Fungi in the respiratory tract of horses with recurrent airway obstruction / Presença de fungos no trato respiratório de equinos e sua associação com obstrução recorrente das vias aéreas

This study aims to compare the concentration of viable fungi, especially those of the genus Aspergillus in the respiratory tract of stabled horses with and without Recurrent Airway Obstruction (RAO). Thirty two housed horses from four equestrian centers in Brazil were included in the study. These animals were submitted to clinical examination and to a respiratory sample collection. They were categorized into two groups: healthy and RAO-affected horses. Samples obtained by tracheobronchial washes were evaluated for fungal microscopy, quantitative culture and Aspergillus spp. quantification. Eighteen healthy and 14 RAO-affected horses were studied. Fungi were more frequently recovered in the RAO group, in comparison to controls, for both fungal microscopy (P<0.0001), fungal culture (P<0.0001) and Aspergillus spp. quantitative culture (p=0.001). In conclusion, horses with RAO have significantly higher fungal load in the respiratory tract in comparison to healthy horses. The implications of these findings in terms of the pathogenesis of RAO deserve additional investigation...

Este estudo objetivou comparar a concentração de fungos viáveis, especialmente do gênero Aspergillus, no trato respiratório de equinos estabulados com e sem obstrução recorrente das vias aéreas (ORVA). Trinta e dois equinos provenientes de quatro centros de treinamento equestre do Brasil foram incluídos no estudo. Os animais foram submetidos a exame clínico e coleta de amostra respiratória, sendo categorizados em dois grupos: sadios e ORVA. Os lavados traqueobrônquicos obtidos foram avaliados por exame micológico direto e cultivo quantitativo. Ao todo, 18 equinos saudáveis e 14 com ORVA foram estudados. Fungos foram mais frequentemente detectados em amostras do grupo ORVA em comparação com o grupo controle, tanto no exame micológico direto (P<0,0001) e cultivo quantitativo (P<0,0001) quanto na concentração de unidades formadoras de colônias (UFC) de Aspergillus spp. isolada em cultivo (p=0,001). Equinos com ORVA têm maior concentração de propágulos fúngicos no trato respiratório em comparação com animais sadios. As implicações desses achados na patogenia da ORVA merecem maior atenção e investigação...

Lavado traqueobrônquico por via nasotraqueal como metodologia de colheita de células do trato respiratório de ovinos sadios e portadores de afecções pulmonares / Tracheobronchial lavage by nasotracheal via to collect cells of respiratory tract of health and broncopneumonic ovines

Os estudos das secreções traqueobrônquicas são amplamente utilizados nas pesquisas de doenças pulmonares nas diversas espécies animais, inclusive no homem. Os objetivos desta pesquisa foram a viabilização da técnica de colheita de lavado traqueobrônquico na espécie ovina e o estudo da relação clínico-citológica do lavado de ovinos portadores de broncopneumonia e sadios. Foram utilizados 33 ovinos, 18 sadios e 15 portadores de enfermidade respiratória com sinais clínicos de envolvimento das vias aéreas, divididos nos respectivos grupos, GS e GD. Após o exame físico foi realizado o lavado traqueobrônquico por via nasotraqueal. A colheita do lavado foi feita com a inoculação e aspiração de solução fisiológica estéril. As amostras foram processadas citologicamente através de citocentrifugação e coradas pelos métodos Wright-Giemsa e Shorr. Tanto a contagem total de células epiteliais quanto o número de hemácias por mililitro foi maior no grupo de animais com broncopneumonia. Nos animais sadios notou-se predomínio de macrófagos, seguido por células epiteliais cilíndricas, neutrófilos e linfócitos. No grupo de animais doentes havia menor número de macrófagos, e predomínio da população de neutrófilos. Por ser de fácil realização, pouco dispendiosa e pela obtenção representativa de material, a técnica estudada mostrou-se eficaz na obtenção de fluidos traqueobrônquicos e, portanto um bom método de colheita de células para uso nas pesquisas de vias aéreas.

