Etiología de las infecciones de transmisión sexual (ITS) diagnosticadas por la técnica de PCR múltiple-hibridación en población colombiana de la ciudad de Medellín atendida en el Laboratorio Clínico VID / Etiology of sexually transmitted infections (STIs) diagnosed by multiplex PCR-hibridization assay technique in a Colombian population attending the VID Clinical Laboratory in Medellin

Introducción. Las infecciones de transmisión sexual (ITS) son y seguirán siendo un serio problema de salud pública en todo el mundo según los datos de la OMS, con el agravante que la mayoría de los casos son asintomáticos y, además, no existe otro reservorio distinto al humano. El diagnóstico se puede realizar con pruebas tradicionales y moleculares, estas últimas incluyen la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), de las cuales existen varios tipos, entre ellas, la PCR múltiple que tiene la capacidad de detectar ITS polimicrobianas a partir de una sola muestra. El objetivo de este estudio fue establecer cuáles fueron las infecciones de transmisión sexual más frecuentes en diferentes grupos de pacientes, así como determinar la utilidad del uso de la técnica de PCR múltiple en el diagnóstico de las ITS. Metodología. Se trata de un estudio observacional de corte transversal realizado entre los años 2021 y 2022 con pacientes que acudieron al servicio de diagnóstico del Laboratorio Clínico VID por sospecha de ITS. Las muestras recolectadas fueron evaluadas utilizando una prueba comercial basada en la técnica de PCR múltiple e hibridación. Las muestras procesadas fueron: orina e hisopados de endocérvix, uretra, recto, faringe y úlceras. Resultados. Se estudiaron 1.027 pacientes, de estos, 228 (22,2 %) fueron positivos para diferentes agentes de trasmisión sexual, distribuidos así: 50 (21,9 %) mujeres, 129 (56,6 %) hombres heterosexuales y 49 (21,5 %) hombres que tenían sexo con hombres (HSH). La edad promedio de las mujeres fue 30 años, y la de ambos grupos de hombres fue 36 años. Los microorganismos más frecuentemente identificados en mujeres fueron: C. trachomatis (A-K) en 28,6 %, seguido de virus herpes simplex tipo 2 (VHS-2) en 26,8 % y N. gonorrhoeae en 17,9 %. En hombres heterosexuales fueron C. trachomatis (A-K) en 37,5 %, N. gonorrhoeae en 21,5 % y VHS-2 en 18,7 %. En HSH fueron C. trachomatis (L1-L3) en 32,7 %, seguido de N. gonorrhoeae en 27,6 %, y de C. trachomatis (A-K) y VHS-2, ambos en 13,8 %. En 11 hombres heterosexuales, 8 HSH y en 6 mujeres, se identificó infección polimicrobiana. Conclusiones. C. trachomatis (A-K) fue el microorganismo más prevalente causante de ITS, seguido de N. gonorrhoeae en ambos grupos de hombres, y de VHS-2 en las mujeres, muy similar a lo reportado a nivel mundial. La prueba de PCR múltiple permite la detección de infecciones polimicrobianas comúnmente asociadas a ITS y el diagnóstico es preciso y confiable, incluso en pacientes asintomáticos

Sexually transmitted infections (STIs) are and will continue to be a serious public health problem throughout the world according to WHO data, with the aggravating factor that most cases are asymptomatic and, furthermore, there is no other reservoir other than humans. The diagnosis can be made with traditional and molecular tests, the latter include the polymerase chain reaction (PCR), of which there are several types, among them, multiplex PCR that has the capacity to detect polymicrobial STIs from a single sample. The objective of this study was to establish which were the most frequent sexually transmitted infections in different groups of patients, as well as to determine the usefulness of the multiplex PCR technique in the diagnosis of STIs. Methodology. This is an observational, cross-sectional study carried out between 2021 and 2022 with patients who attended the VID Clinical Laboratory for suspected STIs. The collected samples were evaluated using a commercial test based on the multiplex PCR technique and hybridization. The samples processed were: urine and swabs from endocervix, urethra, rectum, pharynx, and ulcers. Results. The study included 1,027 patients, of these, 228 (22.2%) were positive for different sexually transmitted agents, distributed as follows: 50 (21.9%) women, 129 (56.6%) heterosexual men and 49 (21.5%) men who had sex with men (MSM). The average age of the women was 30 years, and that of both groups of men was 36 years. The microorganisms most frequently identified in women were: C. trachomatis (A-K) in 28.6%, followed by herpes simplex virus type 2 (HSV-2) in 26.8% and N. gonorrhoeae in 17.9%. In heterosexual men they were C. trachomatis (A-K) in 37.5%, N. gonorrhoeae in 21.5% and HSV-2 in 18.7%. In MSM they were C. trachomatis (L1-L3) in 32.7%, followed by N. gonorrhoeae in 27.6%, and C. trachomatis (A-K) and HSV-2, both in 13.8%. Polymicrobial infection was identified in 11 heterosexual men, 8 MSM, and 6 women. Conclusions. C. trachomatis (A-K) was the most prevalent STI-causing microorganism, followed by N. gonorrhoeae in both groups of men, and HSV-2 in women, very similar to that reported worldwide. The multiplex PCR test allows the detection of polymicrobial infections commonly associated with STIs and the diagnosis is accurate and reliable, even in asymptomatic patients

