Survey of vector-borne and nematode parasites involved in the etiology of anemic syndrome in sheep from Southern Brazil / Pesquisa de hemoparasitos transmitidos por vetores e nematódeos envolvidos na etiologia de síndrome anêmica em ovinos no Sul do Brasil

Abstract Although anemia has been historically linked to Haemonchus contortus infection, other infectious agents, such as hemotropic mycoplasmas and tick-borne disease pathogens, may also lead to anemic crisis in sheep. This study has aimed to investigate infections related to anemia in a sheep herd from Bandeirantes City, Paraná State, southern Brazil. Seven out of forty-two (16.6%; 95% CI: 8.32-30.6%) sheep were positive for hemoplasmas by a PCR targeting the 16S rRNA gene and all tested negative for A. marginale/A. ovis and Babesia/Theileria spp. by PCR based on msp4 and 18S rRNA genes, respectively. Two (4.7%; 95% CI: 1.32-15.79%) animals were infested with Rhipicephalus microplus ticks. Fecal egg counting was performed in 38 sheep and 24 (63.15%; 95% CI: 47.2-76.6%) presented > 500 eggs per gram. Phylogenetic analysis of partial sequences of the detected hemotropic Mycoplasma sp. 16S and 23S rRNA genes confirmed that the animals were infected with Mycoplasma ovis. Polymorphism analysis of partial 16S rRNA sequences showed three different genotypes of M. ovis infecting sheep assessed in the present study. Mycoplasma ovis and gastrointestinal nematodes occurs in sheep from the northern region of Paraná State.

Resumo Embora a principal causa de anemia seja historicamente relacionada à infecção por Haemonchus contortus, outros agentes infecciosos, como micoplasmas hemotrópicos e patógenos transmitidos por carrapatos, também podem causar quadros anêmicos em ovinos. O presente estudo objetivou investigar infecções relacionadas à anemia em um rebanho de ovinos, na cidade de Bandeirantes, Estado do Paraná, sul do Brasil. Sete (16,6%; 95% CI: 8,32-30,6%) de 42 ovinos foram positivos para hemoplasmas pela PCR do gene 16S rRNA, enquanto todos foram negativos para A. marginale/A. ovis e Babesia/Theileria spp. por ensaios da PCR baseados nos genes msp4 e 18S rRNA, respectivamente. Dois (4,7%; 95% CI: 1,32-15,79%) animais estavam infestados por carrapatos Rhipicephalus microplus. Dos 38 animais nos quais foi realizada a contagem de ovos por grama de fezes (OPG), 24 (63,15%; 95% CI: 47,2-76,6%) apresentaram valores >500 para OPG. A análise filogenética das sequências parciais dos genes 16S rRNA e 23S rRNA de hemoplasmas confirmou a infecção por Mycoplasma ovis. A análise de polimorfismos de um fragmento do gene 16S rRNA mostrou a ocorrência de três genótipos diferentes de M. ovis nos animais. Mycoplasma ovis e nematódeos gastrointestinais ocorrem em ovinos da região nordeste do Estado do Paraná.

Theileria sp. in water buffaloes from Maranhão State, northeastern Brazil / Theileria sp. em búfalos do Estado do Maranhão, nordeste do Brasil

Abstract Anaplasma marginale and piroplasm species are widespread among Brazilian cattle herds. Both of these tick-borne pathogens hamper livestock production and cause a significant economic impact. Although buffaloes have demonstrated a high level of adaptability, data on tick-borne pathogens are scarcely reported in Brazil. Thus, the aim of this study was to screen water buffaloes from the state of Maranhão for piroplasm and A. marginale occurrence using PCR assays. All samples were negative for A. marginale. One of the 287 (0.35%) water buffaloes tested was positive for Theileria sp. Sequencing of the 18S rDNA fragment (356 bp) showed that the Theileria sp. identified was closely related to the T. buffeli /orientalis group. Future studies on the clinical signs of infection and the main vector in this country are needed.

Resumo Anaplasma marginale e espécies de piroplasma são amplamente distribuídas no rebanho bovino brasileiro. Ambos os patógenos transmitidos por carrapatos dificultam a produção pecuária e causam um impacto econômico significativo. Embora os búfalos tenham demonstrado um alto nível de adaptabilidade, dados sobre patógenos transmitidos por carrapatos são raramente relatados no Brasil. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar búfalos do estado do Maranhão para piroplasmas e A. marginale utilizando-se a técnica da PCR. Todas as amostras foram negativas para A. marginale . Um dos 287 (0,35%) búfalos testados foi positivo para Theileria sp. O sequenciamento de um fragmento do gene 18S rDNA (356 pb) demonstrou que Theileria sp. identificado estava relacionada ao grupo T. buffeli/orientalis . Estudos futuros sobre os sinais clínicos de infecção e o principal vetor neste país são necessários.

