Effect of intranasal administration of NeuroEPO in the histological structure of the olfactory mucosa of Wistar rats / Efecto de la administración intranasal de NeuroEPO en la estructura histológica de la mucosa olfatoria de ratas Wistar

Introduction: Strokes and neurodegenerative diseases are major global health problems, not only because they cause high mortality and disability, but due to the lack of effective therapies. NeuroEPO, a variant of recombinant human erythropoietin (rHu-EPO) with a low sialic acid content, has shown encouraging results as a potential neuroprotective agent when administered intranasally. Objective: To determine the effect of intranasal administration of NeuroEPO on the histological structure of the olfactory mucosa of Wistar rats. Materials and Methods: An experimental, prospective, and longitudinal study was conducted on Wistar rats. Ten healthy animals were randomly distributed into two groups of five each. The control group received a vehicle (0.3 μl/g/day) and the treated group received NeuroEPO (300 μg/kg/day). Both treatments were administered intranasally for 28 days. The histological characteristics of the olfactory mucosa were evaluated. The medians between the study groups were compared using the Mann-Whitney U test. Results: There were no alterations in the histological characteristics of the olfactory epithelium. However, slight hypertrophy and hyperplasia of the Bowman's glands were observed at the level of the lamina propria in the group treated with NeuroEPO. Conclusions: The administration of the nasal formulation of NeuroEPO did not induce histological alterations of the olfactory mucosa of Wistar rats under the experimental conditions of this research.

Introducción: Los accidentes cerebrovasculares y las enfermedades neurodegenerativas constituyen un importante problema de salud mundial. No solo porque causan una alta mortalidad y discapacidad, sino por la falta de terapias eficaces para tratarlos. La NeuroEPO, una variante de la eritropoyetina humana recombinante (rHu-EPO) con bajo contenido en ácido siálico, ha mostrado resultados alentadores como potencial agente neuroprotector al ser administrada por vía intranasal. Objetivo: Determinar el efecto de la administración intranasal de NeuroEPO en la estructura histológica de la mucosa olfatoria de ratas Wistar. Materiales y Métodos: Se realizó un estudio experimental, prospectivo y de corte longitudinal en ratas Wistar. Se utilizaron diez animales sanos distribuidos aleatoriamente en dos grupos de cinco cada uno. El grupo control recibió vehículo (0,3 μl/g/día) y el grupo tratado recibió NeuroEPO (300 μg/kg/día). Ambos tratamientos fueron administrados por vía intranasal durante 28 días. Fueron evaluadas las características histológicas de la mucosa olfatoria. Las medianas de los grupos del estudio fueron comparadas mediante la prueba U de Mann-Whitney. Resultados: No se evidenciaron alteraciones en las características histológicas del epitelio olfatorio. Sin embargo, a nivel de la lámina propia en el grupo tratado con NeuroEPO, se observó una ligera hipertrofia e hiperplasia de las glándulas de Bowman. Conclusiones: La administración de la formulación nasal de NeuroEPO no indujo alteraciones histopatológicas de la mucosa olfatoria de ratas Wistar en las condiciones experimentales de esta investigación.

Intranasal administration of NeuroEPO does not affect the structure of respiratory mucosa in Wistar rats / La administración de NeuroEPO intranasal no afecta la estructura de la mucosa respiratoria en ratas Wistar

Introduction: Diseases associated with the Central Nervous System represent a group of conditions with important social and economic repercussions. New treatment strategies with NeuroEPO offer new opportunities to prevent the onset and progression of these disorders. NeuroEPO administered intranasally can reach the Central Nervous System through various mechanisms involving the olfactory and trigeminal nerves, respiratory and olfactory mucosa, nasal vasculature, cerebrospinal fluid, and the lymphatic system. Objective: To determine the effect of intranasal administration of NeuroEPO on the histologic structure of the respiratory mucosa and its associated lymphatic tissue in Wistar rats. Material and Methods: An experimental, descriptive, longitudinal, prospective study was conducted, using the Wistar rat as a biological model. Ten healthy animals were randomly distributed in two groups of five animals each. One of the groups received intranasal NeuroEPO for 28 days at doses of 300 μg/kg. The other group was given a vehicle at a rate of 0,3μl/g. The histological characteristics of the respiratory mucosa were studied. The Mann-Whitney test was used to compare the means. Results: No alterations in the histological characteristics of the respiratory mucosa and the lymphatic tissue associated with the nasal mucosa were observed in Wistar rats after the administration of NeuroEPO. Conclusion: Intranasal administration of NeuroEPO does not cause pathological changes in the histological structure of the respiratory mucosa or the lymphatic tissue associated with the nasal mucosa of Wistar rats in our experimental conditions.

