Aislamiento y caracterizacion parcial de fracciones con actividad ribonucleasa a partir del latex de calotropis procera (Aiton) W.T. Aiton y pedilanthus tithymaloides (L.) poit / Isolation and partial characterization of fractions with ribonuclease activity from latex of calotropis procera (Aiton) W.T. Aiton and pedilanthus tithymaloides (L.) poit

Con el objetivo de aislar y caracterizar parcialmente las enzimas ribonucleasas (RNasas) contenidas en el látex de Calotropis procera y Pedilanthus tithymaloides, se colectaron muestras de plantas adultas. Las proteínas solubles fueron extraídas con acetato de sodio y centrifugación a 16.000 x g durante 15 min y fraccionadas por cromatografía de intercambio iónico. Se estimó la masa molecular a través de ecuaciones de regresión lineal. Se realizaron pruebas de glicosilación. En ambas especies, las proteínas con actividad RNasa presentaron una masa molecular entre 28 y 30 kDa. No existe evidencia de proteínas glicosiladas en el látex de C. procera. En P. tithymaloides la RNasa es una proteína glicosilada.

In order to isolate and characterize partially ribonucleases (RNases) enzymes contained in the latex from Calotropis procera and Pedilanthus tithymaloides, samples were collected from mature plants. Soluble proteins were extracted with sodium acetate and centrifugation at 16,000 xg for 15 min and fractionated by ion exchange chromatography. Molecular mass was estimated by linear regression equations. Glycosylation tests were conducted. In both species, proteins with RNase activity showed a molecular mass between 28 and 30 kDa. No evidence of glycosylated proteins in latex from C. procera. In P. tithymaloides, RNase may be a glycosylated protein.

Caracterización del triterpeno cicloartanol aislado del extracto de dicloromentano de Pedilanthus tithymaloides / Characterization of cycloartanol triterpene isolated from dichloromethane extract of Pedilanthus tithymaloides

Introduction: Pedilanthus tithymaloides is known as ítamo real and it has been previously reported as an alternative to treatment of oral cavity virus infections. Objective: to explain procedures to characterize one of the major compounds isolated from dichloromethane extracts of Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit (leaves). Methods: it was obtained cycloartanol from dichloromethane extract modifying polarity of the solvents with methanol and by increasing polarity to extract, they were used chromatography technique and spectroscopic of nuclear magnetic resonance H+ and 13C to characterize this compounds. Results: phytochemical studies showed quality parameters that were similar to average limits in the use of majority of medicinal plants except total ashes assay (13 percent), qualitative determination assay suggest presence of reducers compounds, quinone, phenols and/or tannins, triterpene and/or steroids. And they were compared spectrum carbon 13 (13C) of the substance obtained from extract of this plant with other reported in literature to cycloartanol and found coincidence in majority of carbons compared. Conclusions: cycloartanol triterpene was one of main compounds of dichloromethane extract of Pedilanthus tithymaloides (L) Poit leaves

Introducción: Pedilanthus tithymaloides es conocido como ítamo real y se han publicado algunas de sus propiedades, entre ellas, el uso en estomatología para el tratamiento de infecciones bucales. Objetivo: explicar los procedimientos empleados para caracterizar uno de los compuestos mayoritarios aislado del extracto de diclorometano a partir de las hojas de Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit. Métodos: el cicloartanol se obtuvo mediante la modificación de la polaridad del disolvente orgánico, con el empleo de metanol e incrementándose la polaridad y como consecuencia la aparición de un precipitado. Se utilizó la técnica de cromatografía de placa delgada, la cromatografía de columna, así como espectroscopia de resonancia magnética nuclear protónica y de carbono 13. Resultados: el estudio fitoquímico mostró parámetros de calidad acorde a lo que se sugiere para el uso de plantas medicinales, excepto las cenizas totales que presentaron 13 por ciento; se comparó el espectro de carbono13 practicado al compuesto obtenido con otros reportes en la literatura y se encontró coincidencia con lo que se describe para el triterpeno cicloartanol. Conclusiones: cicloartanol es uno de los compuestos mayoritario presente en el extracto de dicloromentano obtenido a partir de hojas de Pedilanthus tithymaloides

Efecto sedante del triterpeno cicloartanol obtenido de las hojas de Pedilanthus tithymaloides (L) Poit / Sedative effect of cycloartanol triterpene obtained from Pedilanthus tithymaloides (L) Poit leaves

INTRODUCCIÓN: Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit (ítamo real) es una planta ampliamente distribuida en Cuba y constituye una fuente sustentable para la obtención de principios activos. OBJETIVO: evaluar el efecto neurosedante del triterpeno cicloartanol, obtenido a partir del extracto diclorometano de las hojas de esta planta. MÉTODOS: se emplearon los modelos de conducta exploratoria, sueño barbitúrico, convulsiones inducidas por pentilenotetrazol y estereotipias inducidas por anfetamina. El cicloartanol fue administrado por vía oral 30 min antes de cada ensayo. RESULTADOS: se obtuvo inhibición de la conducta exploratoria a dosis superiores a 100 mg/kg, inhibición de las estereotipias inducidas por anfetamina a dosis de 200 mg/kg, se potenció el sueño inducido por tiopental a dosis superiores a 50 mg/kg y no se observó protección frente a las convulsiones inducidas por pentilenotetrazol. CONCLUSIONES: los resultados obtenidos en los diferentes ensayos muestran un efecto depresor del sistema nervioso central en animales tratados con cicloartanol, sin embargo, el efecto sedante no parece estar mediado por el sistema GABAérgico, tampoco se observaron efectos antidepresivos