Exams of tracheobronchial secretions are widely used in research of lung diseases in several animal species, including men. The objective of this paper was to investigate feasibility of the technique for harvesting trachea-bronchial lavage in sheep and to verify its clinic-cytological relationship in healthy sheep and others suffering from pneumonia. In this study 33 sheep were used, 18 healthy and 15 sheep with clinical signs of respiratory disease, divided into groups GS and GD. Clinic examination was performed by obtaining tracheobronchial lavage through the nasal route. The crop was washed with the addition and aspiration of sterile saline. The samples were processed by cytospin and staining with Wright-Giemsa and Shorr. The total cell count and the number of red blood cells per milliliter was higher in the group of sheep with bronchopneumonia. In healthy animals predominance of macrophages was noted, followed by the number of epithelial cells, neutrophils and lymphocytes. In the group of sick animals fewer macrophages and predominance of the neutrophil population were noted. Because of its easy performance to obtain representative material, the technique studied was considered effective to obtain tracheobronchial fluid and therefore is a good method to harvest cells for research of the airways.

Influência da suplementação de vitamina E na profilaxia e tratamento da broncopneumonia moderada e grave em bezerros / Influence of vitamin E on prophylaxis and treatment of moderate and severe bronchopneumonia in calves

Estudou-se a broncopneumonia de ocorrência natural em bezerros e a influência da administração de acetato de DL-α-tocoferol na profilaxia e tratamento desta enfermidade. Foram avaliados 60 bezerros machos, com idade máxima de 10 dias, divididos em dois grupos experimentais: GSV (grupo sem vitamina) e GCV (grupo com vitamina). A suplementação com dose única de 4.500 UI de acetato de DL-α-tocoferol por via intramuscular (IM) foi precedida por exame físico, perfil hematológico, determinação de proteínas séricas, globulinas, gamaglutamiltransferase e citologia do lavado traqueobrônquico (D0) para verificar a sanidade e homogeinização dos grupos. Os bezerros foram mantidos em bezerreiro e distribuídos aleatoriamente, 2 a 2 em baias individuais de 2,40m², onde permaneceram até o 21º dia (D0 ao D21). Foram avaliados por exame físico diário e, na presença de sinais clínicos indicativos de broncopneumonia (DX), retirados do bezerreiro, avaliados por hemograma e citologia do lavado traqueobrônquico, e tratados com enrofloxacina (5mg/kg, IM). Durante o tratamento, o exame físico foi realizado diariamente, e o hemograma e a citologia do lavado traqueobrônquico repetidos uma semana após seu término (DY). Nos bezerros sadios foram repetidos hemograma e citologia do lavado traqueobrônquico, no último dia (D21) do experimento. Não houve diferença significativa quanto às variáveis gamaglutamiltrasfrase (p=0,09), proteínas séricas (p=0,27) e globulinas (p=0,10) e a idade dos bezerros (p=0,15) entre os grupos. Os bezerros do grupo GSV e GCV levaram em média 11 e 12 dias para adoecerem, respectivamente. Contudo, não houve diferença estatística significativa entre os grupos (p=0,68). Em 34 bezerros (56,66 por cento) foi diagnosticado broncopneumonia, sendo que 17 destes bezerros (50 por cento) pertenciam ao grupo GCV e 17 (50 por cento) ao grupo GSV. Com relação aos sinais clínicos, não houve diferença significativa entre os grupos em nenhum dos momentos estudados. Dos 34 bezerros que adoeceram 73,52 por cento morreram pela doença, sendo 64,7 por cento do GCV e 82,35 por cento do GSV. A citologia do lavado traqueobrônquico não apresentou diferença significativa entre os grupos em nenhum dos momentos estudados (D0, DX, DY e D21). A suplementação com vitamina E não teve influência na profilaxia e no tratamento de broncopneumonia de bezerros.