Introducción: Las enfermedades asociadas al Sistema Nervioso Central representan un grupo de padecimientos con importante repercusión social y económica. Las nuevas estrategias de tratamiento con NeuroEPO ofrecen nuevas oportunidades para prevenir la aparición y la progresión de estos desórdenes. La NeuroEPO administrada por vía intranasal puede alcanzar al Sistema Nervioso Central a través de varios mecanismos que involucran los nervios olfatorios y trigéminos, mucosa respiratoria y olfatoria, vasculatura nasal, fluido cerebroespinal y el sistema linfático. Objetivo: Determinar el efecto de la administración intranasal de NeuroEPO sobre la estructura histológica de la mucosa respiratoria y de su tejido linfático asociado en ratas Wistar. Material y métodos: Se realizó un estudio experimental, descriptivo, longitudinal, prospectivo, utilizando la rata Wistar como modelo biológico. Se utilizaron diez animales sanos distribuidos aleatoriamente en dos grupos de cinco cada uno. Uno de los grupos recibió NeuroEPO intranasal durante 28 días a dosis de 300 µg/ kg. Al otro grupo se le administró vehículo a una razón de 0,3µl /g. Se estudiaron las características histológicas de la mucosa respiratoria. Las medianas de los grupos fueron comparadas mediante la prueba U de Mann-Whitney. Resultados: No se observaron alteraciones en las características histológicas de la mucosa respiratoria, ni del tejido linfático asociado a la mucosa nasal en ratas Wistar, tras la administración de la NeuroEPO. Conclusión: La administración intranasal de NeuroEPO no provoca cambios patológicos sobre la estructura histológica de la mucosa respiratoria ni del tejido linfático asociado a la mucosa nasal de ratas Wistar en nuestras condiciones experimentales.

Protective effect of NeuroEPO on the reproduction of diabetic rats / Efecto protector de la NeuroEPO en la reproducción de ratas diabéticas

Introduction: Pregestational diabetes constitutes a reproductive risk which requires new treatment strategies. NeuroEPO, a variant of the recombinant human erythropoietin produced in Cuba, has neuroprotective and hypoglycemic effects which can be considered for the treatment of this entity. Objective: To evaluate the protective effect of NeuroEPO on the reproduction of diabetic rats. Material and Methods: Four groups of adult female Wistar rats with streptozotocin-induced diabetes were used. During pregnancy, one group received the vehicle and the rest of the groups received different doses of NeuroEPO (0,5 mg/kg, 0,75 mg/kg, and 1 mg/kg) subcutaneously, on alternate days, for a total of six applications. A group of non-diabetic rats was used as a control group. Glycemia and reproductive variables were evaluated. For comparisons, Analysis of Variance and Fisher's Exact Test were used. There were significant differences with p-values less than 0,05. Results: The group with vehicle presented maintained hyperglycemia, fewer implantations, and embryos, and increased gestational losses. In the group receiving 0,5 mg/kg of NeuroEPO, glycemia decreased significantly and the results of the reproductive variables were similar to the group of non-diabetic rats. With higher doses of NeuroEPO, gestational losses were increased. No congenital malformations were identified in either group. Conclusions: The repeated administration of 0,5 mg/kg of NeuroEPO has a beneficial effect on the reproduction of diabetic rats, which may be associated with the reduction of hyperglycemia. Other cytoprotective mechanisms of NeuroEPO should be evaluated in future studies(AU)

