Resistência aos compostos de amônio quaternário (QACs) de uso doméstico e hospitalar em patógenos prioritários multirresistentes / Resistance to quaternary ammonium compounds (QACs) for domestic and hospital use in multiresistant priority pathogens

Compostos de amônio quaternário (QACs) têm sido amplamente utilizados como desinfetantes e antissépticos, sendo essenciais na prevenção e controle de infecções bacterianas na medicina humana e veterinária. Embora patógenos prioritários multirresistentes têm sido muito bem caracterizados quanto ao perfil de suscetibilidade e contexto genético da resistência aos antibióticos, dados de resistência aos QACs são limitados. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade in vitro dos QACs de uso doméstico e hospitalar [cloreto de benzalcônio (BAC), cloreto de cetilpiridinio (CPC) e brometo de cetiltrimetilamônio (CTAB)], contra patógenos prioritários multirresistentes, identificando os principais genes de resistência associados. Foram estudadas 100 cepas multirresistentes previamente sequenciados usando as plataformas Illumina MiSeq e NextSeq representativas de diferentes hospedeiros (humanos e animais) e fontes (ambientes e alimentos). As cepas foram identificadas como Klebsiella pneumoniae (n= 24), Escherichia coli (n= 30); Pseudomonas aeruginosa (n= 10), Enterobacter spp, (n= 8), Acinetobacter baumannii (n= 11) e Salmonella spp. (n= 17). Genes de resistência aos QACs foram identificados in silico através do alinhamento dos contigs obtidos de cada cepa sequenciada com genes de referência obtidos do GenBank, utilizando o programa Geneious versão 8 (Biomatters Ltd). A identidade de cada gene foi analisada utilizando o programa BLASTx, no qual um critério baseado em ≥90% identidade resultou na identificação dos genes mdfA (77%), qacE (44%), qacEΔ1 (43%), sugE(c) (29%), emrE (21%), qacA (19%), sugE(p) (5%), qacF (7%), qacH (7%) e qacL (7%) em 85 cepas; enquanto que 15 cepas não possuíam nenhum gene de resistência aos QACs. A concentração inibitória mínima (CIM) dos QACs para as 100 cepas foi determinada pelo método de microdiluição em caldo. Os resultados sugeriram que a resistência em patógenos prioritários circulando na interface humano-ambiente-animal não é restrita aos antibióticos, uma vez que a elevada ocorrência de genes qacE, qacEΔ1 e mdfA poderia estar associada com uma redução da suscetibilidade para QACs. Consequentemente, a resistência aos QACs poderia também contribuir para a persistência e adaptação destes patógenos nos seres humanos e outros animais, assim como em ambientes impactados antropogenicamente

Quaternary ammonium compounds (QACs) have been widely used as disinfectants and antiseptics, being applied as essential compounds in the prevention and control of bacterial infections in human-and veterinary hospital medicine. Although multiresistant priority pathogens have been well characterized with respect to their susceptibility profile and their genetic context of resistance for antibiotics, studies of resistance to QACs are limited. Thus, the objective of the present study was to evaluate the in vitro activity of QACs [(benzalkonium chloride (BAC), cetylpyridinium chloride (CPC) and cetyltrimethylammonium bromide (CTAB)] for household and hospital use against multiresistant priority pathogens, identifying the main resistance genes associated. A hundred multiresistant isolates (previously sequenced using the Illumina MiSeq and NextSeq platforms), representative of different hosts (humans and animals) and sources (environment and food) were studied. Isolates were identified as Klebsiella pneumoniae (n=24), Escherichia coli (n=30), Pseudomonas aeruginosa (n=10), Enterobacter spp. (n=8), Acinetobacter baumannii (n=11) and Salmonella spp. (n=17). In silico analysis for identification of genes conferring resistance to QACs were performed by aligning the contigs obtained from the strains with reference genes deposited in GenBank, using the Geneious version program (Biomatters Ltd). Similarities were analyzed using the BLASTx online program, considering the alignment criteria based on ≥ 90% identity. The result of these analysis revealed the presence of the following QAC genes: mdfA (77%), qacE (44%), qacEΔ1 (43%), sugE(c) (29%), emrE (21%), qacA (19%), sugE (p) (5%), qacF (7%), qacH (7%) e qacL (7%); while 15 strains showed no resistance genes for QACs. Determination of QACs minimum inhibitory concentration (MIC) for the 100 isolates, by the broth microdilution method. These results suggest that resistance to QACs in priority pathogens, circulating at the human-environment-animal interface, is not restricted to antibiotics, since the high occurrence of genes qacE, qacEΔ1 and mdfA were associated with a reduced susceptibility to QACs. Consequently, resistance to QACs could also contribute to the persistence and adaptation of these pathogens in humans and othes animals, as well as in anthropogenically impacted environments

