Ensayo del cometa como bioindicador de inestabilidad genómica en pacientes diabéticos hemodializados / Comet assay as a bioindicator of genomic instability in hemodialysis diabetic patients

Introducción: Procesos como la mutagénesis, la carcinogénesis y la teratogénesis son producto de la interacción de agentes de origen endógeno como exógeno que interactúan con la molécula de ADN en forma crónica produciendo rupturas en la doble hélice, y en cromosomas completos resultando en la inestabilidad genómica. El estrés oxidativo al que se encuentran sometidas las células al formarse las especies reactivas de oxígeno (ROS) y también las especies reactivas de nitrógeno (RNS), que pueden provenir de radicales producidos a consecuencia de la diabetes o en estados iniciales de la enfermedad renal crónica o como respuesta a procesos inflamatorios en estados avanzados de estas patologías, actúan como agentes genotóxicos endógenos.Objetivos: Esta investigación tuvo como objetivo determinar el daño basal en la molécula de ADN de pacientes diabéticos hemodializados, a través del ensayo del Cometa, como un bioindicador de inestabilidad genómica., durante seis meses de tratamiento. Materiales y métodos: Se planteó un estudio longitudinal prospectivo de cohorte para comparar los diferentes niveles de daño antes y durante los primeros seis del tratamiento de hemodiálisis. Se evaluó con el test del cometa o electroforesis de células individuales, el daño basal en muestras de sangre venosa de pacientes diagnosticados con Diabetes de tipo II como control negativo y en pacientes diabéticos con enfermedad renal crónica antes de iniciar el tratamiento de diálisis y luego durante el tratamiento. Se utilizó el test de t- Student para muestras independientes y emparejadas. Resultados: Se observó un aumento significativo de daño basal y oxidativo en el material genético de pacientes diabéticos con enfermedad renal crónica, comparados con los controles negativos (p< 0.005) y se observó, además, que el daño celular aumenta con el tratamiento de hemodiálisis (p<0.005). Conclusión: Los resultados obtenidos en esta investigación permiten concluir que el estrés oxidativo tiene un efecto genotóxico y que el nivel de daño genético es un buen bioindicador del avance de la enfermedad renal crónica y que la hemodiálisis induce a un aumento de daño a nivel del material genético, aumentando el riesgo de carcinogénesis.

Introduction: Processes such as mutagenesis, carcinogenesis and teratogenesis are the product of the interaction of agents of endogenous and exogenous origin that interact with the DNA molecule in a chronic way producing ruptures in the double helix, and in complete chromosomes resulting in genomic instability. The oxidative stress to which the cells are subjected when reactive oxygen species (ROS) and reactive nitrogen species (RNS) are formed, which may come from radicals produced as a result of diabetes or in initial stages of chronic kidney disease or in response to inflammatory processes in advanced stages of these pathologies, act as endogenous genotoxic agents. Objectives: This research aimed to determine the basal damage in the DNA molecule of hemodialyzed diabetic patients, through the Comet assay, as a bioindicator of genomic instability, during six months of treatment. Materials and methods: For this research, a prospective longitudinal cohort study was proposed to compare the different levels of genetic damage before and during the first six of hemodialysis treatment. Baseline damage was evaluated with the comet test or single cell electrophoresis, in venous blood samples from patients diagnosed with Type II Diabetes as a negative control and in diabetic patients with chronic kidney disease before starting dialysis treatment and then during treatment. Results: A significant increase in basal and oxidative damage was observed in the genetic material of diabetic patients with chronic kidney disease, compared to negative controls (p< 0.005) and it was also observed that cell damage increases with hemodialysis treatment (p<0.005). The t-Student test was used for independent and paired samples. Conclusion: The results obtained in this research allow us to conclude that oxidative stress has a genotoxic effect and that the level of genetic damage is a good bioindicator of the progression of chronic kidney disease and that hemodialysis induces an increase in damage at the level of the genetic material, increasing the risk of carcinogenesis.

Acción protectora de la melatonina sobre células mononucleares de sangre periférica humana sometidas a radiación gamma Co60 / Ação protetora da melatonina nas células mononucleares do sangue periférico humano submetido à radiação gama co60 / Protective action of melatonin on human peripheral blood mononuclear cells exposed to gamma radiation Co60

Objetivo: Evaluar el efecto protector de la melatonina sobre células mononucleares de sangre periférica (CMSP) humana expuestas in vitro a radiación ionizante. Materiales y métodos: Las CMSP de donantes sanos fueron incubadas con melatonina en concentraciones de 0,1x10-5, 1x10-6 y 1x10-7 M durante 10 minutos antes de ser expuestas a rayos gamma (300cGy, fuente de Co60); posteriormente el daño del ADN fue evaluado mediante el Ensayo del Cometa. Resultados: Las CMSP pre-tratadas con melatonina presentaron cometas con colas de menor longitud que las no tratadas así como un porcentaje menor de células con daño severo del DNA. Conclusión: Concentraciones de melatonina de 1x10-5, 1x10-6 y 1x10-7 M protegen in vitro a las CMSP del daño en el ADN ((rupturas de cadena sencilla y sitios lábiles al álcali) inducido por rayos gamma...