INTRODUCTION: Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit (known as ítamo real) is a widely distributed plant in Cuba and at the same time a sustainable source of active principles. OBJECTIVE: to evaluate the neurosedative effect of cycloartanol triterpene from dichlorometane extract obtained from Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit leaves. METHODS: models based on exploratory behaviour, barbiturate-induced sleep, pentilenotetrazol-induced seizures and amphetamine-induced stereotyped behaviours were used. Cyclocartanol was orally administered 30 minutes before every test. RESULTS: exploratory behaviour was inhibited at over 50 mg/kg dose; amphetamine-induced stereotyped behaviours were inhibited at 200 mg/kg dose; thiopental-induced sleep was potentiated at over 50 mg/kg dose, however, protection against pentilenotetrazole-induced seizures was not observed. CONCLUSIONS: the results of several tests indicate a depressing effect on the central nervous system of laboratory animal treated with Cycloartanal; however, the sedative effect does not seem to be mediated by the GABAergic system. Anti-depressive effects were not observed either

Estabilidad de dos tinturas de Pedilanthus tithymaloides (L) Poit (ítamo real) / Stability of two Pedilanthus tithymaloides (L) Poit (ítamo real) tinctures

Pedilanthus tithymaloides (L) Poit (ítamo real) se emplea tradicionalmente y en estomatología por la acción antiinflamatoria. Objetivos: evaluar la estabilidad de 2 tinturas de ítamo real almacenadas en condiciones de refrigeración y temperatura ambiente durante 1 año...

Pedilanthus tithymaloides (L) Point (ítamo real) is traditionally used in dentistry due to its antiinflammatory effect. Objectives: to evaluate the stability of two itamo real tinctures stored under refrigeration conditions and at room temperature for one year...

Caracterización de ácidos grasos de hojas de Pedilanthus tithymaloides (L) Poit / Characterization of fat acids from leaves of Pedilanthus tithymaloides(L)Poit

INTRODUCCIÓN: Pedilanthus tithymaloides (L.) Poit. es utilizado en medicina tradicional pero existen pocos estudios sobre su composición química. OBJETIVO: identificar los metabolitos presentes en el extracto de menor polaridad realizado a las hojas de P. tithymaloides. MÉTODOS: se procedió al tratamiento del material vegetal según los estudios farmacognósticos realizados previamente y se emplearon técnica de cromatografía de placa delgada, cromatografía de columna y cromatografía gaseosa acoplada a masa, para la caracterización de los componentes aislados de una de las fracciones obtenida por cristalización fraccionada a partir del extracto clorofórmico de las hojas de esta especie. RESULTADOS: se pudo identificar por mediación de la cartoteca del equipo Crom-mass 11 picos correspondientes a ácidos grasos presentes en el extracto, donde sobresalen los ácidos 7 palmítico metiléster y el ßcido esteárico como los componentes mayoritarios. CONCLUSIONES: las hojas de P. tithymaloides contienen ácidos grasos naturales, que pueden ser obtenidos de la fracción de menor polaridad mediante el proceso de saponificación.

INTRODUCTION: Pedilanthus tithymaloides (L) Poit. is used in the traditional medicine but there are few studies on its chemical composition. OBJECTIVE: to identify metabolites present in extracts of less polarity performed in leaves of P. tithymaloides. METHODS: we treat the vegetal material according previously performed pharmacologic studies, and we used thin-layer chromatography, column chromatography, and gas chromatography coupled to mass, to characterize components isolated from one of the fractions obtained by divided crystallization from chloroform extract of leaves of this species. RESULTS: it was possible to identify 11 peaks by means of Chrom-mass equipment cart library corresponding to fatty acids present in extract; where the more significant are the 7 palmitic methilester acid and the stearic acid as the majority components CONCLUSIONS: leaves of P. tithymaloides have natural fatty acids obtained from minor polarity fractions by means of saponification process.

Efecto sedante de extractos de las hojas de Pedilanthus tithymaloides (L) Poit / Sedative effect of extracts from Pedilanthus tithymaloides (L) Poit leaves