Eficácia do álcool etílico e quaternário de amônio na desinfecção de equipamentos médicos hospitalares / Efficacy of ethyl alcohol and quaternary ammonium in hospital medical equipment disinfection / Eficacia del alcohol etílico y cuaternario de amonio en la desinfección de equipos médicos hospitalarios

Justificativa e Objetivos: Os ambientes hospitalares podem albergar microrganismos patogênicos e oportunistas, sendo o processo de limpeza e desinfecção importante para o controle das Infecções relacionadas à Assistência à Saúde (IRAS). Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia do álcool etílico e do quaternário de amônio no processo de desinfecção de equipamentos médicos hospitalares previamente contaminados com Staphylococcus aureus (S. aureus). Métodos: descontaminação de 10 equipamentos médicos hospitalares contaminados com uma suspensão de S. aureus ATCC 25923. A descontaminação ocorreu com álcool etílico nas concentrações de 46,2%, 70% e 99% e com o quaternário de amônio de 1ª e de 5ª geração. Após a descontaminação, foram colhidas amostras da superfície dos equipamentos para cultura bacteriana. Resultados: foi verificado crescimento bacteriano em 80% dos equipamentos descontaminados com álcool 46,2% e 99%. Não houve crescimento bacteriano na superfície dos equipamentos descontaminados com álcool 70% e quaternários de amônio. Conclusão: os processos de desinfecção com álcool 70% e quaternário de amônio de 1ª e 5ª geração foram eficazes no controle do S. aureus, comprovando a ação efetiva destes produtos na desinfecção dos equipamentos médicos hospitalares.(AU)

Background and Objectives: Hospital environments may harbor pathogenic and opportunistic microorganisms, and the cleaning and disinfection process is important for the control of Health Care Related Infections (IRAS). Thus, the objective of this work to evaluate compare the efficacy of ethyl alcohol and quaternary ammonium in the disinfection of hospital medical equipment against Staphylococcus aureus (S. aureus). Methods: decontamination of 10 hospital medical equipment contaminated with a suspension of S. aureus ATCC 25923. The decontamination occurred with ethyl alcohol at concentrations of 46.2%, 70% and 99% and with the quaternary ammonium of 1st generation and 5th generation. After the decontamination, samples were harvested from the surface of the equipment for bacterial culture. Results: bacterial growth was verified in 80% of the equipment decontaminated with alcohol 46.2% and 99%. There was no bacterial growth on the surface of equipment decontaminated with alcohol 70% and quaternary ammonium. Conclusions: the disinfection processes with alcohol 70% and quaternary ammonium 1st and 5th generation were effective in the control of S. aureus, proving the effectiveness of these products in the disinfection of hospital medical equipment.(AU)

Justificación y objetivos: Los ambientes hospitalarios pueden albergar microorganismos patógenos y oportunistas, siendo el proceso de limpieza y desinfección importante para el control de las Infecciones relacionadas a la Asistencia a la Salud (IRAS). Así, el objetivo de este trabajo evaluar comparar la eficacia del alcohol etílico y del cuaternario de amonio en el proceso de desinfección de equipos médicos hospitalarios previamente contaminados con Staphylococcus aureus (S. aureus). Métodos: la descontaminación de 10 equipos médicos hospitalarios contaminados con una suspensión de S. aureus ATCC 25923. La descontaminación ocurrió con alcohol etílico en las concentraciones de 46,2%, 70% y 99% y con el cuaternario de amonio de 1ª y de 5ª generación. Después de la descontaminación, se tomaron muestras de la superficie de los equipos para cultivo bacteriano. Resultados: se verificó crecimiento bacteriano en el 80% de los equipos descontaminados con alcohol 46,2% y 99%. No hubo crecimiento bacteriano en la superficie de los equipos descontaminados con alcohol 70% y cuaternarios de amonio. Conclusión: los procesos de desinfección con alcohol 70% y cuaternario de amonio de 1ª y 5ª generación fueron eficaces en el control del S. aureus, comprobando la acción efectiva de estos productos en la desinfección de los equipos médicos hospitalarios.(AU)