Protective action of melatonin on human peripheral blood mononuclear cells exposed to gamma radiation Co60. Objective: to evaluate the protective effect of melatonin on peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) exposed in vitro to ionizing radiation. Materials and methods: PBMCs drawn from healthy volunteers were incubated with 0, 1x10-5, 1x10-6 y 1x10-7 M melatonin for 10 minutes before being exposed to gamma radiation (300 cGy; Co60 source). Afterwards, DNA damage was evaluated with the comet assay. Results: PBMCs pretreated with melatonin showed comet tails shorter than those without the hormone treatment, as well as a lower percentage of cells with severe DNA damage. Conclusion: melatonin doses of 1x10-5, 1x10-6 and 1x10-7 M provide in vitro protection to PBMCs fromDNA damage (single strand breaks and alkali-labile sites) induced by gamma radiation (300 cGy; Co60 source)....

Ação protetora da melatonina nas células mononucleares do sangue periférico humano submetido à radiação gama co60. Objetivo: Avaliar o efeito protetor da melatonina sobre células mononucleares do sangue periférico (CMSP) humano, expostas in vitro àradiação ionizante. Materiais e Métodos: As CMSP de pessoas sadias foram incubadas com melatonina em concentrações de 0,1x10-5, 1x10-6 y 1x10-7 M durante 10 minutos antes de serem expostas a raios gama (300cGy, fonte de Co60); posteriormente, o dano do DNA foi avaliado mediante o Teste do Cometa. Resultados: As CMSP previamente tratadas com melatonina apresentaram cometas com caudas demenor comprimento que as não tratadas, assim como uma porcentagem menor de células com dano severo do DNA. Conclusões:Concentrações de melato ina de 1x10-5, 1x10-6 e 1x10-7 M protegem in vitro as CMPS do dano no DNA (rupturas de cadeia simples e sítios débeis ao álcali) induzido pelos raios gama....

Evaluación de riesgo genotóxico: biomonitorización de trabajadores agrícolas de Caranavi, Guanay, Palca y Mecapaca, expuestos a plaguicidas / Assestement of genotoxic risk biomonitoring of farm workers exposed to pesticides in Caranavi, Guanay, Palca and Mecapaca

Objetivo- Detectar los efectos citotóxicos y genotóxicos en trabajadores agrícolas, mediante estudios de biomonitoreo genético. Diseño. Casos y controles. Participantes- Trabajadores agrícolas de Caranavi, Guanay, Mecapaca y Palca del Departamento de La Paz. Lugar.- Localidades de Caranavi, Guanay, Mecapaca y Palca. Unidad genética Toxicológica, Instituto de Genética. Material y Métodos. Se aplicó cuestionario a 259 trabajadores agrícolas. Se evaluó el efecto genotóxico en linfocitos de sangre heparinizada, a travéz de la frecuencia de intercambios entre Cromáties Hermanas (ICH), el índice de proliferación celular (PRI), el tanto por ciento de células con alta frecuencia de intercambios (por ciento HFC), frecuencia de micronúcleos en células binucleadas (MNBN), el índice de división nuclear (IDN), la presencia de aberraciones cromósonicas estructurales (AC), y parámetros de la prueba cometa, como DNA de la cola, DNA de la cabeza, longitud de la cola y longitud del cometa, el momento de la cola, y momento Olive.

Objective To detect the cytotoxic and genotoxic effects in farm workers, by means of genetic biomonitoring studies. Design Cases and controls Participants Farm workers from Caranavi, Guanay, Palca and Mecapaca Place Towns of Caranavi, Guanay, P alca and Mecapaca, Genetic Toxicology unit. Genetic Institute. Material and methodsQuestionnaires to 257 agricultural workers were applied genotoxic effect was evaluated in lymphocytes from heparinized blood, through analysis of sister chromatid Exchange (SCE), cells with a high frecuency of SCE (HFC), proliferation rate index (PRI) the micronucleus (MN) assay, nuclear division index (NDI), chromosomal aberrations (CA) and comet assay parameters like DNA tail, DNA head, tail length comet length, tail moment and Olive moment. Results The frequency of SCE, MN/BN and CA was significantly increased (p<0.05) in cases vs. control group. Likewise, the parameters of Tail DNA, DNA head...