The natural occurrence of bronchopneumonia in calves and the effect of DL-α-tocopherol in the prophylaxis and treatment of this disease is studied. We evaluated 60 male calves, aged up to 10 days, divided into two groups: GSV (group without vitamin) and GCV (group with vitamin). Supplementation with a single dose of 4,500 IU of DL-α-tocopherol administered intramuscularly (IM) was preceded by clinical examination, complete blood count (CBC), determination of serum proteins, globulins, gamaglutamyltransferase and tracheobronchial lavage cytology (D0) to check sanity and homogenization of the groups. The animals were kept two by two in individual 2.40 m² stalls, where they remained until day 21 (D0 to D21). The animals were examined daily and, in the presence of clinical signs of bronchopneumonia (DX), taken from stalls, evaluated by CBC and tracheobronchial lavage cytology, and treated with enrofloxacin (5 mg/kg, IM). During the treatment, clinical examination was performed daily by the CBC and tracheobronchial lavage cytology repeated one week after the end of treatment (DY). In healthy animals, CBC and tracheobronchial lavage cytology were repeated on the last day of the experiment (D21). No significant difference for the blood variables gamaglutamiltrasfrase (p=0.09), serum protein (p=0.27) and globulin (p=0.10) and the age of animals (p=0.15) were observed in both of groups. Animals in group GSV and GCV took an average of 11 and 12 days for get sick, respectively. However, no statistical difference between was observed in both groups (p=0.68). In 34 (56.66 percent) animals were diagnosed bronchopneumonia, and 17 of these calves (50 percent) belonged to group GCV and 17 (50 percent) to group GSV. With respect to clinical signs, there was no significant difference between groups in any of the times studied. Out of 34 animals which were affected, 73.52 percent died of the disease, 64.7 percent were from GCV group and 82.35 percent were from GSV group. Cytology of tracheobronchial lavage showed no difference between groups in any of the times studied (D0, DX, DY and D21). We conclude that supplementation with vitamin E had no influence in the prophylaxis and Treatment of bronchopneumonia in calves.

Ureia como marcador de diluição em amostras de lavado traqueobrônquico de potros com rodococose / / Urea as a dilution mark in tracheobronchial wash samples of foals with rodhococosis

No estudo das infecções e dos mecanismos inflamatórios do trato respiratório posterior, a diluição desconhecida de amostras de lavados traqueobrônquicos leva a um grave problema na interpretação das concentrações de várias substâncias. Foi investigada a amplitude da diluição em uma situação clínica verdadeira, com o objetivo de determinar a validez do uso da dosagem da ureia em lavados traqueobrônquicos para correção da diluição. As amostras do estudo consistiram em lavados traqueobrônquicos obtidos de sete potros com infecção por Rhodococcus equi. Foi realizada a contagem celular total e diferencial e comprado com o quadro clínico e a recuperação bacteriana de todas as amostras. Os fatores de diluição dos lavados variaram entre 14,3 e 130 (média 59,7). O uso da ureia como marcador de diluição melhorou a exatidão na determinação da concentração total de células nos lavados. Estes resultados sugerem que a prática de mensurar substâncias em lavado traqueobrônquico sem correção da diluição possa induzir a falsas conclusões.

In the study of infection and inflammatory mechanisms of the lower respiratory tract, the unknown dilution of tracheobronchial wash samples is a serious problem for interpretation of the measured concentrations of various substances. The range of dilution in a true clinical situation was investigated with the goal to determine the validity of using urea dosage in tracheobronchial wash to correct the dilution. The study samples consisted of tracheobronchial wash specimens from 7 foals with Rhodococcus equi infection. Total and differential cell counts were made and compared with clinical status and bacterial recuperation of all samples. The dilution factors of the nasal lavage specimens varied between 14.3 and 130 (median 59.7). The use of urea as a dilution mark improves the accuracy of quantifying total cell concentration in washes. These findings suggest that the most common current practice of meansuring substances in tracheobronchial wash, without correction for the dilution, may induce to false conclusions.

Ureia como marcador de diluição em amostras de lavado traqueobrônquico de potros com rodococose / Urea as a dilution mark in tracheobronchial wash samples of foals with rodhococosis

No estudo das infecções e dos mecanismos inflamatórios do trato respiratório posterior, a diluição desconhecida de amostras de lavados traqueobrônquicos leva a um grave problema na interpretação das concentrações de várias substâncias. Foi investigada a amplitude da diluição em uma situação clínica verdadeira, com o objetivo de determinar a validez do uso da dosagem da ureia em lavados traqueobrônquicos para correção da diluição. As amostras do estudo consistiram em lavados traqueobrônquicos obtidos de sete potros com infecção por Rhodococcus equi. Foi realizada a contagem celular total e diferencial e comprado com o quadro clínico e a recuperação bacteriana de todas as amostras. Os fatores de diluição dos lavados variaram entre 14,3 e 130 (média 59,7). O uso da ureia como marcador de diluição melhorou a exatidão na determinação da concentração total de células nos lavados. Estes resultados sugerem que a prática de mensurar substâncias em lavado traqueobrônquico sem correção da diluição possa induzir a falsas conclusões.

