Incerteza de medição associada à contagem microbiana de produtos farmacêuticos / Measurement uncertainty associated with microbial count of pharmaceutical products

A contaminação microbiana pode comprometer a eficácia e a segurança dos produtos farmacêuticos. Os testes de contagem microbiana são utilizados para avaliar a qualidade microbiológica de produtos farmacêuticos não estéreis, exigidos pela maioria dos compêndios farmacopeicos. Apesar disso, raramente é considerada a avaliação da incerteza de medição para testes de contagem microbiana, o que pode levar a falsas decisões quanto à conformidade/nãoconformidade. Neste trabalho avaliamos os efeitos de matriz nos testes de contagem microbiana e sua avaliação de incerteza top-down, e avaliamos a incerteza da medição utilizando a abordagem bottom-up, além de que estimamos os riscos do consumidor ou do produtor devido à incerteza da medição. As incertezas combinada e expandida são calculadas empregando-se a abordagem topdown consideraram a exatidão (recuperação) e a precisão como os principais componentes de incerteza. O componente de incerteza da exatidão foi o mais relevante em 59% das amostras estudadas, enquanto a precisão foi a principal fonte de incerteza em apenas 41% das amostras, sendo observado que quanto maior a interferência da matriz, maior o fator de incerteza e, consequentemente, maior a assimetria para o intervalo em torno da medida. A partir da abordagem bottom-up, foram identificadas e quantificadas três principais fontes de incerteza: fator de diluição, volume plaqueado e contagem das placas. A contribuição dessas fontes de incerteza depende do valor medido da carga microbiana em produtos farmacêuticos, a contribuição do fator de diluição e das incertezas do volume plaqueado aumentam com o aumento do valor medido, enquanto a contribuição da contagem das placas diminui com o aumento do valor medido. Foi possível avaliar o risco de decisões falsas devido à incerteza de medição, por meio das estimativas dos riscos do consumidor ou do produtor. Os riscos foram avaliados utilizando-se o método Monte Carlo. Portanto, foi demonstrado a relevância da avaliação da incerteza de medição para garantir a confiabilidade dos resultados dos testes de contagem microbiana e a apoiar a tomada de decisões quando a avaliação da conformidade/não-conformidade dos produtos farmacêuticos não estéreis

Microbial contamination can compromise the efficacy and safety of pharmaceutical products. Microbial counting tests are used to assess the microbiological quality of non-sterile pharmaceutical products required by most pharmacopoeia compendiums. Despite this, measurement uncertainty assessment for microbial count tests is rarely considered, which can lead to false compliance/non-compliance decisions. In this work we evaluated the matrix effects on microbial counting tests and their top-down uncertainty assessment, and evaluated measurement uncertainty using the bottom-up approach, inaddition to estimating the consumer's or producer's risks due to measurement uncertainty. The combined and expanded uncertainties calculated using the top-down approach considered accuracy (recovery) and accuracy as the main components of uncertainty. The uncertainty component of accuracy was the most relevant in 59% of the samples studied, while accuracy was the main source of uncertainty in only 41% of the samples, being observed that the greater the interference of the matrix, the greater the uncertainty factor and, consequently, the greater the asymmetry for the interval around the measurement. From the bottom-up approach, three main sources of uncertainty were identified and quantified: dilution factor, platelet volume and plaque count. The contribution of these sources of uncertainty depends on the measured value of microbial load in pharmaceutical products, the contribution of the dilution factor and uncertainties of the plated volume increase with the increase in the measured value, while the contribution of plate counting decreases with the increase of the measured value. It was possible to assess the risk of false decisions due to measurement uncertainty by estimating consumer or producer risks. The risks were evaluated using the Monte Carlo method. Therefore, the relevance of measuring uncertainty assessment has been demonstrated to ensure the reliability of microbial count test results and to support decision-making when assessing non-sterile pharmaceutical conformity/non-compliance

Analytical method validation of GC-FID for the simultaneous measurement of hydrocarbons (C2-C4) in their gas mixture / Validación de un método analítico GC-FID para la medida simultánea de hidrocarburos (C2-C4) en una mezcla gaseosa / Validação de uma metodologia analítica GC-FID para a medida simultánea de hidrocarbonetos (C2-C4) em uma mistura gasosa

An accurate gas chromatography coupled to a flame ionization detector (GC-FID) method was validated for the simultaneous analysis of light hydrocarbons (C2-C4) in their gas mixture. The validation parameters were evaluated based on the ISO/TEC 17025 definition including method selectivity, repeatability, accuracy, linearity, limit of detection (LOD), limit of quantitation (LOQ), and ruggedness. Under the optimum analytical conditions, the analysis of a gas mixture revealed that each target component was well-separated with high selectivity property. The method was also found to be precise and accurate. The method linearity was found to be high with good correlation coefficient values (R² ≥ 0.999) for all target components. It can be concluded that the GC-FID developed method is reliable and suitable for determination of light C2-C4 hydrocarbons in their gas mixture. The validated method was successfully applied to the estimation of light C2-C4 hydrocarbons in natural gas samples, showing high performance repeatability with relative standard deviation (RSD) less than 1.0% and good selectivity with no interference from other possible components.

Se validó una cromatrografía de gases precisa, acoplada con un detector de ionización de llama (GC-FID) para el análisis simultáneo de hidrocarburos ligeros (C2-C4) en su mezcla gaseosa. Los parámetros de validación se evaluaron con base en la definición de la ISO/ IEC 17025, que incluye selectividad del método, precisión y repetibilidad, exactitud, linealidad, limite de detección (LOD), limite de cuantificación (LOQ) y robustez. Bajo las condiciones analiticas óptimas, el análisis de la mezcla gaseosa mostró que cada analito de interés fue separado adecuadamente con alta selectividad. Se encontró también que el método fue preciso y exacto; la linealidad fue alta y con buen coeficiente de correlación lineal (R² ≥ 0.999) para todos los analitos. Se puede concluir que el método GC-FID es confiable y apropiado para la determinación de hidrocarburos ligeros C2-C 4 en una mezcla gaseosa. El método validado ha sido exitosamente aplicado a la valoración de hidrocarburos ligeros C2-C4 en muestras de gas natural, mostrando alta repetibilidad con desviación estándar relativa (RDS) menor al 1% y buena selectividad sin interferencias de otros posibles componentes.

Foi avaliada uma cromatografia gasosa precisa, equipada com um detector de ionização de chama (CG-FID) para a análise simultâneo de hidrocarbonetos ligeiros (C2-C4) em uma mistura gasosa. Os parâmetros de validação foram avaliados baseados na definição da ISO/IEC 17025, que inclui seletividade do método, precisão e repetibilidade, exatidão, linearidade, limite de detecção (LOD), limite de quantificação (LOQ) e robustez. Baixo as condições analiticas ótimas, a análise da mistura gasosa mostrou que cada analito foi separado adequadamente com alta seletividade. Também foi encontrado que o método foi preciso e exato; a linearidade foi alta e com bom coeficiente de correlação linear (R² ≥0.999) para todos os analitos. Pode-se concluir que o método GC-FID é confiável e apropriado para a determinação de hidrocarbonetos ligeiros C2-C4 em uma mistura gasosa. O método avaliado têm sido exitosamente aplicado à valoração de hidrocarbonetos ligeiros C2-C4 em amostras de gás natural mostrando alta repetibilidade com desvio-padrão relativo menor funcionais. ao 1% e boa seletividade sem interferências de outros possiveis componentes.