Búsqueda de compuestos bioactivos en Erythrina crista-galli infectada con Phomopsis sp / Search for bioactive compounds in Erythrina crista-galli infected with Phomopsis sp

Una de las estrategias alternativas utilizadas para encontrar nuevas moléculas bioactivas es investigar otros organismos que habitan en los biotopos, y se presta especial atención a las interacciones ambientales entre sí y las plantas que podrían producir aún una mayor cantidad de metabolitos secundarios. Dentro de estos microorganismos, los endófitos son considerados una importante fuente de nuevos metabolitos secundarios de explotación potencial para usos médicos, agrícolas o por otras áreas industriales. En este trabajo la investigación se centró en la búsqueda de compuestos bioactivos de Erythrina crista-galli infectada con un hongo endofítico. Se recolectaron muestras de E. crista-galli de los alrededores de la Provincia de Buenos Aires y de todas estas muestras se aisló e identificó al endófito como perteneciente al género Phomopsis. Se estudiaron las actividades antimicrobiana y antiinflamatoria de los extractos de E. crista-galli relacionadas con algunos de sus usos tradicionales. El extracto acetónico de las ramas jóvenes presentó actividad antibacteriana sobre Bacillus brevis y B. subtilis y antiinflamatoria in vivo (en edema de oreja de ratón) e in vitro (en macrófagos activados por lipopolisacáridos). Del extracto acetónico con actividad antimicrobiana se aislaron e identificaron dos compuestos, daidzeína y coumestrol, y se identificó genisteína por cromatografía contra testigos. La concentración inhibitoria mínima de daidzeína, coumestrol y genisteína frente a B. brevis fue de 137,81, 16,33 y 64,81 µM, respectivamente. En el extracto acetónico con actividad antiinflamatoria se identificaron, por cromatografía contra testigos, daidzeína, genisteína, coumestrol, biochanina A y formononetina. Genisteína, coumestrol y biochanina A presentaron una dosis efectiva 50, de 0,14, 0,54 y 0.75 µg/ml, respectivamente, en el modelo de edema en oreja de ratón. Para evaluar la influencia del endófito en el metabolismo secundario de E. crista-galli se obtuvieron plantines de cultivo. No se pudieron obtener plantines libres de hongo con los tratamientos aplicados. Se sobreinfectó un lote de plantines con Phomopsis sp. y se cuantificó su contenido de coumestrol (0,04 %) y daidzeína (0,05 %) en comparación con el de un grupo control (0,01 % y 0,02 %, respectivamente). Del extracto acetónico de los plantines sobreinfectados se aisló e identificó un glicósido de isorhamnetina. (AU)

Effects of caffeine, tea polyphenol and daidzein on the pharmacokinetics of lansoprazole and its metabolites in rats

abstract The aim of this study was to evaluate the effects of caffeine, tea polyphenol and daidzein on the pharmacokinetics of lansoprazole and its metabolites. Rats were intragastrically administered caffeine (30 mg·kg-1, once per day), tea polyphenol (400 mg·kg-1, once per day) or daidzein (13.5 mg·kg-1, once per day) for 14 days, followed by an intragastric administration of lansoprazole (8 mg·kg-1) on the 15th day. The plasma concentrations of lansoprazole and its two primary metabolites, 5-hydroxylansoprazole and lansoprazole sulfone, were determined by high-performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS). Tea polyphenol significantly elevated the Area Under the Curve (AUC) of lansoprazole from 680.29 ± 285.99 to 949.76 ± 155.18 μg/L.h and reduced that of lansoprazole sulfone from 268.82 ± 82.37 to 177.72 ± 29.73 μg/L.h. Daidzein increased the AUC of lansoprazole from 680.29 ± 285.99 to 1130.44 ± 97.6 μg/L.h and decreased that of lansoprazole sulfone from 268.82 ± 82.37 to 116.23 ± 40.14 μg/L.h. The pharmacokinetics of 5-hydroxylansoprazole remained intact in the presence of tea polyphenol or daidzein. Caffeine did not affect the pharmacokinetics of lansoprazole and its metabolites. The results imply that tea polyphenol and daidzein may inhibit the in vivo metabolism of lansoprazole by suppressing CYP3A.

resumo O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da cafeína, do polifenol do chá e da daidzeína na farmacocinética do lansoprazol e de seus metabólitos. Administraram-se, intragastricamente, aos ratos cafeína (30 mg·kg-1, uma vez ao dia), polifenol do chá(400 mg·kg-1, uma vez ao dia) ou daidzeína (13,5 mg·kg-1, uma vez ao dia), por 14 dias, seguindo-se a administração de lansoprazol (8 mg·kg-1) no 15º. dia. As concentrações plasmáticas do lansoprazol e de seus dois metabólitos primários, 5-hidroxilansoprazol e sulfona de lansoprazol, foram determinadas por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada com espectrometria de massas (CLAE-EM/EM). O polifenol do chá elevou, significativamente, a Área Sob a Curva (ASC) do lansoprazol de 680,29 ± 285,99 para 949,76 ± 155,18 μg/L.h e reduziu a da sulfona de lansoprazol de 268,82 ± 82,37 para 177,72 ± 29,73 μg/L.h. A daidzeína aumentou a ASC do lansoprazol de 680,29 ± 285,99 para 1130,44 ± 97,6 μg/L.h e reduziu a da sulfona de lansoprazol de 268,82 ± 82,37 para 177,72 ± 29,73 μg/L.h. A farmacocinética do 5-hidroxilansoprazol permaneceu intacta na presença de polifenol do chá ou daidzeína. A cafeína não afetou a farmacocinética do lansoprazol e de seus metabólitos. Os resultados sugerem que o polifenol do chá e a daidzeína podem inibir o metabolismo in vivo do lansoprazol por supressão da CYP3A.

