Conservación ex situ y propagación in vitro de germoplasma de Neltuma alba Griseb / Germoplasm ex situ conservation and in vitro propagation of Neltuma alba Griseb

RESUMEN Neltuma alba Griseb es una especie emblemática de la Ecorregión Chaqueña, por el valor de su madera y frutos. Los resultados de la presente investigación, dan cuenta de que las semillas de algarrobo blanco pueden ser críoconservadas sin afectar el poder y la energía para germinar. Las semillas fueron conservadas por tres meses a Temperatura ambiente (24° y 30°C, Congelamiento (-18°C) y Nitrógeno líquido (-196°C). Posteriormente, fueron escarificadas mecánicamente y sembradas en tierra negra y aserrín (3:1). Los resultados fueron sometidos a pruebas no paramétricas de Kruskal-Wallis, analizándose poder, energía y vigor germinativo, y no se detectaron diferencias significativas entre tratamientos. Para la regeneración in vitro en medio de cultivo MS suplementados con 3 mg L-1 IBA y 0,05 mg L-1 CIN, se utilizaron segmentos nodales de 2 cm de longitud obtenidos de plántulas provenientes de semillas. Los porcentajes de enraizamiento obtenidos fueron elevados (87-90%). No existiendo diferencias significativas entre los tratamientos ensayados. El almacenamiento de semillas a 24°-30°C resulta ser el más apropiado para alcanzar altos porcentajes de germinación

ABSTRACT Neltuma alba Gris is an emblematic specie of Chaco Ecoregion for its wood and fruits value. This research show that algarrobo blanco's seeds can cryopreserve without affecting germination power and energy. The seeds were kept for three months at 24°-30°C, (-18°C) and (-196°C). Later, they were mechanically scarified and sown in black soil and sawdust (3: 1). The results were subjected to non-parametric Kruskal-Wallis tests, analyzing germination power, energy and vigor. The test did not detect significant differences between treatments. The nodal segments (2 cm long) obtained from plants of seeds were used for in vitro regeneration in MS culture medium supplemented with 3 mg L-1 IBA and 0.05 mg L-1 CIN, The rooting percentages obtained were high (87-90%). There are no significant differences between treatments tested. The storage of seeds at 24°-30°C is the most approppiate to rich high percentages of germination.

Manejo Quirúrgico del Queratoquiste Odontogénico con Invasión al Seno Maxilar: Reporte de Serie Casos y Revisión de la Literatura

RESUMEN: El queratoquiste odontogénico (QQO) es una quiste intraóseo poco frecuente que varía entre un 3 a 11% de todos los quistes odontogénicos, su ubicación en el maxilar es rara y la invasión al seno maxilar lo es aún más. El QQO es una patología benigna, localmente agresiva que tiene una alta tasa de recidiva. Se han descrito diversas técnicas quirúrgicas para su tratamiento, las cuales van desde lo más conservador como la enucleación a lo más radical como una resección. El uso de agentes coadyuvantes químicos o cauterizantes han logrado disminuir la tasa de recidiva en conjunto con tratamientos más conservadores, disminuyendo la morbilidad y secuelas asociada a una resección. El objetivo de este trabajo es presentar una serie de casos clínicos de QQO que invaden el seno maxilar, su tratamiento de manera conservadora y una revisión de la literatura comparando los diversos tratamientos y su tasa de recidiva.

ABSTRACT: Odontogenic keratocyst (OC) is a rare intraosseous pathology that varies between 3 % and 11 % of all odontogenic cysts, its location in the maxilla is rare, and invasion of the maxillary sinus is even more so. OC is a benign, locally aggressive pathology that has a high recurrence rate. Various surgical techniques have been described for its treatment, ranging from the most conservative, such as enucleation, to the most radical, such as resection. The use of chemical or cauterizing adjuvant agents has managed to reduce the recurrence rate in conjunction with more conservative treatments, reducing the morbidity and sequelae associated with a resection. The objective of this work is to present a series of clinical cases of OC that invade the maxillary sinus, their treatment being carried out in a conservatively manner, and a review of the literature comparing the various treatments and their recurrence rate.

