False-negative result in molecular diagnosis of SARS-CoV-2 in samples with amplification inhibitors / Resultado falso negativo no diagnóstico molecular de SARS-CoV-2 em amostras com inibidores de amplificação

ABSTRACT Introduction: Although reverse transcription-polymerase chain reaction (rRT-PCR) is the gold standard method for detecting severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2), some factors, such as the presence of amplification inhibitors, lead to false-negative results. Objective: Here we describe the differences between rRT-PCR results for SARS-CoV-2 infection in normal and diluted samples, simulating the need for dilution due to the presence of amplification inhibitors. Material and method: Viral ribonucleic acid (RNA) from samples of nasopharyngeal swabs from 20 patients previously detected as "Negative" and 21 patients detected as "Positive" for SARS-CoV-2 was performed with the EasyExtract DNA-RNA kit (Interprise®). The rRT-PCR was performed with the OneStep/COVID-19 kit (IBMP), with normal and diluted (80 µl of H2O RNAse free) samples, totaling 82 tests. Results: The results indicate that there is an average variation (a < 0.05) delaying the Cq between the results of amplification of the internal control (IC), N gene (NG), and ORF1ab (OF), 1.811 Cq, 3.840 Cq, and 3.842 Cq, respectively. Discussion: The extraction kit does not completely purify the inhibitor compounds; therefore, no amplified product result may occur. In this study, we obtained a 19.04% false-negative diagnosis after sample dilution; this process reduces the efficiency of rRT-PCR to 29.8% in detecting SARS-CoV-2. Conclusion: Knowing the rRT-PCR standards of diluted samples can assist in the identification of false-negative cases and, consequently, avoid incorrect diagnosis.

RESUMEN Introducción: Aunque la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa reversa en tiempo real (rRT-PCR) sea el método de referencia para detección del coronavirus tipo 2 del síndrome respiratorio agudo grave (Sars-CoV-2), algunos factores como la presencia de inhibidores de amplificación conducen a resultados falsos negativos. Objetivo: Describimos las diferencias entre los resultados de rRT-PCR para infección por Sars-CoV-2 en muestras normales y diluidas, simulando la necesidad de dilución debido a la presencia de inhibidores de amplificación. Material y método: La extracción de ácido ribonucleico (ARN) viral de muestras de hisopos nasofaríngeos de 20 pacientes previamente detectados como "negativos" y 21 pacientes detectados como "positivos" para Sars-CoV-2 se realizó con el kit Easy Extract DNA-RNA (Interprise®). La rRT-PCR se realizó con el kit OneStep/Covid-19 (IBMP), con muestras normales y diluidas (80 µl de H2O libre de ARNasa), totalizando 82 pruebas. Resultados: Los resultados indican que hay una variación media (a < 0,05) retrasando el ciclo de cuantificación (Cq) entre los resultados de amplificación del control interno (CI), gen N (GN) y ORF1ab (OF) de 1,811 Cq, 3,840 Cq y 3,842 Cq. Discusión: El kit de extracción no purifica completamente los compuestos inhibidores; por lo tanto, puede ocurrir no amplificación. Obtuvimos un diagnóstico falso negativo de 19,04% después de la dilución de la muestra; ese proceso reduce la eficiencia de la rRT-PCR hacia 29,8% en la detección de Sars-CoV-2. Conclusión: Conocer los patrones de la rRT-PCR de muestras diluidas puede ayudar en la identificación de casos falsos negativos y, por consiguiente, evitar un diagnóstico equivocado.

RESUMO Introdução: Embora a reação em cadeia da polimerase de transcrição reversa (rRT-PCR) seja o método padrão-ouro para detecção de coronavírus da síndrome respiratória aguda grave 2 (SARS-CoV-2), alguns fatores como a presença de inibidores de amplificação levam a resultados falso negativos. Objetivo: Descrevemos as diferenças entre os resultados de rRT-PCR para infecção por SARS-CoV-2 em amostras normais e diluídas, simulando a necessidade de diluição devido à presença de inibidores de amplificação. Material e método: A extração de ácido ribonucleico (RNA) viral de amostras de suabes nasofaríngeos de 20 pacientes previamente detectados como "negativos" e 21 pacientes detectados como "positivos" para SARS-CoV-2 foi realizada com kit o EasyExtract DNA-RNA (Interprise®). A rRT-PCR foi realizada com o kit OneStep/COVID-19 (IBMP), com amostras normais e diluídas (80 µl de H2O RNAse-free), totalizando 82 testes. Resultados: Os resultados indicam que existe uma variação média (a < 0,05) atrasando o Cq entre os resultados de amplificação do controle interno (CI), gene N (GN) e ORF1ab (OF) de 1,811 Cq, 3,840 Cq e 3,842 Cq, respectivamente. Discussão: O kit de extração não purifica completamente os compostos inibidores, portanto, pode ocorrer não amplificação. Obtivemos um diagnóstico falso negativo de 19,04% após a diluição da amostra; esse processo reduz a eficiência da rRT-PCR para 29,8% na detecção de SARS-CoV-2. Conclusão: Conhecer os padrões da rRT-PCR de amostras diluídas pode auxiliar na identificação de casos falso negativos e, consequentemente, evitar um diagnóstico incorreto.

Dilución isotópica con deuterio para determinar ingesta de leche humana y composición corporal materna / Deuterium-oxide turnover technique to assess breast milk intake and maternal body composition / Diluição isotópica com deutério para determinar a ingestão de leite humano e a composição corporal materna

El objetivo del trabajo fue describir la aplicación de la técnica de dilución isotópica con deuterio de dosis a la madre para determinar la ingesta de leche materna y la composición corporal de las madres, en distintos tipos de lactancia. El método analítico se aplicó en cuatro casos modelo de pares madre-lactante en los cuales las madres recibieron una dosis oral de agua deuterada, recolectándose 6 muestras de saliva de ambos durante 15 días. El enriquecimiento de deuterio se determinó en un espectrómetro FTIR-Shimadzu-Affinity obteniéndose la ingesta de leche materna (ILM) y de agua de otras fuentes (Fd). Se observó una variación del enriquecimiento de deuterio en la saliva del lactante, asociada al tipo de lactancia recibida, siendo mayor en el caso de lactancia materna exclusiva (LME). Asimismo, a medida que aumentó Fd, disminuyó ILM. Además, fueron determinadas el agua corporal, la masa libre de grasa y la masa grasa materna. La transferencia de las habilidades técnicas y del conocimiento a través de metodologías innovadoras para determinar la ingesta de leche materna es de utilidad como herramienta de evaluación de la alimentación del lactante y para investigar en qué medida la lactancia natural es reemplazada por la ingesta de otros alimentos. Mejorar la estimación de la LME contribuye al conocimiento de la recomendación de OMS y UNICEF de mantener la misma hasta el sexto mes de vida.

