Population structure and phylogenetic relationships in Brassica rapa L. subspecies by using isozyme markers / Estrutura populacional e relações filogenéticas em subespécies de Brassica rapa L. utilizando marcadores isoenzimáticos

Abstract The present study aimed to assess population structure and phylogenetic relationships of nine subspecies of Brassica rapa L. represented with thirty-five accessions cover a wide range of species distribution area using isozyme analysis in order to select more diverse accessions as supplementary resources that can be utilized for improvement of B. napus. Enzyme analysis resulted in detecting 14 putative polymorphic loci with 27 alleles. Mean allele frequency 0.04 (rare alleles) was observed in Cat4A and Cat4B in sub species Oleifera accession CR 2204/79 and in subspecies trilocularis accessions CR 2215/88 and CR 2244/88. The highest genetic diversity measures were observed in subspecies dichotoma, accession CR 1585/96 (the highest average of observed (H0) and expected heterozygosity (He), and number of alleles per locus (Ae)). These observations make this accession valuable genetic resource to be included in breeding programs for the improvement of oilseed B. napus. The average fixation index (F) is significantly higher than zero for the analysis accessions indicating a significant deficiency of heteozygosity. The divergence among subspecies indicated very great genetic differentiation (FST = 0.8972) which means that about 90% of genetic diversity is distributed among subspecies, while 10% of the diversity is distributed within subspecies. This coincides with low value of gene flow (Nm = 0.0287). B. rapa ssp. oleifera (turnip rape) and B. rapa ssp. trilocularis (sarson) were grouped under one cluster which coincides with the morphological classification.

Resumo O presente estudo teve como objetivo avaliar a estrutura populacional e as relações filogenéticas de nove subespécies de Brassica rapa L. representadas com 35 acessos, cobrindo uma ampla gama de áreas de distribuição de espécies usando análise isoenzimática, a fim de selecionar acessos mais diversos como recursos suplementares que podem ser utilizados para melhoria de B. napus. A análise enzimática resultou na detecção de 14 loci polimórficos putativos com 27 alelos. A frequência média de 0,04 alelo (alelos raros) foi observada em Cat4A e Cat4B, nas subespécies Oleifera CR 2204/79 e nas subespécies trilocularis CR 2215/88 e CR 2244/88. As maiores medidas de diversidade genética foram observadas na subespécie dicotômica CR 1585/96 (a média mais alta observada (H0) e heterozigosidade esperada (He) e número de alelos por locus (Ae). Essas observações tornam esse acesso um valioso recurso genético a ser incluído em programas de melhoramento de oleaginosas B. napus. O índice médio de fixação (F) é significativamente maior que 0 para os acessos à análise, indicando uma deficiência significativa de heterozigose. A divergência entre as subespécies indicou uma grande diferenciação genética (FST = 0,8972), o que significa que cerca de 90% da diversidade genética é distribuída entre as subespécies, enquanto 10% da diversidade é distribuída nas subespécies. Isso coincide com o baixo valor do fluxo gênico (Nm = 0,0287). B. rapa ssp. oleifera (nabo) e B. rapa ssp. trilocularis (sarson) foram agrupados conforme a classificação morfológica.

Caso clínico: hipofosfatasia de la niñez. Seguimiento clínico / Clinical case: childhood hypophosphatasia. Clinical follow-up

La hipofosfatasia (HP) es una enfermedad congénita, causada por mutaciones con pérdida de función en el gen ALPL que codifica la isoenzima no específica de tejido de la fosfatasa alcalina (TNSALP). Su expresión clínica es muy variable, desde casos de muerte intraútero por alteración grave de la mineralización ósea, hasta casos solo con caída prematura de la dentición. Se presenta el caso clínico de un varón al que se le diagnosticó odontohipofosfatasia a los 30 meses por pérdida temprana de piezas dentarias y niveles anormalmente bajos de fosfatasa alcalina, sin signos de raquitismo ni deformidades óseas. Durante su seguimiento, hasta los 13 años, presentó síntomas compatibles con HP infantil leve, como cansancio al caminar, incoordinación en la marcha y dolor en miembros inferiores que aumentaban con la actividad física. Ante la aparición de edema bimaleolar y poca respuesta al tratamiento con calcitonina y antiinflamatorios, se descartaron patologías infecciosas o reumáticas o ambas y se diagnosticó, por biopsia de tibia y peroné, periostitis sin detección de cristales de pirofosfato. Los controles radiológicos durante su evolución mostraron ensanchamiento metafisario en muñeca, falta de remodelado de metacarpianos, hojaldrado perióstico en tibia y peroné e hipomineralización en metáfisis tibiales, con "lenguas radiolúcidas" características de HP. Como conclusión, la hipofosfatasia debe considerarse como una entidad clínica para descartar en niños que presentan pérdida temprana de dientes. La presencia de este cuadro clínico es en general suficiente para realizar el diagnóstico de HP de la niñez. (AU)