Rangelia vitalii and Hepatozoon canis coinfection in pampas fox Lycalopex gymnocercus from Santa Catarina State, Brazil / Infecção por Rangelia vitalii e Hepatozoon canis em Lycalopex gymnocercus proveniente do Estado de Santa Catarina, Brasil

Abstract Rangelia vitalii is a haemoparasite that infects erythrocytes, white blood cells and the cytoplasm of endothelial cells of blood capillaries of canids in South America, and has been detected in both domestic dogs and sylvatic canids. Hepatozoon canis is a parasite that infects neutrophils and monocytes of many mammalian hosts. This study reports the infection of Lycalopex gymnocercus from Santa Catarina, Brazil, with R. vitalii and H. canis. The piroplasm was observed on both blood smears and molecular tests. Many large piroplasms were detected inside the erythrocytes, with round, oval, or teardrop-shaped organism, that occurred singly or in pairs. They had an abundant, pale blue cytoplasm and decentral dark red small nucleus. The animal was also infected with H. canis that was detected only by molecular tests. The majority of haematological and biochemistry parameters were within the reference values for domestic dog and wild canids.

Resumo Rangelia vitalii é um hemoparasita que infecta eritrócitos, macrófagos e células endoteliais de canídeos na América do Sul, e vem sendo detectado tanto em cães domésticos quanto em canídeos silvestres. Hepatozoon canis é um parasita que infecta monócitos e neutrófilos de mamíferos. No presente estudo, é descrita a infecção de Lycalopex gymnocercus, proveniente de Santa Catarina, Brasil, por R. vitalii e H. canis. O piroplasma foi diagnosticado nos esfregaços sanguíneos e por técnicas moleculares. Nos eritrócitos foram observados vários merozoítos grandes, ovais, arredondados ou em forma de gota, ocorrendo isoladamente ou em pares. Estes piroplasmas apresentavam citoplasma abundante, corado em azul claro, com núcleo pequeno, avermelhado e descentralizado. O animal apresentou coinfecção com H. canis, que foi diagnosticado somente pelos testes moleculares. A maior parte dos parâmetros hematológicos e bioquímicos do animal estava dentro dos valores de referência para cães domésticos e canídeos silvestres.

Detection and molecular characterization of piroplasms species from naturally infected dogs in southeast Brazil / Detecção e caracterização molecular de piroplasmas em cães naturalmente infectados no Sudeste do Brasil

Rangelia vitalii is a protozoon described from dogs in the south and southeast regions of Brazil. It is phylogenetically related to Babesia spp. that infects dogs, but data on this enigmatic parasite is still limited. The aim of this work was to detect piroplasm species in dogs in the state of Rio de Janeiro, Brazil, by 18S rRNA gene-based PCR assay, restriction fragment length polymorphism (RFLP) and sequence analyses. Of 103 dogs examined, seven (6.8%) were positive for Babesia spp. by PCR. The amplified products were digested by restriction enzymes to differentiate the Babesia species, and one sample was identified as Babesia vogeli. The pattern observed for the other six amplification products did not match with pattern described for large Babesia infecting dogs. Sequencing analysis confirmed these six samples as R. vitalii, with high homologies (99-100%) with a sequence from south Brazil. This study confirms the presence of Babesia vogeli and Rangelia vitalii circulate in domestic dogs in Teresópolis, Rio de Janeiro, Brazil.

Rangelia vitalii é um protozoário que infecta cães e foi descrito nas regiões Sul e Sudeste do Brasil. R. vitalii é filogeneticamente próxima à Babesia spp., mas dados deste misterioso parasito ainda são escassos. O objetivo deste trabalho foi detectar a presença de piroplasmas em cães naturalmente infectados no estado do Rio de Janeiro, através da amplificação do gene 18S rRNA pela PCR, clivagem com enzimas de restrição (RFLP) e caracterização genética através do sequenciamento. De 103 cães, sete (6,8%) foram positivos para Babesia spp. pela PCR. Os produtos amplificados foram digeridos por enzimas de restrição para a diferenciação das espécies de Babesia e uma amostra foi identificada como Babesia vogeli. O padrão de amplificação observado nas outras seis amostras não correspondeu ao padrão descrito para babesias que infectam cães. O sequenciamento das seis amostras confirmou ser uma espécie geneticamente idêntica a R. vitalii apresentando grande homologia (99-100%) com a sequência do sul do Brasil. Este estudo confirma a presença de Babesia vogeli e Rangelia vitalii infectando cães em Teresópolis, Rio de Janeiro, Brasil.