The aim of this study was to describe the application of the dose-to-the-mother deuterium-oxide turnover technique to determine the breast milk intake and body composition of mothers in different types of breastfeeding. This analytical method was performed in four mother-infant pairs at 4 months from birth. Mothers received an oral dose of deuterated water, collecting 6 samples of saliva from mother and baby during a period of 15 days. Deuterium enrichment was determined in a Shimadzu FTIR-spectrometer-Affinity to obtain the intake of breast milk and water from non-breast milk sources. In this study, a variation of the enrichment of deuterium in the saliva of the infant was observed, being higher when the infant was exclusively breastfed. As non-breast milk water increased, the intake of human milk decreased. Furthermore, maternal total body water, fat free mass and fat mass were determined. To improve technical skills and knowledge through innovative methods of breast milk measurement can be useful as an assessment tool for evaluating infant feeding and investigating the extent to which breast milk is being replaced by the consumption of other foods in order to estimate exclusive breastfeeding in the future. This would contribute to the knowledge of maintaining breastfeeding until the sixth month of life, as it is recommended by WHO and UNICEF.

O objetivo deste estudo foi descrever a aplicação da técnica de diluição isotópica com deutério de dose à mãe para determinar a ingestão de leite materno e a composição corporal das mães, em diferentes tipos de aleitamento. O método analítico foi aplicado em quatro casos modelo de pares mães-lactante nos quais as mães receberam uma dose oral de água deuterada, coletando-se 6 amostras de saliva de ambos (mães e lactantes) durante 15 días. O enriquecimento de deutério foi determinado em um espectrômetro FTIR-Shimadzu-Affinity, sendo obtida a ingestão de leite materno (ILM) e de água proveniente de outras fontes (Fd). Observou-se uma variação do enriquecimento de deutério na saliva do lactante, associada ao tipo de aleitamento recebido, sendo maior no caso de aleitamento materno exclusivo (AME). Também, na medida que aumentou Fd, diminuiu ILM. Além disso, a água corporal, a massa livre de gordura y a massa gorda materna foram determinadas. A transferência das habilidades técnicas e do conhecimento através de metodologias inovadoras para determinar a ingestão de leite materno é de utilidade como ferramenta de avaliação da alimentação do lactante e para investigar em que medida o aleitamento natural é substituído pela ingestão de outros alimentos. Melhorar a avaliação do AME contribui ao conhecimento da recomendação da OMS e UNICEF de manter a mesma até o sexto mês de vida.

Estudo randomizado comparando toxina onabotulínica diluída em lidocaína e epinefrina versus solução salina para o tratamento das linhas perioculares / Randomized study comparing onabotulinum toxin diluted in lidocaine and epinephrine versus saline solution for the treatment of periocular lines

Introdução: A diluição-padrão da toxina botulínica é feita com solução salina 0,9%. Alguns estudos mostram que diluída em lidocaína e epinefrina a toxina mantém sua função sem comprometer a eficácia ou segurança. Objetivo: Estabelecer se o efeito paralisante da toxina onabotulínica tipo A reconstituída em anestésico (lidocaína a 2%) e agente vasoconstritor (epinefrina 1:50.000) é tão efetivo quanto o da mesma toxina reconstituída em solução salina em 48 horas, uma semana, duas, quatro,12 e 24 semanas para o tratamento de linhas perioculares e comparar a tolerância à dor de uma e outra possibilidade. Métodos: 15 pacientes com rugas perioculares foram randomizadas para receber toxina onabotulínica diluída em lidocaína com adrenalina ou diluída em solução salina e foram reavaliadas em 48 horas, uma semana, duas, quatro, 12 e 24 semanas. Resultados: Os dados indicam que não houve diferença na simetria e na durabilidade da toxina botulínica, nem tampouco na dor durante a aplicação. Conclusões: Não houve diferença estatisticamente significativa na frequência de paralisia muscular periocular lateral e na simetria decorrente das aplicações de toxina botulínica reconstituída em lidocaína com epinefrina ou em solução salina, resultado consistente com estudos prévios.

Introduction: Standard dilution of botulinum toxin is performed with 0.9% saline solution. Some studies show that when diluted in lidocaine and epinephrine, the toxin preserves its function without compromising effectiveness or safety. Objective: To establish whether the paralyzing effect of ona-toxin type A reconstituted in anesthetic (2% lidocaine) and vasoconstrictor agent (1: 50,000 epinephrine) is as effective as that of the same toxin reconstituted in saline solution, at 48 hours, 1 week, 2, 4, 12 and 24 weeks, for the treatment of periocular lines. To compare the tolerance to pain between the two reconstitution alternatives. Methods: Fifteen patients with periocular wrinkles were randomized to receive onabotulinum toxin diluted in lidocaine with epinephrine or in saline. Re-evaluations were carried out in 48 hours, 1 week, 2, 4, 12 and 24 weeks. Results: The data indicate that there was no difference in the symmetry and durability of the botulinum toxin, nor in the pain during the application. Conclusions: There was no statistically significant difference in the frequency of lateral periocular muscle paralysis and symmetry resulting from the applications of onabotulinum toxin reconstituted in lidocaine with epinephrine or in saline solution. This outcome is consistent with those of previous studies.

Spatial-temporal variation of dissolved inorganic material in the Amazon basin / Variação espaço-temporal do material inorgânico dissolvido na bacia Amazônica

The Amazon River basin is important in the contribution of dissolved material to oceans (4% worldwide). The aim of this work was to study the spatial and the temporal variability of dissolved inorganic materials in the main rivers of the Amazon basin. Data from 2003 to 2011 from six gauging stations of the ORE-HYBAM localized in Solimões, Purus, Madeira and Amazon rivers were used for this study. The concentrations of Ca2+, Na+, K+, Mg2+, Cl-, SO4 -2, HCO3 - and SiO2 were analyzed. At the stations of Solimões and Amazon rivers, the concentrations of Ca2+, Mg2+, HCO3 - and SO4 -2 had heterogeneous distribution over the years and did not show seasonality. At the stations of Madeira river, the concentration of these ions had seasonality inversely proportional to water discharge (dilution-concentration effect). Similar behavior was observed for the concentrations of Cl- and Na+ at the stations of the Solimões, Amazon and Madeira rivers, indicating almost constant release of Cl- and Na+ fluxes during the hydrological cycle. K+ and SiO2 showed almost constant concentrations throughout the years and all the stations, indicating that their flows depend on the river discharge variation. Therefore, the temporal variability of the dissolved inorganic material fluxes in the Solimões and Amazon rivers depends on the hydro-climatic factor and on the heterogeneity of the sources. In the Madeira and Purus rivers there is less influence of these factors, indicating that dissolved load fluxes are mainly associated to silicates weathering. As the Solimões basin contributes approximately 84% of the total flux of dissolved materials in the basin and is mainly under the influence of a hydro-climatic factor, we conclude that the temporal variability of this factor controls the temporal variability of the dissolved material fluxes of the Amazon basin.

A bacia do rio Amazonas é importante no aporte de material dissolvido para o oceano (4% a nível mundial). O objetivo deste trabalho foi estudar a variabilidade espaço-temporal do material inorgânico dissolvido nos principais rios da bacia Amazônica, para o qual foram utilizados dados entre 2003 e 2011 de seis estações hidrológicas do ORE-HYBAM localizadas nos rios Solimões, Purus, Madeira e Amazonas, analisados Ca2+, Na+, K+, Mg2+, Cl-, SO4 -2, HCO3 - e SiO2. Nas estações do rio Solimões e Amazonas as concentrações de Ca2+, Mg2+, HCO3 - e SO4 -2 tiveram distribuição heterogênea ao longo dos anos e não apresentaram sazonalidade. Nas estações do rio Madeira a concentração desses íons mostraram sazonalidade inversamente proporcional à vazão (efeito diluição-concentração). Comportamento similar tiveram Cl- e Na+ nas estações dos rios Solimões, Amazonas e Madeira, indicando liberação quase constante desses fluxos ao longo do ciclo hidrológico. K+ e SiO2 apresentaram concentrações quase constantes ao longo dos anos e entre as estações, indicando que seus fluxos dependem da variação da vazão. Portanto, a variação temporal do fluxo de material inorgânico dissolvido no rio Solimões e Amazonas depende do fator hidroclimatológico e da heterogeneidade das fontes. Nos rios Madeira e Purus há menor influência desses fatores, o que evidencia maior aporte dos silicatos. Como a bacia do Solimões aporta aproximadamente 84% do fluxo total de material dissolvido na bacia e está sob influência, principalmente, do fator hidroclimático, pode-se concluir que a variabilidade temporal desse fator controla a temporalidade dos fluxos do material dissolvido na bacia Amazônica.

