, once it is closely connected to the disease evolution. Right after the research approval on the ethics committee envolving human beings, it was made an analysis on the results of glycated hemoglobin dosages as well as on datas as age and gender of existing patients on the first semester of 2006, at Laboratório de Análises Clínicas da Universidade Paranaense-UNIPAR. The dosages were executed through a chromatographic ionic technique in minicolumns. An amount composed by 183 patients had, as result, a glycemic endanger of 38%, without anyrelevant difference once considering age and gender. Thirty patients have taken two dosages by this period and it was able to realize that there was a presence of a significant reduction on glycated hemoglobin concentration. The maintenance of glycated hemoglobin on references level is considered the most important goal on diabetes control.

A new methodology for polyvalent intravenous immunoglobulin solution production with a two-stage process of viral inactivation

Highly purified intravenous immunoglobulin G concentrate (IV IgG) was produced with the use of polyethylene glycol associated to a single-stage precipitation by ethanol, instead of the classic Cohn-Oncley process, which employs cold alcohol as the precipitating agent, in a three-stage process. Precipitation of crude fraction containing more than 95% of immunoglobulin G was performed by liquid chromatography with a cation exchanger, CM-Sepharose, as a stationary phase. During the process, the product was subjected to two-stage viral inactivation. The first stage was performed by the action of sodium caprylate, 30 mM at pH 5.1+/- 0.1, and the second stage was performed by the action of a solvent-detergent mixture. The finished product was formulated at 5% with 10% sucralose as the stabilizing agent. The process yields 3.3g of IgG/liter of plasma. The finished product analysis showed an anti-complementary activity lower than 1CH50. Polymer and aggregate percent levels were lower than 3% in the five batches studied. The analysis of neutralizing capacity showed the presence of antibacterial and antiviral antibodies in at least three times higher concentrations than the levels found in source plasma. The finished product fulfilled all purity requirements stated in the 4th edition of the European pharmacopeia.

Obteve-se concentrado de imunoglobulina G intravenosa IgGIV, altamente purificado, utilizando-se polietilenoglicol associado a uma única etapa de precipitação por etanol, em substituição ao tradicional método descrito por Cohn-Oncley, que emprega, em três etapas, o mesmo álcool resfriado, como agente precipitante. A purificação da fração bruta contendo mais de 95% de imunoglobulina G foi realizada utilizando-se cromatografia líquida com um trocador de cátion, a CM-Sepharose, como fase estacionária. Durante o processamento o produto foi submetido a dupla inativação viral sendo a primeira pela ação do caprilato de sódio, 30 mM a pH 5,1+/- 0,1 e a segunda por ação de mistura de solvente/detergente. O produto acabado foi formulado a 5% utilizando-se sucralose 10% como estabilizante. O rendimento da metodologia foi de 3,3g de IgG/litro de plasma. A análise do produto acabado demonstrou atividade anti-complementar inferior a 1CH50. O valor percentual de polímeros e agregados em cinco lotes realizados foi inferior a 3%. O estudo da capacidade de neutralização demonstrou a presença de anticorpos anti-bacterianos e anti-virais em concentração pelo menos três vezes maior que o plasma de origem. O produto acabado apresentou conformidade com todos os requisitos de pureza dispostos na farmacopéia européia IV edição.

Obtenção de hemoglobina purificada. Uso de resinas de troca aniônica para a eliminação de fosfolipídeos residuais / Stroma-free hemoglobin: Using anion-exchange chromatography to eliminate residual phospholipids

A hemoglobina humana (Hb)vem sendo usada como ponto de partida para o desenvolvimento de substitutos para o sangue. Antes de ser submetida a reações de modificação química, a Hb precisa ser obtida com alto grau de pureza. Neste trabalho, concentrados de hemácias foram tratados por métodos convencionais para a obtenção de amostras de Hb, sob a forma de carbonil-hemoglobina (HbCO). A técnica de cromatografia de troca iônica foi usada com o objetivo de verificar-se a eficiência de resinas aniônicas na eliminação de fosfolipídeos da parede celular, ainda residuais nas soluções de HbCO. Experimentos foram realizados com duas resinas de troca aniônica, uma fraca e outra forte. Os extratos orgânicos da solução de purificada adicionalmente por meio de cromatografia em resina de troca aniônica forte, AG MP-1, foram analisados por cromatografia líquida de alta pressão (HPLC). Os resultados mostraram que a resina AG MP-1, sob as condições utilizadas, foi capaz de reter grande parte do total de fosfolipídeos pesquisados