Aproximación a la situación de la Tuberculosis pulmonar en comunidades indígenas del municipio Puerto Gaitán, Meta, Colombia / An approach to the situation of pulmonary tuberculosis in indigenous communities of Puerto Gaitán, Meta, Colombia

Introducción: La tuberculosis es altamente prevalente en comunidades indígenas de la Orinoquia colombiana. La prevalencia y la incidencia de esta enfermedad en estas comunidades puede ser subestimada debido a la detección y tratamiento inadecuados, y a falta de información confiable. Objetivo: Explorar la situación de la tuberculosis pulmonar en población indígena en comunidades seleccionadas del municipio de Puerto Gaitán. Materiales y método: Estudio exploratorio de corte transversal realizado entre junio y noviembre de 2015 en resguardos indígenas del municipio de Puerto Gaitán, Meta, Colombia. Se aplicaron encuestas socio demográficas y se recolectaron 200 muestras de esputo de pacientes sintomáticos respiratorios que se analizaron con GeneXpert® (Reacción de en cadena de polimerasa PCR en tiempo real). Resultados: Las encuestas evidencian que la población indígena está expuesta a condiciones de deterioro en su calidad de vida que las exponen a mayor riesgo de padecer tuberculosis. De las muestras analizadas, dos fueron positivas para Mycobacterium tuberculosis 2/191 (1,04 por ciento). Conclusiones: Se requiere implementar un sistema de vigilancia diferencial en tuberculosis para la población indígena acorde a sus condiciones de vida, salud y cultura, y priorizar un diagnóstico rápido y sensible(AU)

Introduction: Tuberculosis (TB) is a highly prevalent disease in Colombian indigenous communities of the Orinoquia. The prevalence and incidence of TB in these communities may be underestimated due to an inadequate detection and treatment, and the lack of reliable information. Objective: To explore the situation of pulmonary tuberculosis in selected indigenous communities of Puerto Gaitan. Materials and Methods: An exploratory cross-sectional study was conducted in indigenous communities of Puerto Gaitan, Meta, Colombia from June 2015 to November 2015. Socio-demographic surveys were applied, and 200 sputum samples from symptomatic patients with respiratory diseases were collected and analyzed with GeneXpert® (real-time polymerase chain reaction, RT-PCR). Results: The surveys showed that the indigenous population is exposed to deteriorating conditions in their quality of life, which expose them to a greater risk of suffering from tuberculosis. Two of the samples analyzed showed to be positive for Mycobacterium tuberculosis 2/191 (1.04 percent). Conclusions: It is required to implement a differential surveillance system for tuberculosis in indigenous population according to their living conditions, health, and culture, prioritizing a fast and sensitive diagnosis.

Detección de Chlamydia trachomatis en hombres que tienen sexo con hombres en Bogotá: un estudio piloto / Detection of chlamydia trachomatis in men that have sex with men in Bogotá: a pilot study

Objetivo. Optimizar una técnica PCR que permita evaluar la presencia de C. trachomatis en hisopados anorrectales provenientes de HSH. En Colombia se notifican anualmente más de 70.000 casos nuevos de ITS, de los cuales se estima que aproximadamente el 9.3% corresponde a uretritis entre las que se encuentran las causadas por C. trachomatis. Métodos. Uno de los problemas en el método de detección de C. trachomatis por PCR en muestras de hisopado anorrectal es la extracción de ADN, el uso de equipos automatizados dispuestos en el mercado resulta costoso y en muchos de los casos no están disponibles en el laboratorio clínico de rutina. En este estudio se realizó una PCR para detección de C. trachomatis, estableciendo un protocolo para la toma de muestra y extracción de ADN a partir de hisopos anorrectales. Resultados. Se procesaron 27 muestras correspondientes a HSH voluntarios pertenecientes al Grupo de apoyo y estudio de la Diversidad Sexual (GAEDS) de la Universidad Nacional de Colombia. Se encontraron 5 muestras positivas para C. trachomatis en hombres sintomáticos y asintomáticos relacionado con el riesgo de adquirir infección por sus prácticas sexuales.