Turnover de carbono nos tecidos de frangos de corte em diferentes fases de crescimento / Carbon turnover in poultry tissues at different growth stages

Este trabalho objetivou determinar o turnover do carbono no Pectoralis major, quilha, tíbia e fígado de frangos de corte em seus diferentes períodos de crescimento, utilizando a técnica dos isótopos estáveis. Foram utilizados 216 pintos de corte, machos, Cobb. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado e consistiu de sete tratamentos com dias de substituição das dietas distintos: 0; 7; 14; 21; 28; 35; 42 dias de idade. Para mensurar o turnover do carbono nos tecidos em determinado intervalo de tempo, foi utilizado o modelo sigmoidal de regressão de Boltzmann ou função exponencial do tempo. Os valores de meias-vidas foram: 2,5; 2,8; 2,9; 4,9; 5,1; 5,5 e 6,0 dias para músculo peitoral; 2,7; 2,9; 3,1; 4,6; 5,3; 4,1 e 8,0 dias para quilha; 4,4; 3,6; 5,4; 5,8; 4,3; 5,2 e 6,3 dias para tíbia e 1,3; 1,9; 1,4; 1,5; 1,9; 1,7 e 2,1 dias para fígado, nos tratamentos T1, T2, T3, T4, T5, T6 e T7, respectivamente. Pode-se concluir que a tíbia possui metabolismo lento e pode indicar o sinal isotópico das dietas iniciais da criação dos frangos de corte; e o fígado, metabolismo rápido, indicado para refletir a dieta próxima da fase de avaliação.

The aim of this study was to evaluate carbon turnover on muscle tissue Pectoralis major, keel, tibia and liver of poultry at different life stages using the carbon stable isotopes technique. 216 male chick lings (Cobb) were used. The trial was conduced in a totally random distribution consisting on seven treatments with distinct days for diet substitution (0, 7, 14, 21, 28, 35, 42 days old). Either Boltzmann sigmoid regression or the exponential time function were used in order to measure the carbon isotopic turnover in a specific period of time. The half-life were: 2.5; 2.8; 2.9; 4.9; 5.1; 5.5 e 6.0 day on muscle tissue; 2.7; 2.9; 3.1; 4.6; 5.3; 4.1 e 8.0 day on keel; 4.4; 3.6; 5.4; 5.8; 4.3; 5.2 e 6.3 day on tibia and 1.3; 1.9; 1.4; 1.5; 1.9; 1.7 and 2.1 day on liver, for to treatments T1, T2, T3, T4, T5, T6 e T7 respectively. According to the results of this study, it is possible to conclude that the tibia has slowest metabolism and may indicate the isotopic signature of initial diets of poultry culture. The fast metabolism tissue, liver, is appropriated to reflect the diets fed at closer period of evaluation.

Triagem de vários excipientes para compressão direta: uma nova perspectiva com base nas propriedades funcionais / Screening of several excipients for direct compression of tablets: a new perspective based on functional properties

Os excipientes são materiais amplamente utilizados para formular fármacos através de compressão direta. No entanto, as propriedades do pó e compressão desses materiais são afetadas pela presença de lubrificantes e ingredientes ativos. Este estudo utilizou uma metodologia para avaliar a eficácia destes materiais como agentes de compressão direta. O efeito de três lubrificantes (estearato de magnésio, ácido esteárico e talco) na compressibilidade e compactação dos materiais foi avaliado pelo índice de compressibilidade e sensibilidade do lubrificante, respectivamente. Da mesma forma, a capacidade da diluição foi avaliada com um fármaco pouco compressível como o acetaminofeno. Finalmente, a recuperação elástica dos comprimidos foi avaliada aos cinco dias após a produção. Todos os lubrificantes aumentaram a compressibilidade destes materiais e a sua fluidez. No entanto, os lubrificantes hidrofóbicos, tais como o estearato de magnésio tem um efeito negativo sobre a compactação, em especial em materiais plásticos com uma superfície lisa, como o amido 1500. O amido de arroz e de mandioca e ácido algínico apresentaram a maior recuperação elástica (> 5%), indicando uma elevada tendência para a laminação. Além disso, os materiais plásticos com alta deformação, tais como o sorbitol, e polivinilpirrolidona (PVP-K30), exibiram a melhor potencial de diluição (~10%), enquanto que o ácido algínico mostrou um valor muito elevado (~ 70%). Em termos de desempenho, o sorbitol, o PVP-K30, alginato de sódio, Avicel PH-101, e de amido pré-gelatinizado são os materiais mais adequados para a compressão direta de fármacos.

Excipients are widely used to formulate solid drug forms by direct compression. However, the powder-forming and tableting properties of these excipients are affected by the presence of lubricants and active ingredients. In this study, a screening methodology was employed to test the performance of an excipient for direct compression. The effects of three lubricants (magnesium stearate, stearic acid and talc) on the compressibility and compaction of these excipients were assessed by the compressibility index and lubricant sensitivity ratio, respectively. Likewise, the dilution potential in blends with a poorly compactible drug such as acetaminophen was also assessed. Finally, the elastic recovery of tablets was evaluated five days after production. All lubricants increased the compressibility of these excipients and improved their flowability. However, hydrophobic lubricants such as magnesium stearate had a marked negative effect on compactibility, especially in plastic-deforming and more regularly-shaped materials with a smooth surface such as Starch 1500. Alginic acid, rice and cassava starches had the largest elastic recovery (>5%), indicating a tendency to cap. Moreover, highly plastic deforming materials such as sorbitol and polyvinylpyrrolidone (PVP-K30) exhibited the best dilution potential (~10%), whereas alginic acid showed a very high value (~70%). In terms of performance, sorbitol, PVP-K30, Avicel PH-101, sodium alginate and pregelatinized starch were the most appropriate excipients for the direct compression of drugs.

