Desenvolvimento de métodos microbiológicos rápidos (MMRs) para avaliação da potência de agentes antimicrobianos e suas incertezas de medição / Development of rapid microbiological methods (RMMs) for evaluation of potency of antimicrobial agents and their measurement uncertainties

O método de difusão em ágar tem sido utilizado na avaliação da atividade antimicrobiana desde a descoberta da penicilina. Apesar disso, pouco avanço ocorreu no sentido de reduzir o tempo necessário para a determinação dos halos de inibição de crescimento. O objetivo deste projeto foi desenvolver, otimizar e validar métodos microbiológicos rápidos (MMRs) para a avaliação da potência de agentes antimicrobianos, além de identificar, quantificar e avaliar as principais fontes de incerteza associadas à determinação da potência. O projeto foi dividido em quatro etapas: 1) influência da composição do meio de cultura na formação dos halos de inibição; 2) estudo da incerteza de medição associada à determinação da potência de agentes antimicrobianos; 3) desenvolvimento, otimização e validação de métodos microbiológicos rápidos (MMRs) para determinação da potência de agentes antimicrobianos e 4) determinação dos parâmetros envolvidos na formação dos halos de inibição de crescimento e estudo dos mecanismos de difusão e crescimento microbiano. Os resultados deste projeto possibilitaram a redução do tempo necessário para a determinação do tamanho dos halos de inibição. Adicionalmente, contribuiu com a elucidação dos mecanismos de difusão e crescimento microbiano, possibilitando identificar e quantificar as principais fontes de incerteza de medição associadas à formação dos halos de inibição

Agar diffusion method has been used in the evaluation of antimicrobial activity since the discovery of penicillin. Nevertheless, little progress has occurred in order to reduce the time required for the determination of growth inhibition zones. The goal of this project was to develop, optimize and validate rapid microbiological methods (RMMs) for evaluation of potency of antimicrobials, as well as to identify, quantify and assess the main sources of uncertainty associated with potency. The project was divided into four steps: 1) influence of culture medium composition on inhibition zones; 2) study of measurement uncertainty associated with antimicrobials potencies; 3) development, optimization and validation of rapid microbiological methods (RMMs) for the determination of antimicrobials potencies and 4) determination of the parameters involved in the formation of inhibition zones and study of mechanisms of diffusion and microbial growth. The results of this project allowed the reduction of the time required for the determination of inhibition zone sizes. Additionally, it contributed to the elucidation of the mechanisms of diffusion and microbial growth, making it possible to identify and quantify the main sources of measurement uncertainty associated with formation of inhibition zone sizes

Application of the BacT/ALERTR 3D system for sterility testing of injectable products

Sterility testing as described in the pharmacopoeia compendia requires a 14-day incubation period to obtain an analytical result. Alternative methods that could be applied to evaluating product sterility are especially interesting due to the possibility of reducing this incubation period and thus the associated costs. The aims of this study were to evaluate the performance of the BacT/ALERT^R 3D system in detecting microorganisms in large-volume parenteral solutions that were intentionally contaminated and to compare this system to pharmacopoeia sterility testing using the membrane filtration method. The results indicated that there were no significant differences between the methods regarding the ability to detect microbial contamination; however, detection with the BacT/ALERT^R 3D system was faster compared to the pharmacopoeia method. Therefore, the BacT/ALERT^R 3D system is a viable alternative for assessing the sterility of injectable products.