Hypophosphatasia (HP) is a congenital disease, caused by mutations with loss of function in the gene ALPL that encodes the non-specific tissue isoenzyme of alkaline phosphatase (TNSALP). Its clinical expression displays considerable variability, from cases of intrauterine death due to severe alteration of bone mineralization, to cases with only early loss of teeth. We report the case of a male, diagnosed as odontohypophosphatasia at 30 months of age due to early loss of teeth and abnormally low levels of alkaline phosphatase, without signs of rickets or bone deformities. During follow-up, up to 13 years of age, he presented symptoms consistent with mild infantile HP such as tiredness when walking, lack of gait coordination, and pain in lower limbs, especially after physical activity. Due to the appearance of bimalleolar edema and poor response to treatment with calcitonin and anti-inflammatory drugs, infectious and / or rheumatic pathologies were ruled out. Periostitis without pyrophosphate crystal detection was diagnosed by tibial and fibular biopsy. Radiological controls during follow up showed metaphyseal wrist enlargement, lack of remodeling of metacarpals, periosteal flaking in the tibia and fibula and hypomineralization in the tibial metaphysis, with "radiolucent tongues"; characteristic of HP. In conclusion, hypophosphatasia should be considered as a clinical entity in children who present early loss of teeth. The presentation of this clinical case is generally sufficient to make the diagnosis of childhood HP. (AU)

Population structure and phylogenetic relationships in Brassica rapa L. subspecies by using isozyme markers

Abstract The present study aimed to assess population structure and phylogenetic relationships of nine subspecies of Brassica rapa L. represented with thirty-five accessions cover a wide range of species distribution area using isozyme analysis in order to select more diverse accessions as supplementary resources that can be utilized for improvement of B. napus. Enzyme analysis resulted in detecting 14 putative polymorphic loci with 27 alleles. Mean allele frequency 0.04 (rare alleles) was observed in Cat4A and Cat4B in sub species Oleifera accession CR 2204/79 and in subspecies trilocularis accessions CR 2215/88 and CR 2244/88. The highest genetic diversity measures were observed in subspecies dichotoma, accession CR 1585/96 (the highest average of observed (H0) and expected heterozygosity (He), and number of alleles per locus (Ae)). These observations make this accession valuable genetic resource to be included in breeding programs for the improvement of oilseed B. napus. The average fixation index (F) is significantly higher than zero for the analysis accessions indicating a significant deficiency of heteozygosity. The divergence among subspecies indicated very great genetic differentiation (FST = 0.8972) which means that about 90% of genetic diversity is distributed among subspecies, while 10% of the diversity is distributed within subspecies. This coincides with low value of gene flow (Nm = 0.0287). B. rapa ssp. oleifera (turnip rape) and B. rapa ssp. trilocularis (sarson) were grouped under one cluster which coincides with the morphological classification.

Resumo O presente estudo teve como objetivo avaliar a estrutura populacional e as relações filogenéticas de nove subespécies de Brassica rapa L. representadas com 35 acessos, cobrindo uma ampla gama de áreas de distribuição de espécies usando análise isoenzimática, a fim de selecionar acessos mais diversos como recursos suplementares que podem ser utilizados para melhoria de B. napus. A análise enzimática resultou na detecção de 14 loci polimórficos putativos com 27 alelos. A frequência média de 0,04 alelo (alelos raros) foi observada em Cat4A e Cat4B, nas subespécies Oleifera CR 2204/79 e nas subespécies trilocularis CR 2215/88 e CR 2244/88. As maiores medidas de diversidade genética foram observadas na subespécie dicotômica CR 1585/96 (a média mais alta observada (H0) e heterozigosidade esperada (He) e número de alelos por locus (Ae). Essas observações tornam esse acesso um valioso recurso genético a ser incluído em programas de melhoramento de oleaginosas B. napus. O índice médio de fixação (F) é significativamente maior que 0 para os acessos à análise, indicando uma deficiência significativa de heterozigose. A divergência entre as subespécies indicou uma grande diferenciação genética (FST = 0,8972), o que significa que cerca de 90% da diversidade genética é distribuída entre as subespécies, enquanto 10% da diversidade é distribuída nas subespécies. Isso coincide com o baixo valor do fluxo gênico (Nm = 0,0287). B. rapa ssp. oleifera (nabo) e B. rapa ssp. trilocularis (sarson) foram agrupados conforme a classificação morfológica.