Wheat germination and highly diluted agitated gibberellic acid (10-30) ? a multi researcher study / Germinação do trigo e ácido giberélico em alta diluição (10-30) e agitado ? um estudo multicêntrico / Germinación de trigo y ácido giberélico en alta dilución (10-30) y agitado ? estudio multicéntrico

Grains of winter wheat (Triticum aestivum L., Capo variety) were observed under the influence of highly diluted gibberellic acid (10-30) prepared by stepwise dilution and agitation according to a protocol derived from homeopathy (?G30x?). Adequate control was used (water prepared according to the homeopathic protocol ?W30x? and/or untreated water ?W0?). Two sets of multicenter experiments were performed, 4 in 2009-2010 and 4 in 2011, involving altogether 6 researchers, 6 laboratories and 4,000 grains per treatment group. Data were found to be homogeneous within the control groups as well as within the verum groups. When the 2009-2010 experiments were pooled, mean germination rates after 24 hours were (85.9 + 2.6) for the control group and (82.1 + 5.7) for G30x (mean + SD at the level of experiments in %) (N = 2,000 per group). Verum germination rate was 4.4% lower than (i.e. equal to 96.6% of) (4.4 + 96.6 = 101) the control germination rate (100%). The difference is statistically significant (p < 0.001) and the effect size (d) is large (> 0.8). Observations at other points in time between 0 and 40 hours of germination yielded similar results. Practically no difference was found between W30x and W0 groups (p > 0.05). When the 2011 experiments were pooled, the mean germination rates after 24 hours were (73 + 12) for the control group and (73 + 14) for G30x (N = 2,000 per group), i.e. there was practically no difference between the groups (p > 0.05). We interpret the data from 2009-2010 on wheat germination within 40 hours as being in line with our previous findings on wheat stalk growth after one week, i.e. as confirmation that gibberellic acid 30x can influence, i.e. slow down, wheat development. Various possible reasons for the absence of any difference between groups in the 2011 experiments, including seasonal variance, are discussed and it is suggested to perform wheat germination experiments in the very beginning of autumn season only.

Grãos de trigo comum (Triticum sativum L., variedade Capo) foram observados sob a influência de uma alta diluição de ácido giberélico (10-30) preparada através de diluição e agitação seriadas seguindo um protocolo derivado da homeopatia (G30x). Foram utilizados controles adequados (água preparada segundo o protocolo homeopático - W30x - e/ou água sem tratamento - W0 -). Foram realizadas duas séries de experimentos multicêntricos, 4 em 2009-2010 e 4 em 2011, incluindo 6 pesquisadores, 6 laboratórios, e 4.000 grãos em cada grupo de tratamento. Os dados foram homogêneos dentro dos grupos controle e verum. Na análise combinada dos experimentos de 2009-2010, as taxas médias de germinação em 24 h foram (85,9 + 2,6) no grupo controle e (82,1 + 5,7) no grupo G30x (média + DP no nível dos experimentos em %, N = 2.000 por grupo). A taxa de germinação de verum foi 4,4% menor (96,6% de 4,4 + 96,6 = 101) que a do controle (100%). Essa diferença é estatisticamente significativa (p < 0,001) e o tamanho do efeito (d) é grande (> 0,8). Observações realizadas em outros momentos entre 0 e 40 horas de germinação constaram resultados similares. Praticamente, não foi achada diferença entre os grupos W30x e W0 (p > 0,05). Na análise combinada dos experimentos de 2011, as taxas médias de germinação em 24 h foram (73 + 12) no grupo controle e (73 + 14) no grupo G30x (N = 2.000 por grupo), ou seja, praticamente não houve diferença entre os grupos (p > 0,05). Consideramos que os dados de 2009-2010 sobre a germinação do trigo em até 40 h concordam com nos achados prévios no crescimento do caule de trigo em uma semana, ou seja, confirmam que ácido giberélico 30x pode influenciar, isto é, tornar mais lento, o desenvolvimento do trigo. São discutidos vários motivos para a ausência de toda diferença entre os grupos nos experimentos conduzidos em 2011, incluindo variações sazonais, e sugere-se que os experimentos com germinação de trigo sejam realizados exclusivamente no começo do outono.

Evaluación del método dilución neutralización aplicado a un desinfectante según la Norma Técnica Colombiana 5473 de 2007 / Assessment of the dilution-neutralization method with a disinfectant according to the Colombian Technical Norm 5473 of 2007 / Avaliação do método de diluição-neutralização aplicado num desinfectante segundo a "Norma Técnica Colombiana 5473 de 2007"

Objetivo. Evaluar el método de dilución neutralización propuesto en la Norma Técnica Colombiana 5473 de 2007, mediante la utilización de un desinfectante en gel a base de alcohol. Materiales y métodos. El ensayo se efectuó utilizando Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442, Staphylococcus aureus ATCC 6538 y Enterococcus hirae ATCC 10541, como microorganismos de ensayo. Las temperaturas del estudio fueron 20±1°C como temperatura obligatoria y 36±1°C y se emplearon cuatro tiempos de contacto entre el desinfectante y los microorganismos evaluados (0, 2, 5 y 10 minutos). El método fue realizado bajo condiciones limpias (0,3 g/L de albumina de suero bovino) y sucias (3g/L de albumina de suero bovino y 3g/L de eritrocitos de oveja). Resultados. La implementación del método arrojó resultados precisos en cada una de las seis repeticiones realizadas en el ensayo. Los resultados obtenidos demostraron una reducción logarítmica superior a cinco, evidenciando la actividad bactericida ejercida por el desinfectante frente a los microorganismos control. El establecimiento de las condiciones experimentales y de la metodología demostró no incidir negativamente en el crecimiento de cada una de las cepas. Igualmente, el neutralizante utilizado no inhibió el desarrollo de los organismos de ensayo. Conclusiones. Se verificó el método mediante el cumplimiento de los límites establecidos por la norma. Los resultados sugieren que el método evaluado mediante la implementación del protocolo establecido en la Norma Técnica Colombiana 5473 de 2007, permite evaluar la eficacia de un desinfectante bajo condiciones experimentales escogidas y controladas.

Objective. Evaluate the dilution-neutralization method proposed in the Colombian Technical Norm 5473/07, by using a gel, alcohol-based disinfectant. Materials and methods. This study was done using Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442, Staphylococcus aureus ATCC 6538, and Enterococcus hirae ATCC 10541 as the assay microorganisms. The study was carried out at 20±1°C as obligatory temperature and additionally at 36±1°C. Four contact times between microorganisms and the disinfectant were evaluated (0, 2, 5 and 10 minutes). The assay was done both under clean conditions (0.3 g/L of bovine serum albumin), and unclean conditions (3 g/L of bovine serum albumin and 3g/L of sheep erythrocytes). Results. The implementation of this method produced precise results in all of the six repetitions used during the assay. The obtained results demonstrated a logarithmic reduction higher than five, demonstrating the bactericidal activity exerted by the disinfectant on the control microorganisms. The established experimental conditions and methodology did not affect negatively the growth of any of the strains of microorganisms. Similarly, the neutralizing used did not inhibit the development of the microorganisms of the assay. Conclusions. The method was verified by means of the fulfillment of the limits set by the rule. Our results suggest that the method evaluated by means of the implementation of the protocol established in the Colombian Technical Norm 5473/07, allows evaluating the effectiveness of a disinfectant under selected and controlled experimental conditions.