Efectos terapéuticos de la crioterapia con nitrógeno líquido en lesiones por fotodaño, en la consulta dermatológica / Therapeutic effects of cryotherapy with liquid nitrogen in lesions by photo damage in dermatologic consultation

RESUMEN La crioterapia es el conjunto de procedimientos que utilizan el frío en la terapéutica médica. Emplea diversos sistemas y tiene como resultado la disminución de la temperatura de la piel; produce una destrucción local de tejido de forma eficaz y controlada. El objetivo de este trabajo fue realizar una actualización para exponer los aspectos esenciales sobre formas de empleos, indicaciones, complicaciones y contraindicaciones. Existen varios métodos de aplicación de la crioterapia, que incluyen las técnicas de congelación de spray o aerosol y con aplicadores, el método criosonda, y el uso de termoacoplador. Está indicada en varias entidades, entre las que se encuentran la queratosis seborreica y actínica, lentigos solares, carcinoma basocelular y espinocelular in situ. Las complicaciones más observadas son vesicoampollas, hiperpigmentación e hipopigmentación, y las contraindicaciones comunes son intolerancia al frío, tumores con bordes no delimitados o con pigmentación muy oscura, en localizaciones cerca de los márgenes de los ojos, párpados, mucosas, alas nasales y el conducto auditivo. El dominio de los métodos de aplicación e indicaciones es indispensable para elegir la conducta adecuada; de esta forma se evitan complicaciones y efectos colaterales (AU).

ABSTRACT Cryotherapy is the whole of procedures that use cold in medical therapy. It uses various systems and results in a decrease in skin temperature, leading to a local destruction of tissue in an effective and controlled way. The objective of this work is to make an update to expose the essential aspects on the ways of use, indications, complications and contraindications. There are several cryotherapy application methods that include spray or spray freezing techniques and applicators, the cryoprobe method, and the thermocoupler use. It is indicated in several entities, and among the most frequent are seborrheic and actinic keratosis, solar lentigo, basal cell and squamous cell carcinomas in situ. The most observed complications are vesical blisters, hyperpigmentation and hypopigmentation, and the most common complications are: cold intolerance, tumors with non-delimited borders or very dark pigmentation, located near the margins of the eyes, on eyelids, mucous membranes, nasal wings, and on the ear canal. The mastery of the signs and application methods are essential to choose the appropriate behavior against the disease: side effects and complications are avoided that way (AU).

Evaluación de diferentes métodos de extracción de ARN a partir del hongo nativo Xylaria sp / Evaluation of different RNA extraction methods from the native fungus Xylaria sp

RESUMEN La extracción de ARN de calidad constituye el primer paso para el análisis de la expresión génica. Sin embargo, su obtención no es sencilla debido a la susceptibilidad de esta molécula a la presencia de contaminantes como ARNasas, proteínas y polisacáridos. Adicionalmente, debido a la diversa composición de la pared celular de los hongos se requiere optimizar los procesos de extracción de ARN para organismos específicos. Este estudio evalúo el uso de diferentes metodologías de homogeneización de tejido (nitrógeno líquido y liofilización) y extracción de ARN (Trizol, CTAB y RNeasy mini kit) a partir del hongo nativo ascomiceto Xylaria sp. Se determinó la pureza, concentración e integridad del ARN obtenido por medio de espectrofotometría y electroforesis. Adicionalmente, se diseñaron cebadores de referencia para el gen β-Tubulina a partir del alineamiento de secuencias de este gen obtenidas de diferentes ascomicetes. Estos cebadores fueron utilizados para evaluar si el ARN extraído es amplificable mediante RT-PCR. Se determinó que la homogeneización de tejido por medio de liofilización generó mayores rendimientos de extracción independientemente del protocolo de extracción utilizado; sin embargo, éstos alteraron la integridad del ARN. Se obtuvo un ARN con mayor pureza con el protocolo CTAB y un mayor rendimiento con el RNeasy mini kit. Los resultados indican que el ARN extraído, independientemente de la metodología de homogeneización y extracción utilizada, es amplificable mediante RT-PCR. No obstante, se recomienda homogeneizar el tejido con nitrógeno líquido y extraer con RNeasy mini kit por la brevedad del protocolo de extracción y calidad obtenida.

ABSTRACT Obtaining high quality RNA is the first step for gene expression analysis. However, the low stability of this molecule and high presence of contaminants such as RNases, proteins and polysaccharides may trouble extractions. Fungi cell wall composition is highly diverse; therefore optimizing RNA extraction procedures is necessary when studying specific organisms. In this study, different methods of tissue homogenization (liquid nitrogen and lyophilization) and RNA extraction (Trizol, CTAB and RNeasy mini kit) were assessed with a native ascomycete, Xylaria sp. RNA purity, concentration and integrity were determined by spectrophotometry and electrophoresis. In addition, a set of housekeeping gene primers was designed targeting the β-tubulin gene. The primers were used to determine if the RNA extracted allowed RT-PCR amplification. It was demonstrated that homogenization of tissue by lyophilization allowed higher yields of RNA regardless of the extraction protocol used, however, the RNA integrity was affected. The higher RNA purity was obtained using CTAB and the higher yields using the RNeasy mini kit. The extracted RNA is amplifiable by RT-PCR regardless of the homogenization and extraction methodology used. However, it is recommended to homogenize the tissue with liquid nitrogen and to extract RNA with the RNeasy mini kit due the shortness and efficiency of these protocols.

