RESUMO
The objective was to evaluate the cytotoxic, genotoxic and mutagenic properties of two experimental medication in Endodontics. For cytotoxic evaluation, fibroblast and osteoblast cells (1x104 cells/well) were plated and divided into groups conforming to the product added in culture medium: EM1 - 20 µL of experimental medication 1 (EM1); EM2 - 20 µL of experimental medication 2 (EM2); VE - 20 µL of vehicle used in medications; C - without product. The MTT assay was performed at 24, 48 e 72 hours for cytotoxic analysis. For genotoxic and mutagenic evaluation, 42 male rats were used. After 1 and 7 days of tubes containing EM1 or EM2, or empty (NC) were subcutaneously implanted, and after 1 day, a single dose of cyclophosphamide (CY) to be applied, the bone marrow was collected and submitted to comet and micronuclei assay. The significance level of 5% was considered for all statistical analysis. The viability of fibroblasts was <70% to both medications at 24h, and EM1 at 72h; at 72h, the proliferation cells was observed in EM2 (>100%). Both medications were non-cytotoxic to osteoblasts, and the EM2 stimulate the cell proliferation at 72h. The damage frequency of CY was statistically similar to EM1 and different to EM2 (p<0.05). The number of micronuclei was insignificant to EM1 and EM2 and no difference to group NC (p>0.05). Despite the absence of mutagenesis and non-cytotoxicity to osteoblasts, the EM1 was cytotoxic and genotoxic to fibroblasts. The EM2 was non-genotoxic, non-cytotoxic and nonmutagenic. (AU)
O objetivo foi avaliar as propriedades citotóxicas, genotóxicas e mutagênicas de dois medicamentos experimentais em Endodontia. Para avaliação citotóxica, células fibroblásticas e osteoblásticas (1x104 células/poço) foram plaqueadas e divididas em grupos de acordo com o produto adicionado no meio de cultura: EM1 - 20 µL da medicação experimental 1 (EM1); EM2 - 20 µL da medicação experimental 2 (EM2); VE - 20 µL de veículo utilizado em medicamentos; C sem produto. O ensaio MTT foi realizado aos 24, 48 e 72 horas para análise citotóxica. Para avaliação genotóxica e mutagênica foram utilizados 42 ratos machos. Após 1 e 7 dias foram implantados por via subcutânea tubos contendo EM1 ou EM2, ou vazios (NC), e após 1 dia, foi aplicada dose única de ciclofosfamida (CY), a medula óssea foi coletada e submetida ao ensaio de cometa e micronúcleos. O nível de significância de 5% foi considerado para todas as análises estatísticas. A viabilidade dos fibroblastos foi <70% para ambas as medicações às 24h e ao EM1 às 72h; às 72h, a proliferação de células foi observada em EM2 (>100%). Ambas as medicações foram não citotóxicas para os osteoblastos, e o EM2 estimulou a proliferação celular às 72h. A frequência de dano do CY foi estatisticamente semelhante ao EM1 e diferente do EM2 (p<0,05). O número de micronúcleos foi insignificante para EM1 e EM2 e não houve diferença para o grupo NC (p>0,05). Apesar da ausência de mutagênese e não citotoxicidade para osteoblastos, o EM1 foi citotóxico e genotóxico para fibroblastos. O EM2 era não genotóxico, não citotóxico e não mutagênico. (AU)
RESUMO
ABSTRACT Removal of bacterial biofilm from the root canal system is essential for the management of endodontic disease. Here we evaluated the antibacterial effect of N-acetylcysteine (NAC), a potent antioxidant and mucolytic agent, against mature multispecies endodontic biofilms consisting of Actinomyces naeslundii, Lactobacillus salivarius, Streptococcus mutans and Enterococcus faecalis on sterile human dentin blocks. The biofilms were exposed to NAC (25, 50 and 100 mg/mL), saturated calcium hydroxide or 2% chlorhexidine solution for 7 days, then examined by scanning electron microscopy. The biofilm viability was measured by viable cell counts and ATP-bioluminescence assay. NAC showed greater efficacy in biofilm cell removal and killing than the other root canal medicaments. Furthermore, 100 mg/mL NAC disrupted the mature multispecies endodontic biofilms completely. These results demonstrate the potential use of NAC in root canal treatment.