Objetivo. Avaliar o método de diluição-neutralização proposto na "Norma Técnica Colombiana 5473 de 2007", pela utilização de um desinfectante gel à base de álcool. Materiais e métodos. O teste foi realizado utilizando Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442, Staphylococcus aureus ATCC 6538 e Enterococcus hirae ATCC 10541, como microrganismos de ensaio. As temperaturas do estudo foram de 20 ± 1°C como temperatura requerida e 36 ± 1°C e foram utilizados quatro tempos de contacto entre o desinfectante e os microorganismos avaliados (0, 2, 5 e 10 minutos). O método foi realizado sob condições limpas (0,3 g/L de albumina sérica bovina) e sujas (3g/L de albumina sérica bovina e 3g/L de eritrócitos de carneiro). Resultados. A implementação do método produz resultados precisos sobre cada uma das seis repetições realizadas no ensaio. Os resultados mostraram uma redução logarítmica superior a cinco, o que evidencia a actividade bactericida exercida pelo desinfectante contra os microrganismos control. O estabelecimento das condições experimentais e da metodologia provou não incidir negativamente no crescimento de cada uma das cepas. Similarmente, o neutralizador utilizado não inibiu o desenvolvimento dos organismos do experimento. Conclusões. Verificou-se o método através do cumprimento dos limites estabelecidos pela norma. Os resultados sugerem que o método avaliado através da aplicação do protocolo estabelecido pela "Norma Técnica Colombiana 5473 de 2007", permite avaliar a eficácia de um desinfectante em condições experimentais seleccionadas e controladas.

Lowland amphibians - recalculation of data on effects of diluted thyroxine / Anfíbios de terras baixas - recálculo dos dados sobre os efeitos de tiroxina diluída / Anfibios de tierras bajas - re-cálculo de datos sobre los efectos de tiroxina diluida

Our previous paper described methodological problems and a generally acceptable pooling method for metamorphosis experiments and application of that method to the results of multicentre experiments performed over the course of two decades (1990 - 2010) on highland amphibians (Rana temporaria) treated with a homeopathically prepared high dilution of thyroxine (?30x?). Differences between treatment groups thus calculated were in line with those obtained with other pooling methods: Thyroxine 30x does slow down metamorphosis in highland amphibians. This follow up paper provides a broader background on metamorphosis physiology and describes application of the pooling method to experiments with Rana temporaria from lowland biotopes both with a moderate dilution of thyroxine (?8x?) and with 30x. Analogously prepared water was used for control (water 8x or 30x). Development was, again as above, monitored by documenting the number of animals that had entered the 4-legged stage. Experiments were carried out between 1990 and 2000 by different researchers independently and in blind. As it is well known, metamorphosis can be speeded up by thyroxine 10-8 mol/l; interestingly, thyroxine 8x may produce a reverse, i.e. inhibiting effect (p < 0.01). In contrast to the inhibiting effect of thyroxine 30x on highland larvae (see above), 2-legged lowland larvae did not react to thyroxine 30x (p > 0.05). However, an inhibiting effect on lowland larvae was found when animals were treated from the spawn stage on (p < 0.01).

Nosso artículo anterior descreve problemas metodológicos e um método geralmente aceitável de agrupamento em experimentos sobre metamorfose e a aplicação deste método aos resultados de experimentos multicêntricos realizados no curso de duas décadas (1990 ? 2010) em anfíbios de terras altas (Rana temporaria) tratados com uma alta diluição de tiroxina preparada homeopaticamente (?30x?). As diferenças calculadas entre os grupos de tratamento concordam com as obtidas através de outros métodos de agrupamento: Tiroxina 30x de fato faz mais lenta a metamorfose nos anfíbios de terras altas. Este artigo posterior oferece um panorama mais amplo sobre a fisiologia da metamorfose e descreve a aplicação do método de agrupamento a experimentos com Rana temporaria de biótopos de terras baixas com diluição moderada (?8x?) e 30x de tiroxina. Foi utilizado como controle água preparada analogamente (água 8x e 30x). Novamente, o desenvolvimento foi monitorado documentando o número de animais que entraram no estágio de 4 patas. Os experimentos foram realizados entre 1990 e 2000 por diversos pesquisadores independentemente e em cego. Como é sabido, a metamorfose pode ser acelerada por tiroxina 10-8 mol/l; de maneira interessante, tiroxina 8x pode produzir o efeito inverso, ou seja, inibidor (p < 0.01). Contrariamente ao efeito inibidor de tiroxina 30x nas larvas de terras altas (vide acima), as larvas de 2 patas de terras baixas não responderam a tiroxina 30x (p > 0.05). No entanto, foi achado um efeito inibidor sobre as larvas de terras baixas quando os animais foram tratados a partir da desova (p < 0.01).

Nuestro artículo anterior describe problemas metodológicos y un método aceptable en general de agrupamiento en experimentos sobre metamorfosis y la aplicación de este método a los resultados de experimentos multicéntricos realizados durante dos décadas (1990 ? 2010) en anfibios de tierras altas (Rana temporaria) tratados con una alta dilución de tiroxina preparada homeopáticamente (?30x?). Las diferencias calculadas entre los grupos de tratamiento están de acuerdo con las obtenidas mediante otros métodos de agrupamiento: Tiroxina 30x fehacientemente enlentece la metamorfosis en anfibios de tierras altas. Este artículo posterior ofrece un panorama más amplio de la fisiología de la metamorfosis y describe la aplicación del método de agrupamiento en experimentos con Rana temporaria de biótopos de tierras bajas con dilución moderada (?8x?) y 30x de tiroxina. Se utilizó como control agua preparada análogamente (agua 8x y 30x). Nuevamente, el desarrollo fue monitoreado documentando el número de animales que entraron en el estadio de 4 patas. Os experimentos fueron realizados entre 1990 e 2000 por diversos investigadores independientemente y en ciego. Como se sabe, la metamorfosis puede ser acelerada por tiroxina 10-8 mol/l; de modo interesante, tiroxina 8x puede producir el efecto inverso, o sea, inhibidor (p < 0.01). Contrariamente al efecto inhibidor de tiroxina 30x en larvas de tierras altas (ver antes), las larvas de 2 patas de tierras bajas no respondieron a tiroxina 30x (p > 0.05). Sin embargo, se encontró efecto inhibidor en larvas de tierras bajas cuando los animales fueron tratados desde la freza (p < 0.01).

Biodisponibilidade do P e digestibilidade aparente do N em dietas de suínos suplementadas com níveis crescentes de fitase, balanceadas de acordo com o conceito de proteína ideal / Phosphorus bioavailability and nitrogen apparent digestibility in diets supplemented with phytase increasing level, balanced according to the ideal protein concept

Avaliaram-se o efeito de inclusão crescente de fitase (unidade de fitase - UF) em dietas para suínos na fase de crescimento pela técnica de diluição isotópica. Foram utilizados 20 suínos, machos castrados, em delineamento de blocos ao acaso, com cinco tratamentos - 0, 250, 500, 750 e 1000UF/kg da ração - e quatro repetições. Os animais foram alojados em gaiolas metabólicas por 17 dias, sendo 10 dias para adaptação e sete dias para coleta de fezes e urina. Amostras de sangue foram coletadas por cinco dias. No primeiro dia da fase experimental, cada animal recebeu por via endovenosa em solução radioativa com 7,4MBq de 32P. A Quantum Phytase foi eficiente em disponibilizar o P fítico para suínos em crescimento até 750UF/kg de dieta, sendo que 500UF/kg da ração foi o indicado para dietas à base de milho e farelo de soja, formuladas de acordo com o conceito de proteína ideal.

The effects of increasing levels of phytase (phytase units - PU) for pigs, using the isotopic dilution technique, were evaluated on 20 crossbred barrows in a randomized block design experiment, with five treatments, 0, 250, 500, 750 and 1000PUkg diet, and four replicates. The animals were kept in metabolic cages for a 10-day adaptation period and seven days for total collection of feces and urine. Blood samples were taken for five days. On the first day of the collection period each animal was injected intravenously with 7.4 MBq 32P. Phytase was efficient to improve the availability of the P phytate for pigs until the level of 750 PU/kg diet. The level of 500 PU/kg diet is indicated for diets based on soybean meal and corn, formulated according to the concept of ideal protein.