Efecto de las isoflavonas de la soja en la salud ósea de adultos y niños / The effects of soybean isoflavones over the bone health of adult and children

Las isoflavonas de la soja son metabolitos secundarios conocidos como fitoestrógenos por su similitud estructural con el 17b-estradiol. La daidzeina y la genisteina son las principales isoflavonas de la soja. Debido a su capacidad de unión a los receptores de estrógeno (RE) >son consideradas moduladores selectivos de los receptores de estrógenos (MSRE). El consumo dietario de isoflavonas es relacionado con la disminución de los síntomas de la menopausia, prevención de enfermedades cardiovasculares y de otras enfermedades crónicas como la diabetes mellitus. Las isoflavonas han sido propuestas también para el tratamiento de algunos tipos de cáncer y la prevención de la osteoporosis; sin embargo, existe gran controversia sobre los posibles efectos estrogénicos en niños púberes y prepúberes alimentados con fórmulas a base de proteína de soja. El objetivo de este trabajo es presentar una revisión sistemática de la química de las isoflavonas de la soja y sus efectos sobre la salud del hueso en adultos y niños.

The soy isoflavones are secondary metabolites known as phytoestrogens because of its structural similarity to 17b-estradiol. Genistein and Daidzein are the main soy isoflavones. Due their binding ability to estrogen receptors (ER) they are considered as selective estrogen receptor modulators (SERM). The dietary intake of isoflavones has been associated with decreasing menopause symptoms, prevention of cardiovascular disease and some chronic diseases such as diabetes mellitus. Also, the isoflavones have been proposed for the treatment of certain kind of cancer and osteoporosis prevention, but there is a lot of controversy about the possible estrogenic effects in pubertal and prepubertal children who have been fed with soy protein-based formulas. The aim of this research is to present a systematic review of the soy isoflavone chemistry and their effects on bone health in adults and children.

The use of HPLC identification and quantification of isoflavones content in samples obtained in pharmacies / O uso do HPLC na identificação e quantificação dos teores de isoflavonas em amostras obtidas de farmácias de manipulação

Nowadays, there is a great interest in the research and the production of functional foods, such as isoflavones. Which present proven action on the prevention of health problems, such as cancer and cardiovascular diseases. Considering the importance of soybean supplements standardization, this study aimed identifying and quantifying the isoflavones in products sold at different pharmacies. Isoflavones samples were acquired in six different pharmacies specialized in the production of phytotherapic medications. The isoflavones were extracted, quantified and identified in HPLC. None of the samples, from different pharmacies, presented the isoflavones content presented on the label, i.e., 20 mg. In relation to the isoflavones profile, the highest levels found were of daidzein, with up to 66.8 ± 0.09 µg, being the lowest levels the ones of genistein. It is necessary, therefore, the adoption of methods for the standardization and characterization of the raw materials used by different pharmacies. It would assure the isoflavones content, once they are essential for the effects prescribed by the professionals in the medical area.

O uso do HPLC na identificação e quantificação dos teores de isoflavonas em amostras obtidas de farmácias de manipulação. Atualmente há um grande interesse na pesquisa e produção de alimentos funcionais, como as isoflavonas, que apresentam comprovada ação na prevenção de males, como o câncer e as doenças cardiovasculares. Considerando a importância da padronização dos suplementos de soja, o objetivo do presente estudo foi de identificar e quantificar as isoflavonas em produtos comercializados em diferentes farmácias de manipulação. Amostras de isoflavonas foram adquiridas em seis diferentes farmácias especializadas em manipulação de fitoterápicos. As isoflavonas foram extraídas, identificadas e quantificadas em CLAE. Nenhuma das amostras, das diferentes farmácias de manipulação, apresentou os teores de isoflavonas indicado no rótulo, ou seja, 20 mg. Quanto ao perfil de isoflavonas, os maiores teores encontrados nas amostras foi de daidzeína com até 66,8 ± 0,09 µg, e os menores de genistina. Sendo assim, é necessário que sejam adotados métodos de padronização e caracterização das matérias-primas utilizadas nas diferentes farmácias de manipulação. Assegurando os teores de isoflavonas, os quais são imprescindíveis para os efeitos prescritos pelos profissionais da área médica.