Consecuencias del amonio en la fatiga central en atletas, posible efecto neuroprotector del ejercicio / Ammonium consequences in athletes' central fatigue and its possible neuroprotection effect thanks to physical activity / Consequências do amônio na fadiga central em atletas, possível efeito neuroprotetor do exercício

Introducción. La fatiga central en el deporte está asociada a los efectos del amonio. La principal fuente de producción de amonio durante el ejercicio es el músculo esquelético. El amonio se genera como consecuencia del metabolismo energético, debido a la oxidación de aminoácidos y a la desaminación del nucleótido de adenosin trifosfato. Objetivo. Presentar una reflexión sobre el efecto del amonio durante el ejercicio de alta intensidad y su relación con la fatiga central en atletas. Discusión. Durante el ejercicio, la concentración de amonio alcanza valores superiores a 200µM (micromolar); sin embargo, en un adulto promedio se considera que valores superiores a 60µM en sangre manifiestan un trastorno por hiperamonemia. El amonio influye en la disminución del rendimiento en atletas y está asociado con los efectos nocivos para la salud en pacientes con encefalopatía hepática. Conclusiones. La práctica del ejercicio físico genera neuroprotección contra las altas concentraciones de amonio en el cerebro, pues, durante el ejercicio con altas concentraciones de amonio, los atletas no presentan los síntomas de pacientes con encefalopatía hepática, lo que implica adaptaciones metabólicas que juegan un papel importante en el metabolismo del amonio en el cerebro. [Porras-Álvarez J. Consecuencias del amonio en la fatiga central en atletas, posible efecto neuroprotector del ejercicio. MedUNAB. 2018;21(1): 115-121 doi: 10.29375/01237047.3394].

Introduction. Central fatigue in sports training is associated with ammonium effects within the human body. The ammonium main production source during physical training is located in skeletal muscles and it is generated as a result of energy metabolism. This process is caused by amino acids oxidation and adenosine triphosphate nucleotide deamination. Objective. This article's objective is to present an analysis regarding ammonium effects when high intensity sports are performed and its relation with central fatigue in athletes. Discussion. When high intensity sport practices are performed, ammonium concentration levels can reach values higher than 200 µM (micromolar). However, it is considered that an average adult with ammonium levels higher than 60µM evidences a hyperammonemia disorder. Ammonium has direct influence in the decline of athletic performance and it is associated with harmful effects for hepatic encephalopathy patients. Conclusions. Physical activity practice creates neuroprotection against high-quantities of ammonium in the brain. Although in physical practices athletes have high amounts of ammonium, they do not show symptoms related to hepatic encephalopathy; thus, this situation implies that metabolic adaptations have an important role within ammonium metabolism in the brain. [Porras-Álvarez J. Ammonium consequences in athletes' central fatigue and its possible neuroprotection effect thanks to physical activity. MedUNAB. 2018;21(1):115-121doi: 10.29375/01237047.3394].

Introdução. A fadiga central no esporte está associada aos efeitos do amônio. A fonte de produção do amônio mais importante durante o exercício é o músculo esquelético. O amônio é gerado como consequência do metabolismo energético, devido à oxidação dos aminoácidos e à desaminação do trifosfato de adenosina. Objetivo. Apresentar uma reflexão sobre o efeito do amônio durante o exercício de alta intensidade e sua relação com a fadiga central em atletas. Discussão. Durante o exercício, a concentração do amônio atinge valores superiores a 200µM (micromol); no entanto, em um adulto médio, considera-se que valores superiores a 60µM no sangue mostram um distúrbio por hiperamonemia. O amônio influencia a diminuição do desempenho em atletas e está associado a efeitos nocivos para a saúde em pacientes com encefalopatia hepática. Conclusões. A prática de exercício físico gera neuroproteção contra altas concentrações do amônio no cérebro, pois, durante o exercício com altas concentrações do amônio, os atletas não apresentam sintomas de encefalopatia hepática, o que implica adaptações metabólicas que desempenham um papel importante no metabolismo do amônio no cérebro. [Porras-Álvarez J. Consequências do amônio na fadiga central em atletas, possível efeito neuroprotetor do exercício. MedUNAB. 2018;21(1):115-121doi: 10.29375/01237047.3394].