Análise comparaiiva das diferentes diluições paa avaliação da velocidade de heemossedimentação-vhs / Comparative aalyysis of differents dilutions for assessment o erythrocyte seedimentation rate (esr)

A velocidade de hemossedimentação (VHS) é um exame realizado em laboratórios de análises clínicas há mais de nove décadas. Utilizada na prática médica com poucas indicações precisas, mas auxiliar nas indicações das atividades inflamatórias ou infecciosas e acompanhamento de doenças graves. O exame consiste em colocar sangue humano em uma pipeta de 200 mm, fixar em suporte próprio e esperar uma hora para sedimentação eritrocitária, utilizando como referência a metodologia de Westergren. Entretanto, os laboratórios de análises clínicas, usualmente, utilizam três formas distintas de preparar o exame: diluído com soro fisiológico, diluído com citrato de sódio e sem nenhuma diluição. Este trabalho teve como objetivo comparar o resultado da VHS das três formas de diluição do exame com a mesma amostra de sangue de 104 pacientes. A análise dos resultados de todos os testes hematológicos mostrou aumento estatisticamente significativo do teste, sem diluição em comparação aos testes com diluição em citrato e em solução salina. Esses dados indicam que novos estudos deveriam ser realizados, no sentido de definir realmente qual diluição é a mais correta e ideal e ainda, estabelecer uma nova padronização dos valores de referência para cada diluição, no sentido de facilitar a comparação dos resultados entre os laboratórios e a interpretação dos mesmos pelos médicos.

The erythrocyte sedimentation rate (ESR) is an examination that has been done in clinical laboratories for over nine decades. It is used in medical practice with a little precise indications, but it is auxiliary to indications of inflammatory or infectious activities and monitoring of serious diseases. The test consists of placing human blood in a 200 mm pipette, fix it in a proper support and wait for an hour for erythrocyte sedimentation, using as reference the Westergren method. However, clinical laboratories usually use three different ways of preparing the test: diluted with saline, diluted with sodium citrate and without any dilution. This study aimed to compare the ESR of the three forms of dilution for the exam with the same blood sample from 104 patients. The results of all hematological tests showed a statistically significant increase of the undiluted test compared to the tests with dilution in citrate and saline. These data indicate that new studies should be performed to actually define which dilution is the most correct and most ideal, and also establish new standardized reference values for each dilution in order to facilitate comparison of results among laboratories and the interpretation of test results by doctors.

Modelos matemáticos no estudo do fluxo biológico de fósforo em ovinos que receberam na dieta níveis crescentes do mineral / Mathematical models to study the biological phosphorus flow in sheep fed increasing levels of mineral

Dois modelos compartimentais foram aplicados e comparados para avaliar o fluxo biológico de fósforo em ovinos que receberam dietas com níveis crescentes do mineral - 0, 2, 4 e 6g por dia. Foram utilizados 24 machos, da raça Santa Inês, com média de peso de 33,6kg. Foi utilizado fosfato bicálcico como fonte de fósforo e 32P como traçador. Avaliou-se o fluxo de fósforo entre os compartimentos: trato gastrintestinal, sangue, ossos e tecidos moles, além da ingestão, excreção e balanço do mineral. O incremento na ingestão de P aumentou a perda fecal do mineral. O fluxo de fósforo entre o trato gastrintestinal e o sangue e o fluxo contrário foram influenciados de forma quadrática pelo incremento na ingestão, diminuindo após a ingestão de 5,5g/dia, sem diferença entre os modelos avaliados. Os modelos estudados mostraram diferenças em relação ao fluxo entre sangue, ossos e tecidos moles, sem efeito dos tratamentos sobre o balanço geral do mineral, porém os níveis de ingestão praticados interferiram no fluxo biológico do fósforo. A disponibilidade biológica do fósforo ingerido diminuiu quando a ingestão superou a necessidade do animal, o que aumentou as excreções no ambiente. A quantificação do fluxo biológico de fósforo diferiu quando aplicados os modelos estudados em decorrência da sua estrutura.

Two compartimental models were applied and compared to evaluate the biological flow of P in lambs fed diets containing increasing levels of P (0, 2, 4 and 6g per day). Twenty four Santa Inês lambs with liveweight of 33.6kg were used. Dicalcium phosphate was used as P source and 32P as a tracer. P flow between compartments (gastrointestinal tract, blood, bones and soft tissues), ingestion, excretion and the mineral balance were evaluated. The increase in P intake increased fecal P loss. P flow from gastrointestinal tract to blood stream and opposite flow were affected quadratically by increased P intake, decreasing after the ingestion of 5.5g/day, without a difference among models. The models studied showed differences regarding the P flow between blood, bone and soft tissues, however, the P balance was not affected by the treatments. The increased P levels interfered with the biological P flow in sheep. The bioavailability of P diet decreases when intake exceeds the animal requirement, increasing losses to the environment. The quantification of biological P flow was different between models due to the structure of each one.

Impacto ambiental provocado pelo P em dietas suplementadas com enzima fitase e proteína ideal para suínos em crescimento: estudo do fluxo do P no metabolismo animal / Environmental impact provoked by P in diets supplemented with phytase enzyme and ideal protein for growing pigs: study of the P flow in the animal metabolism

Avaliou-se a possibilidade de redução da concentração do fósforo inorgânico em dietas formuladas para suínos de acordo com o conceito de proteína ideal, utilizando-se um modelo experimental para o estudo do fluxo do P no metabolismo animal. Utilizaram-se 20 suínos machos castrados em delineamento em blocos ao acaso, com cinco tratamentos e quatro repetições. Os tratamentos corresponderam à adição de 0, 250, 500, 750 e 1000UF/kg de dieta. No primeiro dia da fase experimental, os animais receberam, por via endovenosa, uma solução radioativa com 7,4MBq de 32P. No final do período experimental, os animais foram sacrificados e coletaram-se amostras de tecidos do músculo Longissimus dorsi, coração, fígado, rins e ossos. Pode-se reduzir em 50 por cento a suplementação de P em dietas para suínos em crescimento adicionando-se 750UF/kg de dieta, em rações à base de milho e farelo de soja, balanceadas de acordo com o conceito de proteína ideal, diminuindo-se significativamente a excreção de P nas fezes.

The study was developed to evaluate a possible of reduction of the inorganic P concentration in diets formulated for pigs in agreement with the concept of ideal protein, using Lopes et al. model. Twenty male pigs were used in a randomized blocks design, with five treatments and four replicates. The animals were housed in metabolic cages for 17 days, being 10 days for adaptation and seven days for collection of feces and urine. Samples of blood were collected for five days. On the first day of the experimental phase, each animal was intravenously injected with 7.4 MBq 32P. At the end of the experiment, the animals were slaughtered and samples of muscle (loin), heart, liver, kidney, and bones were collected. The supplementation in growing pigs can be reduced in 50 percent by adding 750UF/kg of diet in rations based in corn and soybean meal, balanced in agreement with concept of ideal protein, decreasing the P fecal excretion.