Excreción urinaria de isoflavonas en adultos mayores de 65 años que consumen un alimento funcional / Urinary isoflavone excretion in adults older than 65 years consuming a functional food

Functional foods (FF) are aimed to exert beneficial health effects. The isoflavones daidzein and genistein are bioactive phytoestrogens that may act as functional food ingredients. This study measured urinary excretion of these isoflavones contained in a powdered novel FF oriented to the elderly population, ready to consume as such or included into culinary preparations. The ingredients containing isoflavones were soybean flour, soybean protein (Glycine max L) and red clover extract (Trifolium pratense L). The study involved 30 volunteers of both sexes, 60 to 75 years old, who consumed 50 g of FF (n=16) or placebo food without isoflavones (n=14). The 24-hour urinary excretion of genistein and daidzein were determined before and after the intake of the mentioned foods by HPLC with diode array detector. The 24-h urinary concentration of genistein was 2.06+1.41 ppm and the daidzein concentration was 8.80 +/- 4.55 ppm. None of the individuals in the placebo group exhibited detectable amounts of isoflavones in urine. The study demonstrates that both phytoestrogens contained in the FF are bioavailable, first step to confirm their ability to exert bioactive effects. The study opens the possibility to verify the effects of both isoflavones to reduce risk factors of non transmissible chronically diseases.

Los alimentos funcionales (AF) ejercen efectos beneficiosos en la salud. Las isoflavonas daidzeína y genisteína son fitoestrógenos bioactivos que pueden actuar como ingredientes alimentarios funcionales. En este trabajo se evalúa la excreción urinaria de 24 horas de estas isoflavonas contenidas en un nuevo AF en polvo, de preparación instantánea, para ser consumido solo o incorporado en preparaciones, especialmente orientado a adultos mayores. Los ingredientes aportadores de isoflavonas son harina de soya, proteína de soya (Glycine max L.) y extracto de trébol rojo (Trifoliumpratense L.). El estudio se realizó en 30 voluntarios seleccionados de ambos sexos, de 60 a 75 años, divididos aleatoriamente en dos grupos, que consumieron una porción de 50 g de alimento funcional (n=16) o alimento placebo sin ingredientes aportadores de isoflavonas (n=14). La excreción urinaria de daidzeína y genisteína se determinó en la orina de 24 horas antes de la ingesta y posterior a la ingestión del alimento, y fueron cuantificadas por HPLC con detector de arreglo de diodo. La concentración urinaria de genisteína fue 2,06 +/- 1,41 ppm y la de daidzeína fue 8,80 +/- 4,55 ppm. En el grupo placebo las isoflavonas no fueron detectadas en la orina. El estudio muestra que las isoflavonas ingeridas a través del AF son biodisponibles, primer paso para poner en evidencia su carácter bioactivo. El trabajo abre la posibilidad de verificar los efectos de las isoflavonas contenidas en estos AF sobre la disminución del riesgo de enfermedades crónicas no transmisibles.

Determinação de daidzeína, genisteína e gliciteína em cápsulas de isoflavonas por cromatografia em camada delgada (CCD) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) / Determination of daidzein, genistein and glycitein in isoflavone capsules by thin layer chromatography (TLC) and high performance liquid chromatography (HPLC)

A utilização de produtos naturais e suplementos contendo extratos secos de isoflavonas aumentou na última década, devido, principalmente, aos efeitos benéficos atribuídos a estes compostos no alívio dos sintomas da menopausa. Genisteína, daidzeína e gliciteína são as agliconas mais abundantes nos extratos de soja, ocorrendo também como glicosídeos. Tendo em vista seus usos, não existe ainda na literatura uma definição da quantidade mínima de cada uma das agliconas que os extratos ou cápsulas de isoflavonas devem ter, e também não existe um método oficial para o controle de qualidade dos mesmos. O presente trabalho apresenta um método por CCD para análise qualitativa das três agliconas e de seus glicosídeos em extratos e cápsulas de isoflavonas, antes e após hidrólise ácida. A análise quantitativa das cápsulas de isoflavonas, realizada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), revelou grandes variações nos teores das três agliconas, após hidrólise ácida. Os teores variaram da seguinte forma, nos 18 lotes de cápsulas avaliados: daidzeína (13,34 a 76,20 mg/cápsula), genisteína (0,61 a 27,18 mg/cápsula) e gliciteína (0,49 a 8,80 mg/cápsula).

The use of herbal products and supplements based on isoflavone dry extracts has increased considerably in the last decade, mainly due to beneficial effects to relief of the menopausal symptoms credited to those compounds. Genistein, daidzein and glycitein are the most abundant isoflavone aglycones found in soy extract, where they also occur as glycosides. Concerning their uses, there is neither standardization regarding the minimum content of each aglycone in the extracts or capsules, nor an official method to the quality control of these products. The present work presents a TLC method for qualitative analysis of the three aglycones and their glycosides in extracts and capsules of isoflavones, before and after acid hydrolysis. The quantitative analysis of the isoflavone capsules, carried out by high performance liquid chromatography (HPLC), showed high variation in the content of the three aglycones, after acid hydrolysis. The contents varied in the following way, in the 18 batches of evaluated capsules: daidzein (13.34 to 76.20 mg/capsule), genistein (0.61 to 27.18 mg/capsule) and glycitein (0.49 to 8.80 mg/capsule).