Expression of LIN28A/B and Let-7 miRNAs in canine mammary carcinomas / Expressão de LIN28A/B e Let-7 miRNAs em carcinomas mamários caninos

LIN28 is a RNA-binding protein including two highly conserved homologous, LIN28A and LIN28B. Proto-oncogenes such as LIN28A and LIN28B are generally targeted by the let-7 miRNAs in different types of human cancers. Here, we determined the expression of LIN28A in canine mammary tumor samples and the LIN28/let-7 pathway in canine mammary cell lines. In those cell lines, we identified a functional LIN28/let-7 pathway which exhibited high expression of let-7 members and low expression of its targets, including LIN28A and LIN28B. However, the mammary carcinoma tissue samples showed a frequent expression of LIN28A being expressed mainly in the epithelial cells. No association was observed between LIN28A expression and histopathological classification and grade, TNM and survival time. Our results suggested a possible role of the LIN28A protein in the development of canine mammary carcinomas due to the high frequency observed in the tumor samples (28 of 32). The in vitro experiments suggested that the LIN28/let-7 pathway is active in the tumor cells evaluated. However, more studies are necessary to elucidate the exact role of LIN28/let-7 pathway in canine mammary carcinomas.

LIN28 é uma proteína de ligação ao RNA, com duas formas homólogas altamente conservadas, LIN28A e LIN28B. Os proto-oncogenes LIN28A e LIN28B são regulados pela família de miRNAs let-7 em diferentes tipos de cânceres em humanos. No presente trabalho, o objetivo foi determinar a expressão de LIN28A em amostras de tumor mamário de cadelas e a via LIN28/let-7 em linhagens celulares mamárias caninas. Nestas linhagens, através das técnicas de qPCR e RNAseq, foi identificado que a via LIN28/let-7 apresenta-se funcional, com alta expressão dos membros da família let-7 e baixa expressão de seus alvos, entre eles LIN28A e LIN28B. No entanto, as amostras de tecidos de carcinomas mamários caninos demonstraram expressão frequente de LIN28A, sendo observada principalmente em células epiteliais. Não foram observadas associações entre expressão de LIN28A com classificação e gradação histopatológicas, TNM e tempo de sobrevida. Nossos resultados sugerem uma possível relação da proteína LIN28A no desenvolvimento de carcinomas mamários caninos devido à alta frequência observada nas amostras tumorais (28 de 32). Os experimentos in vitro sugerem que a via LIN28/let-7 é ativa nas linhagens celulares caninas avaliadas. Entretanto, estudos funcionais ainda são necessários para elucidar a função exata da via LIN28/let-7 nos carcinomas mamários caninos.

Osteopontin expression and its relationship with prognostic biomarkers in canine mammary carcinomas / Expressão de osteopontina e sua relação com biomarcadores prognóstico nos carcinomas mamários caninos

Osteopontin is a glycophosphoprotein implicated in different physiologic and pathologic processes and is known to be involved in progression and metastasis of various cancers in humans, but this relation is still little explored in the veterinary. The aim was to evaluate the expression of osteopontin in canine mammary carcinomas and its relation with well-established canine mammary tumor biomarkers. For that, expression of OPN, EGFR, HER2, and c-Kit were evaluated along with Ki67 rate in 43 mammary carcinomas. Osteopontin was demonstrated to be expressed by neoplastic epithelial cells in all carcinomas as well as in stromal cells from the tumor microenvironment. Relation between high osteopontin expression and EGFR positivity (P<0.001) and HER2 overexpression (P=0.012) was demonstrated. In conclusion, high OPN expression seems to be related to poor prognosis and MAPK pathway activation, given the association with EGFR and HER2, members of the MAPK signaling pathway.(AU)

A osteopontina é uma glicofosfoproteina implicada em diferentes processos fisiológicos e patológicos, sendo conhecida por estar envolvida na progressão e metástase de vários cânceres nos humanos, no entanto, essa relação é ainda pouco explorada na veterinária. O objetivo deste trabalho foi avaliar a expressão da osteopontina nos carcinomas mamários caninos e sua relação com biomarcadores bem estabelecidos para esta neoplasia. Para isto, foi avaliada a expressão de OPN, EGRH, HER2 e c-Kit juntamente com a taxa de Ki67 em 43 carcinomas mamários. A osteopontina foi expressa pelas células epiteliais neoplásicas em todos os carcinomas, assim como, nas células estromais do microambiente tumoral. Foi demonstrada uma relação entre uma alta expressão de osteopontina e positividade para EGFR (P<0.001) e superexpressão de HER2 (P=0.012). Em conclusão, alta expressão de OPN parece estar relacionada com mau prognóstico e ativação da via MAPK, devido a sua associação com EGRF e HER2, os quais são membros desta via de sinalização.(AU)

Serum evaluation of leptin, IL-6, IGF-1 and estrogen in obese bitches with early stages of mammary carcinoma / Avaliação sérica de leptina, IL-6, IGF-1 e estrógeno em cadelas com excesso de peso e portadoras de carcinomas mamários em estágio inicial

The aim of this study was to relate the serum concentration IL-6, IGF-1, leptin and estrogen in non-castrated bitches with or without overweight and early stage mammary carcinomas. Forty-three bitches were divided into four groups, two groups without mammary carcinomas with and without overweight, and two groups with mammary carcinomas with and without overweight. Overweight bitches, with or without mammary carcinomas, were statistically different from bitches by ideal weight, in relation to ECC, IMCC and body fat percentages (P< 0.0001). There was a positive correlation between ECC and IMCC (P< 0.0001), ECC and % GC (P< 0.0001), and IMCC and % GC (P< 0.0001). A positive correlation was found between serum leptin and IL-6 (P= 0.0451) and leptin and IGF-1 (P= 0.05). A positive correlation (P= 0.0053) between ECC and leptin was found in the analysis of body evaluation methods and serum concentrations, and a negative correlation between ECC and IL-6 (P= 0.0435). Among the fat percentage and the leptin concentration, there was a positive correlation (P= 0.0016), as found between the IMCC and leptin (P= 0, 0209). In this study, no association was observed between excessive weight and the presence of early stage mammary carcinomas.(AU)

Este estudo teve por objetivo relacionar a concentração sérica de IL-6, IGF-1, leptina e estrógeno, em cadelas não castradas com ou sem excesso de peso, e carcinomas mamários em estágio inicial. Quarenta e três cadelas foram divididas em quatro grupos, sendo dois de cadelas sem carcinomas mamários, com e sem excesso de peso, e dois de cadelas com carcinomas mamários, com e sem excesso de peso. Cadelas com excesso de peso, com ou sem carcinomas mamários, foram estatisticamente diferentes de cadelas em peso ideal, em relação às avaliações corporais de ECC, IMCC e percentual de gordura corpórea (P<0,0001). Foi observada uma correlação positiva entre ECC e IMCC (P<0,0001), ECC e %GC (P<0,0001), e IMCC e %GC (P<0,0001). As análises de estrógeno, leptina, IL-6 e IGF-1 não apresentaram diferenças estatísticas entre os grupos. Demonstrou-se correlação positiva entre as concentrações séricas de leptina e IL-6 (P=0,0451) e leptina e IGF-1 (P=0,05). Encontrou-se correlação positiva entre ECC e leptina (P=0,0053) e negativa entre ECC e IL-6 (P=0,0435). Entre o percentual de gordura e leptina encontrou-se correlação positiva (P=0,0016), assim como entre IMCC e leptina (P=0,0209). Neste estudo, não se observou associação entre excesso de peso e a presença de carcinomas mamários em estadio inicial.(AU)