Introducción: la diabetes pre-gestacional constituye un riesgo reproductivo, lo que requiere nuevas estrategias de tratamiento. Teniendo en cuenta que la NeuroEPO, una variante de la eritropoyetina recombinante humana producida en Cuba, tiene efectos neuroprotectores e hipoglicemiantes. Objetivo: evaluar el efecto protector de la NeuroEPO en la reproducción de ratas diabéticas. Material y Métodos: se utilizaron cuatro grupos de ratas Wistar hembras adultas, con diabetes inducida por estreptozotocina. Durante la gestación, un grupo recibió el vehículo y el resto diferentes dosis de NeuroEPO (0,5 mg/kg, 0,75 mg/kg y 1 mg/kg), por vía subcutánea, en días alternos, para un total de seis aplicaciones. Se empleó un grupo de ratas no-diabéticas como control. Se evaluó la glicemia y variables reproductivas. Para las comparaciones se empleó el Análisis de Varianza y la Prueba Exacta de Fisher. Las diferencias se consideraron significativas con valores de p menores que 0,05. Resultados: el grupo con vehículo presentó hiperglicemia mantenida, menor número de implantaciones y embriones, e incremento de las pérdidas gestacionales. En el grupo que recibió 0,5 mg/kg de NeuroEPO, la glicemia disminuyó de forma significativa y los resultados de las variables reproductivas fueron similares al grupo de ratas no-diabéticas. Con las dosis superiores de NeuroEPO se incrementaron las pérdidas gestacionales. No se identificaron malformaciones congénitas en ninguno de los grupos. Conclusiones: la administración reiterada de 0,5 mg/kg de NeuroEPO tiene efecto beneficioso en la reproducción de ratas diabéticas, que puede estar asociado a la reducción de la hiperglicemia. Otros mecanismos citoprotectores de la NeuroEPO deben ser evaluados en futuros estudios(AU)

Efecto hipoglicemiante de la NeuroEPO en ratas con y sin diabetes mellitus / Hypoglycemic effect of NeuroEPO in diabetic and non-diabetic rats

RESUMEN Introducción: La NeuroEPO es una variante no-hematopoyética de la eritropoyetina recombinante humana, que pudiera tener efecto hipoglicemiante. Objetivo: Evaluar la influencia de la NeuroEPO sobre la glicemia de ratas con diabetes mellitus y ratas no-diabéticas. Material y Métodos: Se realizaron experimentos en ratas Wistar con diabetes inducida por estreptozotocina, con y sin tratamiento con insulina, y en ratas no-diabéticas con una sobrecarga de glucosa. En cada experimento, un grupo recibió una inyección subcutánea de NeuroEPO (0,5 mg/kg) y otro el vehículo, y se determinó la glicemia durante 120 minutos. Se realizaron comparaciones mediante análisis de varianza de una y dos vías, seguidas por la prueba de Bonferroni. Las diferencias se consideraron significativas con valores de p < 0,05. Resultados: En las ratas diabéticas sin tratamiento con insulina, los niveles de glicemia del grupo con NeuroEPO disminuyeron de forma significativa. En las ratas no-diabéticas que recibieron NeuroEPO y una sobrecarga de glucosa, la glicemia fue similar al grupo control. En las ratas diabéticas que recibieron NeuroEPO e insulina la reducción de la glicemia fue mayor que en el grupo que solo recibió insulina. Conclusiones: La NeuroEPO tiene un efecto hipoglicemiante en ratas diabéticas, por un mecanismo insulinotrópico que muestra sinergismo con la insulina en el tratamiento de la hiperglicemia. Sin embargo, la NeuroEPO no influye en la tolerancia a la glucosa de ratas no-diabéticas, al menos de forma inmediata. Es necesario profundizar en los mecanismos mediante los cuales la NeuroEPO puede reducir la hiperglicemia, y la influencia de esta sustancia en condiciones de normoglicemia.

ABSTRACT Introduction: NeuroEPO is a non-hematopoietic variant of human recombinant erythropoietin, which may have a hypoglycemic effect. Objectives: To evaluate the influence of NeuroEPO on glycemia in diabetic and non-diabetic rats. Material and Methods: The experiments were conducted in Wistar rats with streptozotocin-induced diabetes with and without insulin treatment, and in non-diabetic rats with glucose overload. In each experiment, one group received a subcutaneous injection of NeuroEPO (0.5 mg/kg) and the other group received a vehicle. Glycemia was determined in 120 min. Comparisons were made using one-and two-way analysis of variance, followed by the Bonferroni test. The differences were considered significant with p values < 0,05. Results: In diabetic rats without insulin treatment, glycemic levels decreased significantly in the group that received NeuroEPO. In nondiabetic rats that received NeuroEPO and a glucose overload, glycemia was similar to that in the control group. In diabetic rats that received NeuroEPO and insulin, the glycemia reduction was greater than in the group that only received insulin. Conclusions: NeuroEPO has a hypoglycemic effect in diabetic rats due to an insulinotropic mechanism that shows synergism with insulin in the treatment of hyperglycemia. However, NeuroEPO does not influence the glucose tolerance in non-diabetic rats, at least immediately. It is necessary to delve into the mechanisms by which NeuroEPO can reduce hyperglycemia and the influence of this substance under conditions of normoglycemia.