Criocirugía como técnica quirúrgica en el tratamiento de osteosarcoma de fémur. A propósito de un caso / Cryosurgery as adjuvant therapy on osteosarcoma of femur. A case report

El osteosarcoma es el tumor óseo primario, maligno, más común; se presenta más frecuentemente en la segunda década de la vida. Las metáfisis de los huesos largos que crecen rápidamente como el fémur distal y el húmero proximal son comúnmente los más afectados. Clínicamente es característico el dolor óseo persistente por 3 ­ 6 meses. Radiológicamente, presenta imágenes de márgenes no geográficas, con destrucción (lisis) y diferentes tipos de reacción perióstica, incluyendo el triángulo de Codman. El principal tratamiento incluye la quimioterapia y la cirugía, donde según su estadío, se plantea la conservación del miembro, plastia rotacional o amputación. En éste trabajo presentamos un caso clínico de un paciente adolescente con osteosarcoma de fémur tratado con cirugía preservadora del miembro con la técnica de criocirugía (nitrógeno líquido)(AU)

Osteosarcoma is the most common bone malignant tumour, frequently appearing during the 20s. The metaphyses of long bones which have a rapid growth, e.g. knee and shoulder, are the most commonly affected. A clinical characteristic is the persistent pain in the affected bone which may last from 3 to 6 months. Radiologycally, the lytic areas have non-geographical boundaries and present destruction of the bone tissue, apart from having different types of periosteal reactions, including the Codman Triangle. The treatment consists of chemotherapy and surgery. Chemotherapy is applied before and after surgery. The surgery may be limb salvage surgery or complete amputation of the affected member. This work describes a clinical case of an adolescent suffering from a femur osteosarcoma treated through limb salvage surgery under cryosurgery(AU)

Hiperplasia multiepitelial focal: tratamiento comparativo, ácido glicirricínico contra nitrógeno líquido / Focal multiepithelial hyperplasia: comparative treatment, glycyrrhizinic acid versus liquid nitrogen

La hiperplasia multiepitelial focal (HMF), se caracteriza por la aparición de lesiones múltiples en la mucosa de la cavidad bucal en población pediátrica y se asocia con la presencia del virus papiloma humano. Actualmente no existe un tratamiento de elección, el más empleado es el nitrógeno líquido (NL), pero es doloroso e incómodo para el paciente. Es por eso la necesidad de buscar nuevas alternativas de tratamiento, cuidando de ser menos invasivos, como el ácido glicirricínico (AG). Objetivo: Comparar la eficacia del AG contra el NL en la HMF en pacientes entre los 5 a 13 años de edad, en el HIM. Determinar las características clínico-epidemiológicas y los efectos adversos. Material y métodos: Ensayo clínico controlado aleatorizado. Se dividió en dos grupos. Grupo A tratado con la aplicación de AG cuatro veces al día con dos disparos del atomizador por un mes. Un grupo B tratado con NL una vez al mes por tres meses. Resultados: Se estudiaron 20 pacientes en edad pediátrica, 11 masculinos y 9 femeninos; 12 con familiares afectados. La topografía más frecuente fue el labio inferior. El grupo tratado con AG tuvo una eficacia de 63% en comparación con NL que tuvo una eficacia del 81%. Sólo se observaron efectos adversos sistémicos con NL. Se obtuvo una p de 0.075 (7.5%). Conclusiones: Se comprobó la eficacia del AG, a pesar de que fue menor que con NL. Se puede utilizar como un tratamiento coadyuvante para disminuir las lesiones, con mínimos efectos adversos locales.