Radiocarbon geochronology of the sediments of the São Paulo Bight (southern Brazilian upper margin)

The aim of this work was to generate an inventory of the data on radiocarbon datings obtained from sediments of the São Paulo Bight (southern Brazilian upper margin) and to analyze the data in terms of Late Quaternary sedimentary processes and sedimentation rates. A total of 238 radiocarbon datings from materials collected using differents ampling procedures was considered for this work. The sedimentation rates varied from less than 2 to 68 cm.kyr-1. The highest sedimentation rate values were found in a low-energy (ría type) coastal system as well as in the upwelling zones of Santa Catarina and Cabo Frio. The lowest rates were found on the outer shelf and upper slopes. Our results confirm the strong dependency of the shelf currents, with an emphasis to the terrigenous input from the Río de La Plata outflow which is transported via the Brazilian Coastal Current, as well as of the coupled Brazil Current - Intermediate Western Boundary Current (BC-IWBC) dynamics on the sedimentary processes. At least three indicators ofthe paleo sea level were found at 12200 yr BP (conventional radiocarbon age) (103 meters below sea level - mbsl),8300-8800 cal yr BP (13 mbsl) and 7700-8100 cal yr BP (6 mbsl).

O objetivo deste trabalho foi a geração de um inventário dos dados de datação de radiocarbono obtidos de sedimentos do Embaiamento de São Paulo (Margem Continental Superior do Sul do Brasil) e analisar os dados em termos de processos sedimentares quaternários e taxas de sedimentação. Um total de238 datações ao radiocarbono de materiais coletados com autilização de procedimentos amostrais diferentes foi considerado neste trabalho. As taxas de sedimentação variaram de menor que 2 a 68 cm.kyr-1. As taxas de sedimentação mais altas foram encontradas em um sistema costeiro de baixa energia (tipo ría), bem como nas zonas de ressurgência de Santa Catarina e Cabo Frio. As taxas mais baixas foram encontradas na plataforma externa e talude superior. Nossos resultados confirmam a forte dependência do sistema de correntes de plataforma, com ênfase no aporte terrígeno oriundo do Rio daPrata, transportado através da Corrente Costeira do Brasil, e da dinâmica da Corrente do Brasil - Corrente de Contorno Intermediária (CB-CCI) nos processos sedimentares. Pelo menostrês indicadores de paleo-níveis marinhos foram encontrados a 12200 anos AP (idade radiocarbônica convencional) (103 metros abaixo do nível do mar atual - manm), 8300-8800 cal anos AP (13 manm) e 7700-8100 cal anos BP (6 manm).

Tectonic control on the stratigraphic framework of Late Pleistocene and Holocene deposits in Marajó Island, State of Pará, eastern Amazonia

The traditional view that the Brazilian Amazonia is located in a tectonically stable area since the Cretaceous is changing in front of the increasing documentation of fault reactivations even during the Holocene. How the sedimentary record has responded to these events is an issue that remains to be approached with basis on field data. This work focuses on the stratigraphic correlation of late Quaternary deposits from eastern Marajó Island, with the goal of demonstrating the role of fault reactivation on the origin and preservation of these deposits. Despite the location in a stable platform of a continental passive margin, three studied stratigraphic units display significant vertical offsets that define two depocenters that are better explained through tectonic displacements. This interpretation is reinforced by several morphostructural features related to faults that occur between the studied drills. Without the influence of tectonics, sediment preservation in this characteristically low-lying terrain would have been negligible. The results of the present work motivate to look for other tectonically-influenced areas in Amazonia, which similarly might have acted as sites for sediment accommodation during the late Quaternary. These sedimentary records have great potential to be the source of valuable information for reconstructing Quaternary geological events in Northern Brazil.