Falta de evidencia en la determinación de la isoenzima BB de la fosforilasa de glucógeno (GPBB) como prueba diagnóstica de preeclampsia / Lack of evidence for offering the qualitative determination of glycogen phosphorylase isoenzyme BB (GPBB) in capillary blood of pregnant women as diagnostic test of pre-eclampsia

Resumen OBJETIVO: estructurar una pregunta clínica para conocer la utilidad de la prueba cualitativa de GPBB en sangre capilar de pacientes embarazadas, con la finalidad de establecer el diagnóstico de preeclampsia. MATERIALES Y MÉTODOS: estudio ambispectivo efectuado con base en las respuestas a la pregunta clínica estructurada: ¿cuál es la validez diagnóstica de la prueba cualitativa de la isoenzima BB de la fosforilasa de glucógeno (GPBB) en sangre capilar para preeclampsia? se buscaron las fuentes primarias en PubMed, mediante las palabras clave (MeSH): "Glycogen phosphorylase isoenzyme BB AND Pregnancy" y "Glycogen phosphorylase isoenzyme BB AND Pre-eclampsia". Se seleccionaron los artículos más relevantes, se les asignó nivel de evidencia, se investigó si la muestra y metodología fueron iguales, comparables o diferentes de la prueba cualitativa en sangre capilar, y se analizaron sus resultados con la finalidad de establecer el diagnóstico clínico de preeclampsia. RESULTADOS: no se encontraron estudios de la determinación cualitativa de GPBB en sangre capilar. En tres ensayos de casos y controles (nivel de evidencia 4) se compararon las concentraciones de GPBB en suero mediante ELISA y se encontraron cifras elevadas al momento de establecer el diagnóstico clínico; sin embargo, se consideró como un rasgo fenotípico de preeclampsia clínica, pero no como una prueba diagnóstica. CONCLUSIONES: no existe suficiente evidencia médica que respalde la utilidad de la determinación cualitativa de GPBB en sangre capilar de pacientes embarazadas para establecer el diagnóstico de preeclampsia; por lo tanto, no se sustenta su aplicación en ningún escenario clínico.

Abstract OBJECTIVE: To establish if the clinical use of the test for the diagnosis of pre-eclampsia is scientifically supported by evidence-based medicine. MATERIALS AND METHODS: Ambispective study based on the responses to the PICO clinical question was constructed, then primary sources were searched in PubMed by the strategies Glycogen phosphorylase isoenzyme BB AND Pregnancy, and Glycogen phosphorylase isoenzyme BB AND pre-eclampsia, the relevant ones were selected, with allocation of level of evidence, determining if samples and methodology were similar, comparable or different to the capillary blood test, and results were analized under diagnosis clinical intention. RESULTS: No studies were found on qualitative GPBB detection in capillary blood. Three case-control studies (evidence level 4) compared GPBB maternal serum levels determined by ELISA, and described an elevation of GPBB at clinical diagnosis, rather as a phenotypical feature of clinical Pre-eclampsia, but not a diagnostic test. CONCLUSIONS: There is no evidence at all to offer the qualitative determination of GPBB in capillary blood of pregnant women; its clinical use is not supported whatsoever.

Dos nuevas poblaciones de Lutzomyia pseudolongipalpis Arrivillaga y Feliciangeli (Diptera: Phlebotominae) vector de leishmaniasis visceral en Venezuela / Two new populations of Lutzomyia pseudolongipalpis Arrivillaga & Feliciangeli (Diptera: Phlebotominae) vector of visceral leishmaniasis in Venezuela

Dos nuevas poblaciones de Lutzomyia pseudolongipalpis Arrivillaga & Feliciangeli, especie del complejo Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva), son registradas para Venezuela con base en dos enzimas diagnostico, Adenilato quinasa y Hexoquinasa.

Two new populations of Lutzomyia pseudolongipalpis Arrivillaga & Feliciangeli, species belonging to the Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva) complex, are reported in Venezuela on diagnostic isoenzymes.