Objective. optimize a PCR technique to evaluate the presence of C. trachomatis in anorectal swabs from MSM. In Colombia there are reported each year more than 70,000 new cases of STIs, of which it is estimated that approximately 9.3% is urethritis among which are those caused by C. trachomatis. Methods. DNA extraction is one of the problems in the method of detecting C. trachomatis by PCR anorectal swab samples. Besides, the use of automated equipment arranged on the market is expensive and in many cases the samples are not available in the clinical laboratory routine. In this study it was performed PCR for detection of C. trachomatis protocol establishing the sampling and DNA extraction from anorectal swabs. Results. 27 samples were processed corresponding HSH volunteers belonging to the Support group and study of Sexual Diversity (GAEDS) of the National University of Colombia. 5 samples positive for C. trachomatis associated with both symptomatic and asymptomatic men at high risk of acquiring infection because of their sexual practices were found.

Detección molecular de belactamasas de espectro extendido (BLEE) en enterobacterias aisladas en Asunción / Molecular detection of extended spectrum beta-lactamase (esbl) in enterobacteria isolated in Asunción

Las betalactamasas de espectro extendido (BLEE), son enzimas responsables de la hidrólisis del anillo betalactámico de penicilinas y cefalosporinas, excepto carbapemenes, inhibiendo así su actividad terapéutica. Si bien es posible la detección fenotípica de este mecanismo de resistencia por métodos convencionales, sólo los métodos moleculares permiten la identificación del gen responsable de dicha resistencia. El objetivo de este estudio descriptivo retrospectivo fue identificar los genes blaCTX-M2, blaPER-2, blaSHV y blaTEM, en aislamientos de enterobacterias productoras de BLEE,; de muestras clínicas colectadas entre julio 2007 y abril 2008, provenientes de dos hospitales de referencia de Asunción, Paraguay. La detección molecular de los genes se realizó por reacción en cadena de la polimerasa empleando oligonucleótidos específicos. De los 232 aislados BLEE analizados, el 83% (n=192) portó al menos un gen bla, en el 17% (n=40) restante no fue detectado ninguno de los genes incluido en el estudio. Se observaron las siguientes frecuencias: 49% (94/192) blaCTX-M2, 45% (86/192) blaSHV, 40% (77/192) blaTEM y 7% (13/192) blaPER-2. En el 47% (90/192) se detectó más de un gen, siendo la combinación blaCTX-M2+blaTEM+blaSHV, la más frecuente observada en 32 aislados. El blaCTX-M2 como el gen más frecuente en este estudio; concuerda con lo reportado en nuestro país y en Argentina. Este es el primer reporte de la presencia de blaTEM y blaSHV en Paraguay. Es de gran importancia el estudio de otros genes codificantes de resistencia, considerando la emergencia de otras BLEE en la región como blaCTX-M15 con actividad predominantemente ceftazidimasa.

Extended spectrum beta-lactamases (ESBLs), are enzymes responsible for thehydrolysis of the beta-lactam ring and resistance to both cephalosporins and penicillins,except carbapenems, therefore inhibiting its therapeutics activity. Even though, detectionof the phenotypic resistance mechanism by conventional methods is possible, onlymolecular methods allow identification of the gene responsible for the resistance. Theobjective of this retrospective study was to identify the blaCTX-M2, blaPER-2, blaSHV, blaTEMgenes in ESBL-producing enterobacteriaceae isolates, recovered from clinical samples collected between July 2007 and April 2008, from two reference hospitals in Asunción,Paraguay. Molecular gene detection was performed by polymerase chain reaction usingspecifics oligonucleotides. Out of the tested 232 ESBL-producing isolates, 83% (n=192)carried at least one of the bla genes as follows; 49% (94/192) blaCTX-M2, 45% (86/192)blaSHV, 40% (77/192) blaTEM and 7% (13/192) blaPER-2. In the rest 17% (n=40) none of thegenes included in this study was detected; in 47% (90/192) more than one gene wasdetected, resulting blaCTX-M2 + blaTEM + blaSHV as the most frequent combination in 32isolates. The presence of blaCTX-M2, as the most frequent codifying genes of BLEE is inagreement with previous reports in Paraguay and Argentina. This is the first report of thepresence of blaTEM and blaSHV circulating in Paraguay. It is of much importance the study ofothers codifying resistance genes, taking into account the emergence of other BLEE in theregion, such as blaCTX-M15, predominantly with ceftazidimase activity.