Introducción: Pedilanthus tithymaloides (L) Poit es comúnmente conocido como ítamo real, se le han atribuido numerosas aplicaciones terapéuticas. Objetivos: evaluar el efecto neurosedante de diferentes fracciones obtenidas de extractos de hojas de P. tithymaloides. Métodos: se realizaron sucesivas extracciones a partir de hojas secas trituradas, con el objetivo de obtener diversas fracciones mediante el empleo de solventes como tolueno, cloroformo y solvente hidroalcohólico (1:1); se evaluó su actividad neurosedante con el empleo del modelo de conducta exploratoria en ratones como indicativo de este efecto y los datos se procesaron con la prueba estadística de Duncan y un nivel de significación de p< 0,05. Resultados: de las fracciones obtenidas por cristalización fraccionada a partir del extracto toluénico, el To (triterpeno) mostró efecto sedante a dosis superiores a 100 mg/kg, la fracción que contenía el resto del extracto toluénico no mostró actividad. Por otra parte, el extracto clorofórmico también mostró efecto neurosedante, mientras que a partir del extracto hidroalcohólico se obtuvieron 2 fracciones por cambio de la polaridad del disolvente, las fracciones obtenidas resultaron tener una ligera actividad sedante; el crudo de fenoles redujo la conducta exploratoria a dosis de 200 mg/kg, mientras que la fracción remanente mostró actividad a dosis de 450 mg/kg. Conclusiones: el P. tithymaloides posee compuestos que le confieren efecto sedante.

Introduction: Pedilanthus tithymaloides (L) Poit is widely known as itamo real and numerous therapeutical applications have been attributed to it. Objetives: to evaluate the neurosedative effect of different fractions of extracts from P. tithymaloides leaves. Methods: succesives extractions were made from smashed dry leaves, with the purpose of obtaining several fractions using toluene, chloroform and hydroalcohol solvents (1:1); the neurosedative activity was also evaluated with an exploratory behaviour model in mice as an indication of this effect and data were processed with Duncan´s statistical test, with a level of significance of p< 0.05. Results: out of the fractions obtained by fractioned crystallization of toluene extract, triterpene showed sedative effect at a dose over 100 mg/kg. The fraction containing the rest of toluene extract revealed no activity. On the other hand, the chloroform extract also showed neurosedative effect whereas two other fractions were obtained from hydroalcoholic extract because of change of solvent polarity; these fractions exhibited slight sedative activity; the phenol crude reduced the exploratory behaviours at 200 mg/kg dose whereas the remaining fraction showed this kind of action at 450 mg/kg. Conclusions: P. tithymaloides possesses some compounds that provide it with a sedative effect.

Evaluación antitumoral y toxicológica de los extractos alcohólicos de Pedilanthus tithymaloides (L) Poit / Toxicity studies and an antitumoral evaluation of the alcoholic extracts for P. tithymaloides

Con el propósito de determinar la posible actividad contra carcinomas que se reporta para la especie P. tithymaloides por la Medicina tradicional, se realizó el estudio de toxicidad y la evaluación antitumoral de los extractos alcohólicos de hojas (IRH) y tallos (IRT) de P. tithymaloides (Itamo real) sobre el tumor ascítico de Ehrlich (TAE). Para ello se emplearon ratones NMRI (3 grupos a razón de 10 animales por grupos en cada experimento) administrándose en el estudio de toxicidad dosis única de 2000 mg/Kg. de ambos extractos por vía oral (vo), mientras que para la evaluación antitumoral, los animales fueron inicialmente inoculados con células tumorales experimentales (TAE) y tratados con IRT e IRH a concentraciones de (25, 50, 100) mg/Kg. por vía oral (vo), un control positivo con 5-flouracilo (20 mg/Kg.) intraperitoneal (iv) y un control negativo cloruro de sodio 0.9 (vo), evaluándose los signos toxicidad a través de Test de Irwin y determinándose el porcentaje de aumento de sobrevida (AS); los resultados fueron analizados por el método de Kapplan-Meler y se compararon las curvas de sobrevida para cada grupo, mediante el Test de Lomg-Rank con un porcentaje de 95 por ciento de confianza (p<0.05). Los resultados demostraron que en ninguno de los extractos existe actividad antitumoral en el modelo experimental empleado y que a las dosis de 50 mg/Kg. de peso se observó una ligera prolongación de la vida de los animales en comparación con el resto de las dosis y una menor sobrevida a las dosis de 100 mg/Kg. de peso.

With the aim to determine possible effect against carcinomas, in accordance with reports from traditional medicine for P. tithymaloides, toxicity studies and an antitumoral evaluation of the alcoholic extracts from leaves (IRH) and stalks (IRT), on Ehrlich ascistic tumor (TAE) were carried out. NMRI mices were used (3 groups of 10 animals in each experiment); Animals were given a dose of 2000 mg/Kg from each extract in toxicity studies. For antitumoral evaluations, experimimental tumoral cell (TAE) were given to the mice initially and then were treated with IRT and IRH at concentrations of 25 mg /Kg 50 mg/ Kg and 100 mg/ Kg p.o. Positive control animals received 5 fluoracile (20 mg/ Kg.) i.p. and negative controls were treated with saline solution of sodium chloride (0.9 percent NaCl) p.o. Toxicity signs were evaluated via an Irwin test. Survival increase percentages (AS) were also determined. Results were analyzed by the Kapplan- Meler statical method and the survival curves were compared for each group by the Long Rank test (p<0.05) . Result did not confirm presences of antitumoral activity in any of the extracts evaluated to experimental model carried out. For the 50 mg / Kg dose of IRH a slight increase of the animals’ lifespan as compared to the rest of the administered doses. There was a lower survival with 100mg/Kg of IRH.