RESUMO
Abstract The aim of this study was to verify the presence and identify the species of haemosporidian parasites in eared doves (Zenaida auriculata) in Brazil. Two hundred and eleven male and female eared doves were trap-captured in four different regions of Londrina city, in southern Brazil. Whole blood was collected in EDTA tubes through heart puncture after euthanasia in a CO2 chamber. A nested PCR targeting the mitochondrial cytochrome b gene (cyt b) of Haemoproteus spp./Plasmodium spp. was performed, followed by an enzymatic digestion to identify the genus. Phylogenetic trees were constructed to determine the closely related species. Out of 211 eared doves, 209 (99.05%) were positive for Haemoproteus spp. and/or Plasmodium spp. RFLP analysis showed that 72.72% (152/209) of eared doves were positive only for Haemoproteus spp., 6.22% (13/209) were positive only for Plasmodium spp., and 21.05% (44/209) of eared doves had mixed infections. Genetic analysis found four samples that were homologous with Haemoproteus multipigmentatus and one that was homologous with Plasmodium sp. This is the first molecular study of hemoparasites from eared doves in Brazil, and it is also the first description of H. multipigmentatus and Plasmodium spp. infection in eared doves in Brazil.
Resumo O objetivo deste estudo foi verificar a presença e a identificação espécies de parasitas hemosporídeos em pombos (Zenaida auriculata) no Brasil. Duzentos e onze pombos machos e fêmeas foram capturados em quatro regiões diferentes de Londrina, sul do Brasil. Amostra de sangue foi coletada em tubos contendo EDTA por meio de punção cardíaca, após eutanásia em câmara de CO2. Uma nested PCR com alvo no gene mitocondrial citocromo b (cyt b) de Haemoproteus spp./Plasmodium spp. foi realizada, seguida de digestão enzimática para identificar o gênero. A árvore filogenética foi construída para determinar a relação com outras espécies. Das 211 pombas, 209 (99,05%) foram positivas para Haemoproteus spp./Plasmodium spp. A análise RFLP demonstrou que 72,72% (152/209) das pombas foram positivas somente para Haemoproteus spp.; 6,22% (13/209) foram positivas somente para Plasmodium e 21,05% (44/209) das pombas tiveram infecções mistas. A análise genética mostrou quatro amostras homólogas com H. multipigmentatus e uma com Plasmodium spp. Este é o primeiro estudo molecular de hemoparasitas em pombos no Brasil. E é também a primeira descrição da infecção por H. multipigmentatus e Plasmodium spp. em pombos Z. auriculata no Brasil.
Assuntos
Humanos , Animais , Masculino , Columbidae/parasitologia , Plasmodium/classificação , Infecções Protozoárias em Animais/diagnóstico , Doenças das Aves/diagnóstico , Doenças das Aves/parasitologia , Apicomplexa/classificação , Apicomplexa/genética , Filogenia , Plasmodium/genética , Infecções Protozoárias em Animais/parasitologia , Brasil , Reação em Cadeia da Polimerase/veterináriaRESUMO
Abstract Haemoproteus spp. are protozoan parasites found in birds around the world. These parasites are identified through the morphology of gametocytes, phylogenetic analysis based on the mitochondrial cytb gene, and the parasite's geographic distribution. The absence of erythrocytic merogony, high intraspecific genetic variation and low parasitemia in wild birds makes it essential to use integrative approaches that assist in the identification of these parasites. Thus, microscopic and molecular analyses, combined with spatial distribution, were carried out to verify the presence of Haemoproteus spp. in wild birds in Brazil. Light microscopy revealed one Tangara sayaca bird was parasitized by Haemoproteus coatneyi and, two specimens of Zonotrichia capensis presented Haemoproteus erythrogravidus. The morphology of the gametocytes of these two parasitic species showed high similarity. The molecular analysis revealed the presence of one lineage of H. coatneyi and two lineages of H. erythrogravidus, one of which is considered a new lineage. These lineages were grouped phylogenetically in separate clades, with low genetic divergence, and the H. erythrogravidus lineage emerged as an internal group of the lineages of H. coatneyi. The geographic distribution demonstrated that the two species occur in the American continent. This is the first report of H. erythrogravidus in Brazil.
Resumo Haemoproteus spp. são protozoários parasitos encontrados em aves de todo o mundo. A identificação desses parasitos é realizada por meio da morfologia dos gametócitos, da análise filogenética, baseada no gene mitoncodrial cytb e na distribuição geográfica do parasito. A ausência de merogonia eritrocítica, a alta variação genética intraespecífica e a baixa parasitemia em aves silvestres, tornam essencial a utilização de abordagens integrativas que auxiliem na identificação desses parasitos. Assim, análises microscópicas e moleculares, aliadas à distribuição espacial, foram realizadas para verificar a presença de Haemoproteus spp. em aves silvestres no Brasil. A microscopia óptica demonstrou que uma ave Tangara sayaca estava parasitada por Haemoproteus coatneyi, e dois espécimes de Zonotrichia capensis apresentavam Haemoproteus erythrogravidus, cujas morfologias dos gametócitos apresentaram alta similaridade. A análise molecular recuperou uma linhagem de H. coatneyi e duas linhagens de H. erythrogravidus, sendo uma dessas considerada nova linhagem. Essas linhagens se agruparam filogeneticamente em clados separados, apresentando baixa divergência genética, sendo que as linhagens de H. erythrogravidus emergiram como grupo interno às linhagens de H. coatneyi. A distribuição geográfica demonstrou que as duas espécies estão ocorrendo no continente americano. Este é o primeiro relato de H. erythrogravidus no Brasil.