Reacción en cadena de la polimerasa para la identificación de Salmonella spp. usando el gen invA / Polymerase Chain Reaction (PCR) for identification of Salmonella spp. using the invA gene

Se desarrolló un protocolo de PCR para identificar cepas de Salmonella de diferentes procedencias empleando un set de iniciadores PCR específico a Salmonella, para el reconocimiento de una secuencia de 119 pb del gen invA. Los resultados cumplieron con las máximas de la selectividad: inclusividad, pues todas las 14 cepas de Salmonella ensayadas presentaron señal positiva para el gen, exclusividad ya que ninguna cepa no Salmonella (Shigella, E. coli, E. coli O157:H7) mostró señal positiva, robustez porque en las 14 cepas de Salmonella se obtuvo la señal esperada, en un total de cuatro repeticiones con iguales condiciones de trabajo en cuatro días no consecutivos. Asimismo, fue reproducible, pues los resultados fueron idénticos al modificar las condiciones de reacción. Al comparar la PCR con el cultivo convencional, usando preenriquecimiento no selectivo en agua peptonada y enriquecimiento selectivo en caldo selenito-cistina, se apreció que la PCR fue 100% sensible y especifica, con 100% de inclusividad como de exclusividad.

A PCR protocol was developed to identify strains of Salmonella from different sources using a set of “primers” PCR specific to Salmonella, for the recognition of 119 bp invA gene sequence. The results met the maxims of selectivity: inclusiveness, all strains of Salmonella presented positive signal for the gene, exclusivity since no strain Salmonella (Shigella, E. coli, E. coli O157: H7) showed no signal positive robustness because in the 14 strains of Salmonella expected signal was obtained in a total of four repetitions with equal working conditions in four non-consecutive days. Also it was reproducible, results were identical by modifying the reaction conditions. Comparing PCR with conventional culture, using non-selective pre-enrichment in peptone water and selective enrichment in selenite-cystine broth, it was found that the PCR was 100% sensitive and specific, with 100% of inclusiveness, 100% exclusive and 100% of both positive and negative predictive value.

Comparación de los métodos de cuantificación de carga viral de VIH: COBAS® AmpliPrep/COBAS® TaqMan HIV-1 test, v 2.0, y VERSANT HIV-1 RNA 1. 0 Assay (kPCR) / Comparison of COBAS® AmpliPrep/COBAS® TaqMan HIV-1 test, v 2.0 and VERSANT HIV-1 RNA 1. 0 (kPCR) assays for HIV-1 plasma viral load

Objetivo. El propósito del estudio fue evaluar el desempeño del método VERSANTHIV-1RNA 1.0 Assay® (kPCR) (Siemens), para la cuantificación de la carga viral en pacientes con VIH-1, en comparación con el método COBAS® AmpliPrep/COBAS TaqMan HIV-1 test®, v2.0 (Roche Diagnostics) (CAP/CTM). Métodos. Las muestras fueron tomadas en dos tubos con EDTA, de 60 pacientes remitidos por el médico tratante para pruebas de carga viral como parte de su control de rutina de VIH/sida, y fueron procesadas para la cuantificación del ARN del VIH-1 por ambas técnicas. Se hizo análisis de regresión y se calcularon los coeficientes de correlación de Pearson, y los de correlación y concordancia de Lin. Se evalúo la concordancia entre las dos técnicas mediante el método de Bland-Altman. Resultados. El promedio de la carga viral por el método CAP/CTM fue 3,2±1,4 long10 copias/ml y, por el método kPCR, 3,0±1,3 long10 copias/ml. El 86,7 % de muestras presentó diferencias entre los dos métodos, menores de 0,5 long10 copias/ml, y el 13,3 % presentó diferencias mayores. El coeficiente de correlación de Pearson entre los dos métodos fue de 0,97 (IC95% 0,95-0,99) y el índice kappa ponderado entre los dos métodos en diferentes rangos de concentración, fue de 0,91 (IC95% 0,87-0,96). El promedio de las diferencias entre las mediciones fue 0,22 long10 copias/ml (IC95% -0,45 a 0,89). Conclusión. Las dos técnicas evaluadas fueron comparables, con el método kPCR se observaron resultados más bajos.

