RESUMO
Context and objective: Non-myeloablative hematopoietic stem cell transplantation (NMA-HSCT) is performed in onco-hematological patients who cannot tolerate ablative conditioning because of older age or comorbidities. This approach does not completely eliminate host cells and initially results in mixed chimerism. Long-term persistence of mixed chimerism results in graft rejection and relapse. Involvement of graft-versus-host disease is concomitant with complete chimerism and graft-versus-tumor effect. The aim of this study was to evaluate the prevalence of chimerism in onco-hematological patients who underwent NMA-HSCT. Desingn and setting: Observational clinical study on chimerism status after human leukocyte antigen-identical NMA-HSCT at the Discipline of Hematology and Hemotherapy of Universidade Federal de São Paulo. Methods: We sequentially analyzed the amplification of APO-B, D1S80, DxS52, FVW, 33.6, YNZ-2 and H-ras primers using variable number of tandem repeats (VNTR) on 17 pairs and fluorescent in situ hybridization (FISH) with the XY probe and SRY primer on 13 sex-unmatched pairs. RESULTS: The informativeness of the primers using VNTR was 60 percent for APO-B, 75 percent D1S80, 36 percent DxS52, 14 percent FVW, 40 percent YNZ-22 and 16 percent H-ras. The SRY primer was informative in female receptors with male donors. The XY-FISH method was informative in 100 percent of the sex-unmatched pairs. Conclusion: These methods were sensitive and informative. In VNTR, the association of APO-B with D1S80 showed 88 percent informativeness. The quantitative FISH method was more sensitive, but had the disadvantage of only being used for sex-unmatched pairs.
Contexto e objetivo: O transplante de células hematopoiéticas não-mieloablativo é realizado em pacientes com doenças onco-hematológicas que não suportam condicionamentos ablativos devido à elevada idade ou ao acometimento por comorbidades. Esta abordagem não elimina completamente as células do hospedeiro, resultando, inicialmente, em quimerismo misto. A persistência do quimerismo misto na evolução de longo prazo resulta na rejeição ao enxerto e recaída. O acometimento pela doença do enxerto contra hospedeiro é concomitante ao quimerismo completo e ao efeito enxerto versus tumor. O objetivo deste estudo foi avaliar a prevalência do quimerismo em doenças onco-hematológicas tratadas com o transplante não-mieloablativo de células hematopoiéticas. Tipo de estudo e local: Estudo clínico observacional do estado de quimerismo após transplante antígenos leucocitários humanos-idêntico não-mieloabaltivo realizado na Disciplina de Hematologia e Hemoterapia da Universidade Federal de São Paulo. Métodos: Analisamos sequencialmente a amplificação dos primers APO-B, D1S80, DxS52, FVW, 33,6, YNZ-22, H-ras pelo VNTR (variable number of tandem repeats) em 17 pares e FISH (fluorescent in situ hybridization) pela sonda XY e do primer SRY em 13 pares de não relacionados a sexo. Resultado: A informatividade dos primers pelo VNTR foi de 60 por cento para APO-B; 75 por cento D1S80; 36 por cento DxS52; 14 por cento FVW; 40 por cento YNZ-22 e 16 por cento H-ras. O primer SRY foi informativo em receptores femininos com doadores masculinos. O método XY-FISH foi informativo em 100 por cento dos pares de não relacionado a sexo. Conclusão: Estes métodos foram sensíveis e informativos. No VNTR, a associação do APO-B com D1S80 mostrou 88 por cento de informatividade. O FISH, método quantitativo, foi mais sensível, porém com desvantagem de ser usado somente nos pares não relacionados a sexo.
Assuntos
Adulto , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Doença Enxerto-Hospedeiro/genética , Transplante de Células-Tronco Hematopoéticas , Mieloma Múltiplo/cirurgia , Quimeras de Transplante/genética , Métodos Epidemiológicos , Amplificação de Genes/genética , Marcadores Genéticos , Doença Enxerto-Hospedeiro/prevenção & controle , Transplante de Células-Tronco Hematopoéticas/efeitos adversos , Transplante de Células-Tronco Hematopoéticas/métodos , Hibridização in Situ Fluorescente , Repetições MinissatélitesRESUMO
FUNDAMENTO: A Doença Arterial Coronariana (DAC) é a aterosclerose das artérias coronárias que transportam o sangue para o coração. A aterosclerose é uma doença inflamatória. As variações gênicas das citocinas - como as associadas à família IL1 - fazem parte da patogênese da aterosclerose. OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi determinar a relação entre os polimorfismos da família IL1 (VNTR do IL1RN, posições -511 e +3953 do IL1B) e a DAC na população turca. MÉTODOS: Um total de 427 indivíduos foram submetidos à angiografia coronariana e em seguida divididos da seguinte forma: 170 no grupo controle e 257 no grupo de pacientes com DAC. Os sujeitos com DAC foram divididos em dois subgrupos: 91 no grupo de Doença Coronariana em um único vaso (Single Vessel Disease - SVD) e 166 no grupo Doença Coronariana em múltiplos vasos (Multiple Vessel Disease - MVD). Os genótipos de IL1RN e IL1B (-511, +3953) foram determinados por reação em cadeia da polimerase (RCP), seguida de análise da digestão por enzima de restrição. RESULTADOS: Não foram observadas diferenças significantes nas distribuições de genótipos de IL1RN e IL1B (-511 e +3953) entre os sujeitos com DAC e os controles, ou entre sujeitos com MVD e controles. No entanto, observou-se uma relação significante no genótipo IL1RN 2/2 entre sujeitos portadores de SVD e controles (P= 0,016, x2: 10,289, OR: 2,94IC 95 por cento 1,183 - 7,229). Tampouco foi observada diferença estatisticamente significante nas freqüências dos alelos de IL1RN e IL1B (-511 e +3953) entre os sujeitos com DAC e controles, os sujeitos com MVD e controles, ou ainda os sujeitos SVD e controles. CONCLUSÃO: Não foi observada nenhuma relação na freqüência alélica e nem na distribuição genotípica dos polimorfismos de IL1RN e IL1B entre sujeitos com DAC e grupos controle. No entanto, o genótipo IL1RN 2/2 pode representar um fator de risco para sujeitos com SVD na população turca.