In the study of infection and inflammatory mechanisms of the lower respiratory tract, the unknown dilution of tracheobronchial wash samples is a serious problem for interpretation of the measured concentrations of various substances. The range of dilution in a true clinical situation was investigated with the goal to determine the validity of using urea dosage in tracheobronchial wash to correct the dilution. The study samples consisted of tracheobronchial wash specimens from 7 foals with Rhodococcus equi infection. Total and differential cell counts were made and compared with clinical status and bacterial recuperation of all samples. The dilution factors of the nasal lavage specimens varied between 14.3 and 130 (median 59.7). The use of urea as a dilution mark improves the accuracy of quantifying total cell concentration in washes. These findings suggest that the most common current practice of meansuring substances in tracheobronchial wash, without correction for the dilution, may induce to false conclusions.

Avaliação citológica de lavados traqueobrônquico e broncoalveolar em cavalos clinicamente sadios pelo método de coloração de Rosenfeld

Comparisons of tracheobronchial (TBW) and bronchoalveolar wash (BAL) cytologies, using respectively 25 and 5 normal horses were made. Differential cell counts were made on both TBW and BAL fluids on Rosenfeld-stained cytocentrifuged preparations. Macrophages were the predominant cell types seen in both fluid samples and these findings suggest the possibility of an adequate sampling of the distal air passages. Differences were found in lymphocytes and macrophages between TBW and BAL cytologies. The main cell types in BAL fluids were macrophages (54.78±15.92%) and lymphocytes (33.70±14.41%). On the other hand, lymphocytes and macrophages were found in 2.91±3.44% and 81.51±11.06% of cell types in TBW fluids, respectively. Also, there were absences of epithelial and goblet cells in BAL cytology, and these explain the adequacy of the lower respiratory tract sampling, performed without causing trauma of proximal air passages. Other cell types were found in few numbers and no differences were found between TBW and BAL fluids. Differences were not detected concerning morphological characteristics between TBW and BAL preparations.

Foram realizados estudos comparativos dos exames citológicos obtidos a partir de amostras dos lavados traqueobrônquico (LTB) e broncoalveolar (LBA) de cavalos clinicamente sadios. Foram colhidas 25 amostras pela técnica do LTB (25 animais) e 25 amostras pela técnica do LBA (5 animais). A suspensão celular dos lavados foi centrifugada, confeccionando-se lâminas coradas pelo método de Rosenfeld. A contagem diferencial mostrou predominância de macrófagos em ambas as técnicas de colheita, confirmando a possibilidade de sua utilização para obter amostras celulares das vias aéreas distais. Observou-se diferença na proporção de macrófagos e linfócitos entre as técnicas dos lavados traqueobrônquico e broncoalveolar. As porcentagens de macrófagos e linfócitos observadas foram de 81,51±11,06% e 2,91±3,44% no LTB e de 54,78±15,92% e 33,70±14,41% no LBA, respectivamente. Também notou-se ausência de células epiteliais cilíndricas e produtoras de muco em LBA, indicando que essas amostras são provenientes da população alveolar e que esta técnica não traumatizou as vias aéreas proximais. Os demais tipos celulares foram identificados em proporções semelhantes e em pequenas quantidades em ambas as técnicas. As características morfológicas dos tipos celulares foram semelhantes nas duas técnicas.

Comparação do rendimento em cultura entre as técnicas do aspirado gástrico e do lavabo tráqueo-brônquico no diagnóstico da tuberculose / A culture yield comparison by the gastric aspirate and the tracheal-bronchial washing techniques in the tuberculosis diagnosis

Uma comparação do rendimento em cultura de amostras obtidas por duas técnicas diferentes, o aspirado gástrico e o lavado tráqueo-brônquico, foi realizada para verificar qual o melhor material para diagnóstico da tuberculose pulmonar. Essas amostras foram colhidas de pacientes ambulatoriais, em jejum, que apresentavam imagens pulmonares sugestivas da doença. O exame microscópico do escarro de parte desses pacientes foi negativo. A outra parte não apresentava expectoração. A análise estatística dos resultados não revelou diferenças significativas. Assim, devido às vantagens de realização do lavado tráqueo-brônquico sobre o aspirado gástrico, tanto para o laboratorista quanto para o paciente, recomendamos o primeiro método nas condições de rotina.