Ureia como marcador de diluição em amostras de lavado traqueobrônquico de potros com rodococose / / Urea as a dilution mark in tracheobronchial wash samples of foals with rodhococosis

No estudo das infecções e dos mecanismos inflamatórios do trato respiratório posterior, a diluição desconhecida de amostras de lavados traqueobrônquicos leva a um grave problema na interpretação das concentrações de várias substâncias. Foi investigada a amplitude da diluição em uma situação clínica verdadeira, com o objetivo de determinar a validez do uso da dosagem da ureia em lavados traqueobrônquicos para correção da diluição. As amostras do estudo consistiram em lavados traqueobrônquicos obtidos de sete potros com infecção por Rhodococcus equi. Foi realizada a contagem celular total e diferencial e comprado com o quadro clínico e a recuperação bacteriana de todas as amostras. Os fatores de diluição dos lavados variaram entre 14,3 e 130 (média 59,7). O uso da ureia como marcador de diluição melhorou a exatidão na determinação da concentração total de células nos lavados. Estes resultados sugerem que a prática de mensurar substâncias em lavado traqueobrônquico sem correção da diluição possa induzir a falsas conclusões.

In the study of infection and inflammatory mechanisms of the lower respiratory tract, the unknown dilution of tracheobronchial wash samples is a serious problem for interpretation of the measured concentrations of various substances. The range of dilution in a true clinical situation was investigated with the goal to determine the validity of using urea dosage in tracheobronchial wash to correct the dilution. The study samples consisted of tracheobronchial wash specimens from 7 foals with Rhodococcus equi infection. Total and differential cell counts were made and compared with clinical status and bacterial recuperation of all samples. The dilution factors of the nasal lavage specimens varied between 14.3 and 130 (median 59.7). The use of urea as a dilution mark improves the accuracy of quantifying total cell concentration in washes. These findings suggest that the most common current practice of meansuring substances in tracheobronchial wash, without correction for the dilution, may induce to false conclusions.

Ureia como marcador de diluição em amostras de lavado traqueobrônquico de potros com rodococose / Urea as a dilution mark in tracheobronchial wash samples of foals with rodhococosis

No estudo das infecções e dos mecanismos inflamatórios do trato respiratório posterior, a diluição desconhecida de amostras de lavados traqueobrônquicos leva a um grave problema na interpretação das concentrações de várias substâncias. Foi investigada a amplitude da diluição em uma situação clínica verdadeira, com o objetivo de determinar a validez do uso da dosagem da ureia em lavados traqueobrônquicos para correção da diluição. As amostras do estudo consistiram em lavados traqueobrônquicos obtidos de sete potros com infecção por Rhodococcus equi. Foi realizada a contagem celular total e diferencial e comprado com o quadro clínico e a recuperação bacteriana de todas as amostras. Os fatores de diluição dos lavados variaram entre 14,3 e 130 (média 59,7). O uso da ureia como marcador de diluição melhorou a exatidão na determinação da concentração total de células nos lavados. Estes resultados sugerem que a prática de mensurar substâncias em lavado traqueobrônquico sem correção da diluição possa induzir a falsas conclusões.

In the study of infection and inflammatory mechanisms of the lower respiratory tract, the unknown dilution of tracheobronchial wash samples is a serious problem for interpretation of the measured concentrations of various substances. The range of dilution in a true clinical situation was investigated with the goal to determine the validity of using urea dosage in tracheobronchial wash to correct the dilution. The study samples consisted of tracheobronchial wash specimens from 7 foals with Rhodococcus equi infection. Total and differential cell counts were made and compared with clinical status and bacterial recuperation of all samples. The dilution factors of the nasal lavage specimens varied between 14.3 and 130 (median 59.7). The use of urea as a dilution mark improves the accuracy of quantifying total cell concentration in washes. These findings suggest that the most common current practice of meansuring substances in tracheobronchial wash, without correction for the dilution, may induce to false conclusions.

Putative protective effect of Cadmium chloride high diluted solution on LLC-PK1 cell intoxicated by high concentration of this same metal: an isopathic in vitro assay

Cadmium is an important toxic environmental heavy metal. Several studies have demonstrated that a major site of cadmium toxicity in humans and in other animals is the proximal tubule of the kidney. A well established model for nefrotoxicity is the use of in vitro technique with proximal tubule epithelial cell lines, as LLC-PK1. Herein, we have the intention to study the possible protective effect of high diluted CdCl2 solutions. In a blinding way, LLC-PK1 cells were pre-treated with high diluted cadmium chloride in the potencies 10 cH, 15 cH and 20cH. After 4 days, these cells have received CdCl2 in a pre-determined toxic concentration. The cell viability was assessed by MTT assay. We have identified a protective effect of two CdCl2 high diluted solutions, 10 cH and 20 cH, when cells were intoxicated by sublethal CdCl2 concentration. The results indicate that probably the high dilutions have an expressive action on cells in sublethal intoxication.

O Cádmio é um contaminante ambiental relevante. Muitos estudos demonstram que o sítio de toxicidade em humanos e outros animais é o túbulo proximal do rim. Um modelo bem estabelecido para nefrotoxicidade é o uso de técnicas in vitro com linhagens de células epiteliais do túbulo proximal, conhecidas por LLC-PK1. Assim, nossa proposta foi a de estudar os eventuais efeitos protetores de uma alta diluição de CdCl2. Em um ensaio cego, células LLC_PK1 foram pré-tratadas com altas diluições de cloreto de cádmio nas diluições 10 cH, 15 cH e 20 cH. Após 4 dias, estas células receberam CdCl2 em uma concentração tóxica, previamente deteminada. A viabilidade cellular foi estudada por ensaios MTT. Observamos um efeito protetor para duas altas diluições de CdCl2, 10 cH e 20 cH, quando as células foram intoxicadas por concentrações subletais de CdCl2. Estes resultados indicam a possibilidade de que altas diluições tenham ação expressiva em células, em intoxicações subletais.

El Cádmio es un metal pesado com relevante acción tóxica en el medio ambiente. Varios estudios han demostrado que un sitio importante de la toxicidad del cadmio en los humanos y en otros animales es el túbulo proximal del riñón. Un modelo bien establecido de nefrotoxicidad es el uso de la técnica in vitro con células epiteliales del túbulo proximal, como las LLC-PK1. Estudiamos el posible efecto protector de soluciones altamente diluidas de CdCl2. Com uma metodologia em ciego, las células LLC-PK1 fueron pre-tratados con cloruro de cadmio altamente diluídos en las potencias 10 cH, 15 cH y 20 cH. Después de 4 días, estas células han recibido CdCl2 en una concentración tóxica predeterminado. La viabilidad celular se evaluó por el ensayo MTT. Hemos identificado un efecto protector de dos soluciones de altamente diluída de CdCl2, 10 cH y 20 cH, cuando las células se intoxicaron por concentración CdCl2 subletales. Los resultados indican que probablemente las altas diluciones tienen una acción expresiva en las células, en la intoxicación subletal.