In pediatric population, focal multiepithelial hyperplasia (FMH) is characterized by the onset of multiple lesions in the mucosa of the mouth; it is associated to the human papillomavirus. Presently, no special treatment is preferred, the most widely used is liquid nitrogen (LN) treatment, nevertheless, this is an uncomfortable and painful treatment for the patient. This would prompt us to look for new, less invasive treatment alternatives such as use of glycyrrhizinic acid (GA). Aim: To compare GA efficiency versus LN in FMH in Mexico Children's Hospital patients (HIM) aged 5 to 13 years. To determine clinical epidemiological characteristics as well as adverse effects. Material and methods: The present was a randomized controlled clinical trial. It was divided into two groups: group A was treated with GA applications, four times a day, two atomizer shots, for one month. Group B was treated with LN once a month for three months. Results: 20 pediatric-age patients were studied, out of which 11 were male and 9 female. 12 patients had relatives afflicted with the disease. Most frequent topography was the lower lip. Efficiency of group treated with GA was 63% when compared to group treated with LN which exhibited 81% efficiency. Systemic diverse effects were only observed with use of LN. 0.075 p was obtained (7.5%). Conclusions: GA efficiency was ascertained although it was lesser than that of LN. GA can be used as an adjuvant treatment in order to decrease lesions, it elicits minimal local adverse effects.

Aplicación del nitrógeno líquido en el tratamiento de pacientes con leucoplasia bucal / Application of liquid nitrogen in the treatment of patients with oral leukoplakia

Se realizó un estudio descriptivo y transversal de 200 pacientes con leucoplasia bucal, atendidos en la consulta estomatológica del Policlínico de Especialidades del Hospital Provincial Docente Clinicoquirúrgico "Saturnino Lora Torres" de Santiago de Cuba, desde septiembre del 2007 hasta igual mes del 2012, a fin de evaluar los efectos terapéuticos del nitrógeno líquido en el tratamiento de esta afección. Este refrigerante se empleó en la remoción quirúrgica de la citada enfermedad y propició una óptima regeneración de los tejidos bucales afectados en el menor tiempo posible. Para ello se aplicaron intervenciones repetidas de enfriamientos súbitos, así como deshielos lentos y espontáneos, con excelentes resultados en los integrantes de la casuística. Esta sustancia criogénica fue efectiva en el epitelio mucoso por sus propiedades, tales como: anestésica, antimicrobiana, antiinfecciosa, cicatrizante e inmunológica y permitió una curación rápida, menos dolorosa, sin riesgo ni complicación e inocua a los tejidos bucales, lo cual impidió la formación de cicatrices residuales.

A descriptive and cross-sectional study was carried out in 200 patients with oral leukoplakia, attended in the stomatology department of the Polyclinic of Specialties in "Saturnino Lora Torres" Provincial Teaching Clinical Surgical Hospital of Santiago de Cuba, from September 2007 to the same month of 2012, in order to evaluate the therapeutic effects of liquid nitrogen in treating this condition. This coolant was used in the surgical removal of the lesion and contributed to a good regeneration of affected oral tissues in the shortest time possible. With this purpose repeated interventions of sudden cooling were applied, as well as slow and spontaneous thaws with excellent results in the members of the case material. This cryogenic substance was effective in the mucosal epithelium by its anesthetic, antimicrobial, anti-infective, healing and immunologic properties, allowing a quick and less painful cure, without risk or complication, and safe for oral tissues, which prevented the occurrence of residual scars.

Long-term preservation of leptospiras by liquid nitrogen / Conservación de leptospiras en nitrógeno líquido

Liquid nitrogen freezing is recommended for long-term preservation of Leptospira serovars. However, there is no standard protocol to follow for this methodology. We herein report a simple procedure to preserve well-characterized Leptospira serovars unaltered for long-term storage in liquid nitrogen. Forty-three (43) leptospira strains, cryoprotected with 10% (v/v) glycerol were rapidly frozen in a dry-ice methanol bath and immediately submerged in liquid-nitrogen. Viability was retained in 100%, 93% and 83% of the frozen cultures after 6, 18 and 54 months, following freezing and storage in liquid nitrogen, respectively. Motility and agglutinability were not altered. These results demonstrate the usefulness of this protocol for long-term storage of genus Leptospira in liquid nitrogen.

Se recomienda la congelación en nitrógeno líquido para el mantenimiento de cepas de leptospiras a largo plazo. Sin embargo, no existe para ello una metodología de trabajo estandarizada. En este trabajo se presenta y evalúa un protocolo simple para conservar inalteradas cepas de leptospiras en nitrógeno líquido durante largo tiempo. Cuarenta y tres (43) cepas de leptospiras crioprotegidas con glicerol al 10% (v/v) fueron rápidamente congeladas en un baño de metanol y hielo seco, e inmediatamente sumergidas en nitrógeno líquido. Fue posible recuperar el 100%, 93% y 83% de los cultivos congelados a los 6, 18 y 54 meses poscongelación, respectivamente, sin observarse alteración en la movilidad ni en la aglutinabilidad de las cepas recuperadas. Estos resultados demuestran la utilidad del protocolo presentado para conservar cepas del género Leptospira en nitrógeno líquido durante largos períodos de tiempo.