Objective: The purpose of this study was to evaluate the performance of the kPCR VERSANT (™) 440 HIV-1RNA 3.0 Assay® (Siemens) method for the quantification of viral load in HIV-1 patients, compared to the COBAS AmpliPrep/COBASTaqMan HIV-1 test®, v. 2.0 (Roche Diagnostics) (CAP/CTM). Methods: Samples were taken in 2 tubes with EDTA, in 60 patients referred by the attending physician for viral load tests as part of their routine control of HIV/AIDS, and were processed for quantification of HIV-1 RNA by both techniques. A regression analysis, the Pearson correlation coefficient and agreement of Lin were done. The agreement between the two techniques was evaluated with the Bland Altman analysis. Results: The mean viral load by CAP/CTM was 3.2 ± 1.4 long10 copies/ml and by kPCR it was 3.0±1.3 10 copies/ml. Most samples (86.7%) showed differences between the two methods lower than 0.5 long10 copies/ml, and 13.3% presented greater differences. The Pearson correlation coefficient between the two methods was 0.97 (95% CI 0.95-0.99) and the weighted kappa index between the two methods, in different ranges of concentration, was 0.91 (95% CI 0.87-0.96). The average difference between measurements by both techniques was 0.22 long10 copies/ml, (IC 95% -0.45-0.89). Conclusion: Both techniques were comparable, although lower values of viral load were observed with kPCR.

Virus del papiloma humano (VPH) detección y tipificación en la consulta privada / Human papilloma virus (HPV) detection and typification in private practice

Determinar cuáles son los tipos de virus del papiloma humano en mujeres y hombres que asisten a una consulta privada de ginecología. Se estudiaron 200 pacientes: 175 mujeres y 25 hombres, con diagnóstico de virus del papiloma humano a simple vista, colposcopia, citología y/o biopsia. A todos se les realizó tipificación de virus del papiloma humano por reacción en cadena de la polimerasa. En la Unidad de Ginecología Reproducción y Salud Integral. Valencia. La edad de los pacientes se ubicó en más del 70 por ciento en los grupos etarios de 15 a 34 años. Las pacientes nuligestas y nulíparas estaban alrededor del 60 por ciento. La imagen colposcópica dominante en las mujeres fue epitelio aceto-blanco (77 por ciento), mientras que en la totalidad de los hombres correspondió a verrugas. La citología cervical reportó virus del papiloma humano (con o sin NIC) en solo 40 por ciento, mientras que la biopsia lo demostró cerca del 80 por ciento. Se realizó detección/tipificación de virus del papiloma humano por el método de reacción en cadena de la polimerasa en todos los casos, encontrándose cerca del 10 por ciento de resultados negativos en mujeres y 12 por ciento en hombres. Fueron hallados 15 tipos de virus del papiloma humano en mujeres, de los cuales más de la mitad eran de alto riesgo. En los hombres solo encontramos 5 tipos diferentes, de los cuales solo la cuarta parte aproximadamente eran de alto riesgo. En nuestra serie de mujeres los tipos 6 y 11 fueron los más frecuentes de bajo riesgo, lo cual coincide a lo publicado en la literatura. En cuanto a los de alto riesgo, los de mayor frecuencia fueron los tipos 16, 31 y 33, lo cual no concuerda totalmente con las publicaciones. En nuestra serie de pacientes masculinos, el 64 por ciento de tipos de bajo riesgo fueron el 6 y el 11, lo cual es similar a lo publicado en la bibliografía estudiada. A esta diferencia entre los tipos encontrados....