Assessment of serum enzymatic markers of cardiomyocytes injury in female dogs submitted to ketamine S(+), atropin and xylazine association / Mensuração da atividade sérica de marcadores de lesão cardíaca em cadelas anestesiadas com cetamina S(+), atropina e xilazina

PURPOSE: To assessment of the aspartate aminotransferase (AST), creatine kinase (CK) and creatine kinase isoenzyme fraction MB (CK-MB) serum activity in female dogs anesthetized with ketamine S (+), atropine and xylazine in several associations. METHODS: Twenty three healthy female dogs randomly distributed in four groups named as GI (n=6), GII (n=6), GIII (n=6) and GIV (n=5) were treated respectively with atropine and ketamine S(+) (0.04mg/kg; 10 mg/kg); ketamine S(+) (10 mg/kg); atropine, xylazine and ketamine S(+) (0.04mg/kg; 1.1 mg/kg; 10 mg/kg) and xylazine and ketamine S(+) (1.1 mg/kg; 10 mg/kg). AST, CK and CK-MB serum activity measurement before pre-medication (M0) and one, two, three, six, 12, 24, 36 hours after. RESULTS: There was no significant change in AST, CK e CK-MB serum activity among groups. However, CK serum activity in relation to moments within the groups was increased in all groups over the time in spite of treatment, except GI. In relation to CK-MB activity, in the moments within the group, it was observed an increase compared to baseline in all groups. CONCLUSION: Creatine kinase and creatine kinase fraction MB isoenzyme showed changes in their mean values remained higher than baseline for a longer time in GIII and GIV.

OBJETIVO: Determinar a atividade sérica de AST, CK e CK-MB em cadelas anestesiadas com cetamina S (+), atropina e xilazina em diferentes associações. MÉTODOS: Vinte e três cadelas saudáveis foram distribuídas ao acaso em quarto grupos denominados GI (n=6), GII (n=6), GIII (n=6) e GIV (n=5) tratados respectivamente com atropina e cetamina S (+) (0,04mg/kg; 10 mg/kg); cetamina S (+) (10 mg/kg); atropina, xilazina e cetamina S (+) (0,04mg/kg; 1,1 mg/kg; 10 mg/kg) exilazina e cetamina S (+) (1,1 mg/kg; 10 mg/kg). A atividade sérica de AST, CK e CK-MB foi determinada antes da pré-medicação (M0) e uma, duas, três seis, 12, 24 e 36 horas após M0. RESULTADOS: Não foram encontradas mudanças significativas na atividade sérica de AST, CK e CK-MB entre grupos. Entretanto, entre momentos houve aumento da atividade sérica de CK para todos os grupos, exceto em GI.Com relação a atividade sérica de CK-MB, observou-se ao longo dos momentos aumento significativo com relação aos valores basais em ambos os grupos. CONCLUSÃO: Alterações significativas foram observadas com relação à atividade sérica de CK e CK-MB em todos os tratamentos, mantendo-se elevada por um período maior nos grupos GIII e GIV.

Avaliação da fosfatase alcalina óssea e hepática em gatos com tirotoxicose induzida / Evaluation of bone and liver alkaline phosphatase in cats with induced

A tirotoxicose é caracterizada pelas excessivas concentrações séricas dos hormônios tiroidianos, podendo desencadear graves alterações no metabolismo ósseo, sendo a elevação da fosfatase alcalina total uma alteração laboratorial freqüentemente observada no hipertiroidismo felino. O aumento global dos níveis séricos de fosfatase alcalina pode ser decorrente de diferentes isoenzimas e, no caso do hipertiroidismo em humanos, as isoenzimas de origem óssea e hepática apresentam-se comumente elevadas. A partir da avaliação da bioquímica sérica de oito gatos com tirotoxicose induzida e elevação da fosfatase alcalina associada, o presente trabalho demonstra um aumento significativamente maior dos níveis séricos da fosfatase alcalina de origem óssea quando comparado com a isoenzima de origem hepática. Conclui-se que as alterações no metabolismo ósseo foram as principais responsáveis pelo aumento da fosfatase alcalina nos gatos com tirotoxicose induzida

Thyrotoxicosis, characterized by excessive serum levels of thyroidhormones, can cause serious effects in bone metabolism, elevating the total alkaline phosphatase, which is a frequent laboratorial alteration observed in feline hyperthyroidism. A rise in total serum levels of alkaline phosphatase can be caused by different isoenzymes, and in human hyperthyroidism, bone and hepatic isoenzymes are commonly increased. After serum biochemical evaluation of eight cats with induced thyrotoxicosis and associated elevation of alkaline phosphatase, the present paper shows a significant elevation of bone isoenzyme serum levels when compared with hepatic isoenzyme. It was possible to conclude that bone metabolism alterations were the main responsible for the increase of serum alkaline phosphatase in cats with induced thyrotoxicosis.