A visão tradicional de que a Amazônia brasileira localiza-se em ma área tectonicamente estável desde o Cretáceo está mudando perante a crescente documentação de reativações de falha, até mesmo durante o Holoceno. Como o registro sedimentar respondeu a esses eventos é um tema que permanece por ser abordado com base em dados de campo. Este trabalho enfatiza a correlação estratigráfica de depósitos quaternários tardios no leste da Ilha do Marajó, com o objetivo de demonstrar a importância de reativações de falha na origem e preservação desses depósitos. Apesar da localização em área de plataforma de uma margem continental passiva, três unidades estratigráficas estudadas mostram significantes rejeitos verticais, que definem dois depocentros, explicados por deslocamentos tectônicos. Esta interpretação é reforçada por várias feições morfoestruturais relacionadas com falhas localizadas entre os poços estudados. Sem influência tectônica, a preservação de sedimentos nesse terreno, caracteristicamente plano, seria imperceptível. Os resultados do presente trabalho motivam a procurar outras áreas tectonicamente influenciadas da Amazônia, que possam ter atuado como sítios de acomodação de sedimentos durante o Quaternário tardio. Esses registros sedimentares têm grande potencial de serem fontes de informações valiosas para auxiliar na reconstrução de eventos geológicos quaternários no norte do Brasil.

Testing multivariate analysis in paleoenvironmental reconstructions using pollen records from Lagoa Salgada, NE Rio de Janeiro State, Brazil

Despite the indisputable significance of identification of modern analogs for Paleoecology research, relatively few studies attempted to integrate modern and fossil samples on paleoenvironmental reconstructions. In Palynology, this general pattern is not different from other fields of Paleoecology. This study demonstrates the practical application of modern pollen deposition data on paleoenvironmental reconstructions based on fossil pollen by using multivariate analysis. The main goal of this study was to use Detrended Correspondence Analysis (DCA) to compare pollen samples from two sediment cores collected at Lagoa Salgada, a coastal lagoon located at northeastern Rio de Janeiro State. Furthermore, modern surface samples were also statistically compared with samples from both cores, providing new paleoecological insights. DCA demonstrated that samples from both cores are more similar than previously expected, and that a strong pattern, related to a paleoenvironmental event, is present within the fossil data, clearly identifying in the scatter plot samples that represent pre- and post-environmental change. Additionally, it became apparent that modern vegetation and environmental conditions were established in this region 2500 years before present (BP). Multivariate Analysis allowed a more reliable integration of modern and fossil pollen data, proving to be a powerful tool in Paleoecology studies that should be employed more often on paleoclimate and paleoenvironmental reconstructions.

Apesar da indiscutível importância da identificação de análogos modernos para estudos de Paleoecologia, relativamente poucos estudos procuraram integrar amostras modernas e fósseis em reconstruções paleoambientais. Na Palinologia este padrão não é diferente de outras áreas da Paleoecologia. Este estudo demonstra a aplicação prática de dados de deposição polínica atual em reconstruções paleoambientais baseadas em pólen fóssil utilizando análises multivariadas. O objetivo principal deste estudo foi o de usar a Análise de Correspondência Destendenciada (DCA) para comparar amostras palinoló-gicas de dois testemunhos coletados na Lagoa Salgada, uma laguna costeira localizada no nordeste do Rio de Janeiro. Além disso, amostras atuais foram comparadas estatisticamente com amostras de ambos os testemunhos, fornecendo novas interpretações paleoecológicas. DCA demonstrou que as amostras dos testemunhos são mais similares do que esperado inicialmente, e que existe um padrão consistente nos dados fósseis (relacionado a um evento paleoambiental), identificando claramente no diagrama de dispersão as amostras pré- e pós-distúrbio. Além do mais, tornou-se aparente que a vegetação atual se estabeleceu na região 2500 anos antes do presente (AP). A análise multivariada permitiu uma integração mais confiável dos dados polínicos fósseis e atuais, confirmando ser uma ferramenta poderosa para estudos em Paleoecologia, e que certamente deveria ser empregada com mais freqüência em reconstruções paleoclimáticas e paleoambientais.