BACKGROUND: Coronary Artery Disease (CAD) is the atherosclerosis of coronary arteries that carry blood to the heart muscle. Atherosclerosis is an inflammatory disease. Cytokine gene variations such as those associated with the IL1 family are involved in the pathogenesis of atherosclerosis. OBJECTIVE: The purpose of this study was to determine the relationship between IL1 family polymorphisms (IL1RN VNTR, IL1B positions -511 and +3953) and CAD in Turkish population. METHODS: 427 individuals were submitted to coronary angiography and were grouped as 170 control subjects and 257 CAD patients. The CAD subjects were divided into two subgroups: 91 Single Vessel Disease (SVD) and 166 Multiple Vessel Disease (MVD) subjects. The genotypes of IL1RN and of IL1B (-511, +3953) were determined by polymerase chain reaction (PCR) followed by restriction digestion analysis. RESULTS: No significant difference was found in IL1RN and IL1B (-511 and +3953) genotype distributions between CAD and control subjects or MVD and control subjects. However, significant association was seen in IL1RN 2/2 genotype between SVD and control subjects (P= 0.016, x2: 10.289, OR: 2.94, 95 percent CI: 1.183-7.229). Similarly, no statistically significant difference was found in IL1RN and IL1B (-511 and +3953) allele frequencies between CAD and control subjects, MVD and control subjects or SVD and control subjects. CONCLUSION: No association was found in either allele frequency or genotype distribution of IL1RN and IL1B polymorphisms between CAD and the control groups. However; IL1RN 2/2 genotype may be a risk factor for SVD in the Turkish population.
Assuntos
Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Doença da Artéria Coronariana/genética , Frequência do Gene/genética , Proteína Antagonista do Receptor de Interleucina 1/genética , Interleucina-1beta/genética , Polimorfismo de Nucleotídeo Único/genética , Estudos de Casos e Controles , Doença da Artéria Coronariana/diagnóstico , Genótipo , Modelos Logísticos , Reação em Cadeia da Polimerase , Fatores de Risco , TurquiaRESUMO
La identificación rápida de levaduras de origen ambiental o clínico es de importancia para el estudio de la biodiversidad de estos microorganismos y para la detección de posibles patógenos. Rhodotorula mucilaginosa es una levadura ubicua y pigmentada, capaz de producir infecciones en pacientes inmunocomprometidos. En este trabajo se evaluó la utilidad de la técnica de fingerprinting conocida como MSP-PCR (Micro/Minisatellite-Primed PCR) en la caracterización e identificación de aislamientos ambientales de R. mucilaginosa provenientes de la Patagonia noroccidental. Sobre la base de sus caracteres fenotípicos, de un total de 200 levaduras pigmentadas se seleccionaron 110 aislamientos que presuntamente corresponderían a la especie R. mucilaginosa. Se evaluaron los iniciadores (GTG)5, (GAC)5 y M13 en aislamientos representativos, y se seleccionó el iniciador (GTG)5 por ser el que permitió una mejor agrupación de los aislamientos pertenecientes a R. mucilaginosa y una mejor diferenciación de éstos con los de especies filogenéticamente próximas. Utilizando dicho iniciador, el 87% de los aislamientos de R. mucilaginosa presentó un perfil de MSP-PCR similar (> 60%) al de la cepa de referencia CBS 316T de R. mucilaginosa. La técnica de MSP-PCR resultó efectiva, tanto para caracterizar e identificar un número elevado de aislamientos ambientales de R. mucilaginosa como para detectar polimorfismos en la especie.
The rapid identification of environmental or clinical yeast isolates is important for biodiversity studies and the detection of probable pathogens. Rhodotorula mucilaginosa is a ubiquitous and pigmented yeast capable of infecting immunocompromised patients. In this study, we evaluated the Micro/mini satellite-primed PCR (MSP-PCR) fingerprinting method for the characterization and identification of R. mucilaginosa isolates from natural environments in northwestern Patagonia. There were selected 110 putative R. mucilaginosa isolates from 200 environmental pigmented yeast isolates on the basis of phenotypic criteria. (GTG)5, (GAC)5 and M13 primers were initially evaluated in representative R. mucilaginosa isolates. (GTG)5 allowed a good grouping of these isolates and, at the same time, a good differentiation among closely related species, and thus was selected for subsequent studies. R. mucilaginosa isolates (87%) presented similar (> 60%) MSP-PCR profiles to those of the reference strain CBS 316T. The MSP-PCR technique was effective, both, for the characterization and identification of a large number of R. mucilaginosa environmental isolates as well as for the detection of polymorphisms within the species.