A pilot study of the influence of Natrum muriaticum 6cH and 30cH in a standardized culture of Phaseolus vulgaris L

The use of highly diluted and agitated solutions is widespread. Its use extends to all living beings including plants, acting effectively in the latter's primary and secondary metabolism. Aims: this is a pilot study designed to assess the action of Natrum muriaticum in dilutions 6 CH and 30 CH in comparison to the action of 5.0% NaCl solution administered separately to a population of Phaseolus vulgaris L. (common bean). Materials and methods: it was determined the relative growth rate (RGR) of the bean population treated for 6 weeks and subdivided into 4 groups (5 vases each): P1 (control) treated with 30% alcohol solution only; P2, treated with aqueous 5.0% NaCl solution; P3, treated with Nat-m 6 CH; P4, treated with Nat-m 30 CH. Results: it was seen an increase in the salinity of the soil that caused the inhibition of the development of the bean population P2. In addition, the use of Nat-m promoted a significant increase in vegetable growth, chiefly in dilution 6 CH (P3), causing a significant increase in the RGR of the bean population. Conclusion: high dilutions of Nat-m showed to be efficient to stimulate the growth of common bean.

Qualitative feed restriction for heavy swines: effect on digestibility and weight of organs of digestive tract, and environmental impact of feces / Restrição alimentar qualitativa para suínos pesados: efeito sobre digestibilidade e peso dos órgãos do trato digestório e impacto ambiental das fezes

A total of 50 barrows were used to evaluate qualitative feed restriction on digestibility of dietary components, weight of organs of digestive tract, and composition and production of feces. Five experimental diets, with increasing levels of qualitative feed restriction of 0, 5, 10, 15, and 20 percent were used. There was linear reduction (P<0.001) of all digestibility coefficients on the levels of qualitative feed restriction, except for acid detergent fiber, which presented a quadratic response (P<0.05). Contents of total solids (P<0.01), volatile solids (P<0.05), and total minerals (P<0.001) in the feces augmented with increasing levels of qualitative feed restriction, whereas the levels of K (P<0.05), Cu (P<0.01), N, P, Na, Ca, Mg, Fe, and Zn (P<0.001) presented a quadratic response. Daily feces excretion; and contents of total solids, volatile solids, total minerals, and levels of N, P, K, Mn, and Cu (P<0.001) and Ca, Na, Mg, and Fe (P<0.05) presented a clear increase in function of the qualitative feed restriction level. Qualitative feed restriction can be an alternative for the disposal of agribusiness waste, providing good crop-fertilizing by the use of swine feces.

Foram utilizados 50 suínos machos castrados para avaliar o efeito da restrição alimentar qualitativa sobre a digestibilidade dos componentes dietéticos, os órgãos do trato digestório, a composição e a produção fecal. Foram utilizadas cinco dietas experimentais, com níveis de restrição qualitativa de 0, 5, 10, 15 e 20 por cento. Houve redução linear (P<0,001) para todos os coeficientes de digestibilidade, com exceção da fibra em detergente ácido, que apresentou resposta quadrática (P<0,05). Os teores de sólidos totais (P<0,01) e voláteis (P<0,05), e minerais totais (P<0,001) nas fezes aumentaram com os níveis de restrição alimentar, enquanto os níveis de K (P<0,05), Cu (P<0,01) e de N, P, Na, Ca, Mg, Fe e Zn (P<0,001), apresentaram resposta quadrática. A excreção diária de fezes, sólidos totais e voláteis, minerais totais, N, P, K, Mn e Cu (P<0,001), Ca, Na, Mg e Fe (P<0,05) apresentaram aumento em função do nível da restrição alimentar qualitativa. A restrição qualitativa pode ser alternativa para destinação de resíduos da agroindústria, conferindo boas propriedades às fezes suínas, no que diz respeito à utilização para adubação de culturas.

Comparison of in vitro activity of five antifungal agents against dermatophytes, using the agar dilution and broth microdilution methods / Comparação da atividade in vitro de cinco agentes antifúngicos para dermatófitos, usando os métodos de diluição em ágar e microdiluição em caldo

The purpose of this study was to compare the agar dilution and broth microdilution methods for determining the minimum inhibitory concentration (MIC) of fluconazole, itraconazole, ketoconazole, griseofulvin and terbinafine for 60 dermatophyte samples belonging to the species Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes and Microsporum canis. The percentage agreement between the two methods, for all the isolates with < 2 dilutions that were tested was 91.6 percent for ketoconazole and griseofulvin, 88.3 percent for itraconazole, 81.6 percent for terbinafine and 73.3 percent for fluconazole. One hundred percent agreement was obtained for Trichophyton mentagrophytes isolates evaluated with ketoconazole and griseofulvin. Thus, until a reference method for testing the in vitro susceptibility of dermatophytes is standardized, the similarity of the results between the two methods means that the agar dilution method may be useful for susceptibility testing on these filamentous fungi.

O propósito do presente trabalho foi comparar os métodos de diluição em ágar e diluição em caldo para a determinação de concentração inibitória mínima de fluconazol, itraconazol, cetoconazol, griseofulvina e terbinafina para 60 amostras de dermatófitos pertencentes às espécies, Trichophyton rubrum, Trichophyton. mentagrophytes e Microsporum canis. A porcentagem de acordo entre os dois métodos para todos os isolados testados considerando-se valores < 2 diluições, foram de 91,6 por cento para cetoconazol e para griseofulvina, de 88,3 por cento para itraconazol, de 81,6 por cento para terbinafina e de 73,3 por cento para fluconazol. Uma concordância de 100 por cento foi obtido para isolados de Trichophyton mentagrophytes avaliados com cetoconazol e griseofulvina. Desta forma, até que um método de referência seja padronizado para testar a suscetibilidade in vitro para os dermatófitos, os resultados semelhantes encontrados para os dois métodos fazem com que o método de diluição em ágar possa ser útil no teste de suscetibilidade para estes fungos filamentosos.

Modelos matemáticos para o estudo do fluxo biológico do fósforo em suínos alimentados com dietas suplementadas com níveis crescentes de fitase / Mathematical models for the study of the biological flow of phosphorus in pigs fed with diets containing increasing levels of phytase

A pesquisa foi realizada para avaliar o fluxo biológico do fósforo entre os compartimentos, fisiológicos ou anatômicos, de suínos mantidos em dietas que continham níveis crescentes de fitase, usando o P-32 como traçador. O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso, sendo os tratamentos constituídos por níveis de enzima fitase, 253, 759, 1265 e 1748 UF/kg, nas dietas. As variáveis avaliadas foram: ingestão, excreção, atividades específicas e fluxo de P nos compartimentos (trato digestivo, corrente sanguínea, tecidos moles e ossos). A enzima fitase não interferiu nas excreções fecais e urinárias, nas atividades específicas, na incorporação e na reabsorção de P nos ossos e nos tecidos moles e no fluxo bidirecional do trato digestivo e na corrente sanguínea, mas afetou linearmente a absorção e a retenção nos ossos. As respostas mais evidentes dos efeitos da adição da fitase são observadas nos níveis mais baixos.

The biological flow of P was evaluated among the physiologic or the anatomical compartments of pigs fed diets with increasing phytase levels, using P-32 as tracer. The experimental design was completely randomized. Treatments consisted of phytase levels in diets (253, 759, 1265, and 1748UF/kg). The evaluated variables were: feed intake, excretion, specific activities and flow of P in the compartments (gut, blood, bone, and soft tissus). Phytase level did not interfere with fecal and urinary excretion, specific activities, incorporation and resorption of bone, and soft tissue P and in the bidirectional flow of gut and blood, but linearly affected P absorption and bone P retention. The best response was observed with the lowest phytase levels.