Comparação de agentes químicos na sanitização de ovos comerciais / Comparison of chemical agents in the sanitation of commercial eggs

Considerando os contaminantes da casca do ovo e o seu uso em alta escala na indústria de alimentos, o ovo passa a ser uma matéria prima que oferece riscos à saúde do consumidor, bem como prejuízo ao produtor e ao setor industrial. Com o objetivo de aumentar a eficiência na limpeza e sanificação, utilizamos, isoladamente, hipoclorito de sódio nas concentrações de 5,8, 50 e 100 mg/L de cloro ativo, composto de amônio quaternário concentrado a 50% diluído 1/500 e 1/1000 e um composto de amônio quaternário comercial contendo 20% do ingrediente ativo em suspensão alcalina, diluído de acordo com as recomendações do fabricante. (...) Realizou-se a contagem global de bactérias mesófilas e psicrotróficas aeróbias, bolores, leveduras, coliformes totais e fecais antes da aplicação dos sanificantes (para acompanhamento dos contaminantes oriundos da granja) e após a sanificação, compreendendo o período de estocagem de sete e quatorze dias para avaliação da sanitização. Na prática da aplicação em laboratório, encontramos que a microbiota da casca do ovo, foi reduzida de 2 a 3 ciclos logarítmicos quando usado os compostos de amônio quaternário (CAQ).

Palynological analysis of a sediment core obtained in Guanabara Bay, Rio de Janeiro, Brazil

The sediment of a core collected about 2 km north of Paquetá Island, Guanabara Bay, was submitted to pollen analysis, in order to recognize the dynamics of the regional vegetation, and the anthropic influence. Radiocarbon dating of a sample next to the bottom of the core indicates an age of 4.210 ± 40 14C yrs B.P (calibrated age). It was possible to establish four palynological zones. Starting at the bottom of the core, a decrease in palynomorph concentration, the presence of degraded pollen grains and spores, and the predominance of ombrophilous forest pollen grains were observed in the basal portion of Zone I. These data may indicate the presence of an exuberant Atlantic Forest, dominated by a marine regressive event. The concentration of well-preserved palynomorphs increased in Zone II, with the predominance of the ombrophilous forest vegetation also, and an expressive increase of hygrophytes, indicating more humid environmental conditions. Palynomorph concentration decreased again toward the top of Zone III, and the field vegetation was predominant. In the upper Zone IV occurred a strong decrease in pollen and spore concentration, with predominance of field vegetation also, and the appearance of exotic pollen grains, showing the anthropic influence at this time.

Sedimentos de um testemunho de sondagem coletado a 2 km ao norte da Ilha de Paquetá, Baía de Guanabara foram submetidos à análise palinológica, com o objetivo de reconhecer e interpretar a dinâmica temporal da vegetação na região e a influência antrópica. A datação radiocarbônica realizada próxima à base do testemunho indicou uma idade de 4.210 ± 40 anos AP (idade calibrada). Os resultados possibilitaram determinar quatro zonas palinológicas. Na Zona I, a mais basal, observou-se o decréscimo da concentração total de palinomorfos em direção ao topo e elevada deposição de grãos de pólen e esporos degradados, com o predomínio de grãos de pólen concernentes à floresta ombrófila. Esse resultado pode indicar que nesta zona existia a Mata Atlântica exuberante, sob o domíniode um evento marinho regressivo. Na Zona II, ocorreu um aumento na concentração total de palinomorfos bem preservados, com o predomínio também da vegetação de floresta ombrófila e um aumento expressivo de higrófitas, indicando condições ambientais mais úmidas. Na Zona III, ocorreu uma diminuição nas concentrações dos palinomorfos em direção ao topo, com o predomínio da vegetação campestre. Na Zona IV, localizada próximo ao topo do testemunho, ocorreu uma queda acentuada nas concentrações de pólen e esporos com o predomínio da vegetação campestre e o aparecimento de pólen exótico, evidenciando a influência antrópica no entorno da Baía de Guanabara.

Estudo das variações do coeficiente fenólico e diluição de uso de diversos tipos de desinfetantes aplicados normalmente na desinfecção hospitalar / Study of variations in the phenolic coefficient and dilution of the use of different types of disinfectants normally applied in hospital disinfection

Foi feito um estudo dos princípios ativos de desinfetantes normalmente utiliza dos em hospitais (hipoclorito de cálcio, compostos de amônio quaternário, fenóis, formaldeído, Irgasan DP-300). São apresentadas tabelas demonstrando a relação entre o coeficiente fenólico e a diluição de uso de cada desinfetante. É ressaltado que há diluições de desinfetantes que são próprias para áreas específicas, tais como: centros cirúrgicos, berçários, unidades de terapia intensiva etc (AU).