High performance liquid chromatography determination of cucurbitacins in the roots of Wilbrandia ebracteata Cogn. / Determinação de cucurbitacinas em raízes de Wilbrandia ebracteata Cogn. por cromatografia líquida de alta eficiência

Roots of Wilbrandia ebracteata Cogn., Cucurbitaceae, used in folk medicine for treatment of rheumatic disease, are rich in cucurbitacins. Dihydrocucurbitacin B is the most abundant cucurbitacin while cucurbitacin B is a minor component. A reverse-phase HPLC system was developed for simultaneous quantitative assay of these cucurbitacins in the roots. The optimised experimental conditions were acetonitrile/H(2)0 40:60, flow-rate 1.2 mL/min., detection at 230 nm and isocratic elution. A variety of sample preparation modes were tested and the extraction with dichloromethane under reflux gave better results. The validation process included linearity, accuracy, repeatability and intermediate precision. The calibration curve of dihydrocucurbitacin B was linear from 40.00 to 400 μg/mL, the recovery was 95.5±3.01 percent, the intermediate precision was found to be 1.64 percent and the repeatability varied between 1.30 to 2.05 percent. The calibration curve of cucurbitacin B was linear from 4.00 to 240 μg/mL, intermediate precision was found to be 2.29 percent and repeatability varied between 1.03 to 2.95 percent. Analysis of the same specimen of W. ebracteata every year from 2002 to 2005 revealed a great rise on the cucurbitacin B concentration after the root was attacked by an herbivore.

Raízes de Wilbrandia ebracteata Cogn. (Cucurbitaceae), tradicionalmente empregada no tratamento de doenças reumáticas, contém cucurbitacinas, sendo di-hidrocucurbitacina B a mais abundante, enquanto cucurbitacina B está presente em menor quantidade. Foi desenvolvido um método para determinação quantitativa destas cucurbitacinas. Os parâmetros selecionados foram: eluente isocrático acetonitrila/H(2)0 40:60, fluxo 1,2 mL/min. e detecção em 230 nm. Diversas formas de preparo da amostra foram testadas, sendo que extração com diclorometano sob refluxo forneceu o melhor resultado. O processo de validação incluiu: linearidade, exatidão, repetibilidade e precisão intermediária. A curva de calibração para a di-hidrocucurbitacina B foi linear de 40.00 to 400 μg/mL, a recuperação foi 95,5±3.01 por cento, a precisão intermediária, 1,64 por cento e a repetibilidade variou entre 1,30 a 2,05 por cento. A curva de calibração da cucurbitacina B foi linear de 4,00 to 240 μg/mL, a recuperação encontrada foi igual a 96,6±2.45 por cento, a precisão intermediária, 2,29 por cento e a repetibilidade variou entre 1,03 a 2,95 por cento. Análise do mesmo espécime de W. ebracteata uma vez por ano de 2002 a 2005 revelou grande aumento no teor de cucurbitacina B após a raiz ter sido atacada por herbívoro.

Morphology and anatomy of a leaf mine in Vismia guianensis (Aubl.) Choisy (Clusiaceae) in a fragment of Brazilian Atlantic forest

Mines or hyponomes are channels caused by larva miners consuming internal plant tissues. These miners live on the leaf and feed from these tissues. Leaf mines are usually visible on the exterior of the leaf as serpentine paths, blotches, or other characteristic shapes of discolored tissues. Morphological and structural modifications undergone by mined leaves of Vismia guianensis (Aubl.) Choisy are presented here with the purpose of elucidating their structure and to contribute to studies about insect-plant interactions. Healthy and mined leaves were harvested from thirty plants and taken to the laboratory. For each branch, the total number of young and mature leaves, the number of leaves with mines and the number of mine per leaf were counted. Transverse sections of healthy and mined leaves were obtained to observe the morpho-anatomic aspects. From the 1,438 mature leaves and 379 young leaves analyzed, 214 (14.9%) and 70 (18.5%) were mined, where most of the leaves (67%) presented one mine per leaf. Transverse sections of the mine revealed that the larva consumed only mesophyll parenchyma tissue and the epidermis remains intact. There is not a pattern of leaf mining, but the larvae did not consume the druses observed on mesophyll and the vascular tissues of the mid-vein and lateral vein.

Minas ou hiponomas são canais causados pelo consumo de tecidos internos da planta por larvas minadoras que habitam na folha e se alimentam desses tecidos. Minas em folhas são freqüentemente visíveis na folha em forma de serpentina, manchas ou outras formas características de tecido descolorido. Modificações morfológicas e anatômicas causadas por minadores em folhas de Vismia guianensis (Aubl.) Choisy são apresentadas neste trabalho, com o objetivo de elucidar a sua estrutura e contribuir com os estudos sobre interação inseto-planta. Folhas sadias e minadas de trinta indivíduos foram coletadas e levadas ao laboratório. Para cada ramo coletado foram mensurados o número total de folhas jovens e maduras, o número de folhas minadas e o número de minas por folha. Secções transversais de folhas sadias e minadas foram obtidas para observar aspectos morfo-anatômicos. Das 1.438 folhas maduras e 379 folhas jovens analisadas, 214 (14,9%) e 70 (18,5%) estavam minadas e muitas dessas folhas (67%) apresentavam uma única mina. Secções transversais das folhas minadas revelaram que a larva consome apenas tecido parenquimático do mesofilo e a epiderme permanece intacta. Não foi observado um padrão das minas foliares, mas a larva não consome as drusas observadas no mesofilo e os tecidos vasculares das nervuras central e laterais.