To assess which are the HPV types in both male and female patients attending a private gynecological outpatient clinic. Two hundred patients were assessed: 175 women and 25 men who were diagnosed positive with HPV by visual examination, colposcopy, cytology and/or biopsy. Cervical cytology reported HPV (with or without CIN) in approximately only 40 percent of the cases, while biopsy showed this in nearly 80 percent of the cases. The typification method used for all the cases was PCR. Unidad de Ginecologia Reproduccion y Salud Integral. Valencia. More than 70 percent patients were within 15-34 years old. 60 percent of the women were nuligravidas and nulliparous. The more frequent colposcopic picture in women was acetowhite epithelium (77 percent) while all the cases of men showed warts. Detection/typification of HPV was performed by PCR in all cases with negative results in close to 10 percent women and 12 percent men. Fifteen types of HPV were found in women, in which more than half were high risk. In men only 5 different HPV types were found and only around one fourth of these cases were high risk. In our series, HPV types 6 and 11 were the low risk HPV in women, which coincides with publications in the literature. In relation to high risk HPVs, the more frequent types were 16, 31 and 33, which doesn’t coincide totally with publications. In our series of men, 64 percent of low risk were 6 and 11, which is similar to the data published in world literature. This difference between HPV types found in men and women suggests an incomplete understanding of all the factors involved in sexual transmission

Seguridad viral de la Gammaglobulina anti-D / Viral safety in human anti-D immunoglobulin

Introducción. El Parvovirus B19 humano (B19) es considerado como uno de los mayores contaminantes de plasma, sangre y hemoderivados. Con el propósito de reducir el riesgo de contaminación, la Farmacopea Europea estableció el control por PCR del ADN del Parvovirus B19 en los pool es de plasma destinados a la producción de Gammaglobulina anti-D (Rh), un producto utilizado en mujeres embarazadas para pre­venir la enfermedad hemolítica del recién nacido. Además del control del ADN viral se aplican otros procesos y procedimientos adicionales para optimizar la seguridad viral y el aprovechamiento de la materia prima. Objetivos. Demostrar que el control por PCR del ADN/B19, la presencia de anticuerpos neutralizantes y la inactivación viral por pasteurización en la producción de preparados de Gammaglobulina anti-D permiten obtener un hemoderivado seguro. Materiales y Métodos. Los pooles de plasma fueron analizados para ADN/B19 mediante una técnica de PCR "in house" de adecuada sensibilidad y validada con un Standard Internacional. La extracción del ADN se realizó con columnas de sílica y la amplificación se realizó con primers específicos. Se analizaron los anticuerpos IgG contra proteína VP2 del B19 por ELISA en muestras de plasma de donaciones individuales. Se validó la pasteurización como método de inactivación viral, con virus envueltos y desnudos y se controlaron las Gammaglobulinas anti-D por PCR para descartar presencia de ADN del parvovirus B19 en producto final. Resultados. Se detectó que el 18% (n= 73) del total de pooles de plasma por PCR poseen una carga mayor a 1500 UI/ ml y el 82% con títulos menores a 1500 UI/ml. Los anticuerpos IgG anti-VP2 del B19 fueron detectados en el 75% de las muestras de plasma de donaciones individuales. La pasteurización resultó efectiva para virus envueltos y desnudos donde se detectó una pérdida de la infectividad mayor a 4.0 log de virus... (TRUNCADO)

Background. Human Parvovirus B19 (B19) is recognized as one of the majors contaminants of plasma, blood products and plasma-derived products. To reduce the risk of contamination, B19 DNA plasma pool testing by PCR during the manufacturing of anti-D Inmunoglobulin has been established by European Pharmacopoeia. This is a plasma-derived product used in pregnant women to prevent the hemolytic disease of the newborn. In addition, to optimize the viral safety and minimize the loose of plasma pools, additionals practises and procedures are implemented. Objectives. Demonstrate the B19 DNA control by PCR, the presence of antibodys with neutralizing activity and the viral inactivation by pasteurization in manufacturing of anti-D Inmunoglobulin are suitables procedures to allow to obtain a safety plasma-derived product. Materials and methods. The plasma pools were tested for B19 DNA by an "in house" PCR technique with appropriate sensitivity and validated with an Internacional Standard. The DNA was extracted with silica columns and the amplification reaction was made with specific primers. Plasma single donations were tested for VP2-specific anti-B19 IgG antibodies by ELlSA. The pasteurization was validated as a viral inactivation method, against enveloped and nude viruses. Anti-D inmunoglobulin batches were analized with PCR to ensure the absence of B19 DNA. Results. Of 73 plasma pools, 18% were found to be B19 DNA positive with a viralload > 1500 IU/ml and 82% were < 1500 IU/ml. 75% of single plasma donations were positive for VP2-specific anti-B 19 IgG antibodies. The pasteurization was effective for enveloped and nude viruses where the lost of infectivity was > 4.0 log of virus. AII anti-D inmunoglobulin batch es were negatives for B19 DNA by PCR... (TRUNCATED)