Volumen plaquetario medio, índice de neutrófilos/linfocitos e índice de trombocitos/linfocitos para determinar el diagnóstico y/o pronóstico en niños con mordedura de serpiente / Mean platelet volume, neutrophil to lymphocyte ratio and platelet to lymphocyte ratio in determining the diagnosis or outcome in children with snakebite

Objetivo.Evaluar la relación entre las variables de volumen plaquetario medio (VPM), índice de neutrófilos/linfocitos (INL) e índice de trombocitos/linfocitos (ITL) y el diagnóstico o la predicción del desenlace en los niños con intoxicación por mordedura de serpiente. Métodos.Se realizó una evaluación retrospectiva de niños con diagnóstico de intoxicación por mordedura de serpiente y un grupo de referencia de sujetos sanos. Se clasificó a los pacientes en tres grupos de intoxicación: leve, moderada y grave. Resultados.Se incluyeron 142 niños en el estudio. La leucocitosis (p= 0, 003), la neutrofilia (p= 0, 026) y la trombocitopenia (p= 0, 034) fueron significativamente más frecuentes en los casos de intoxicación por mordedura de serpiente grave; sin embargo, no se hallaron diferencias estadísticamente significativas en relación con el VPM, el INL y el ITL entre los diferentes grupos de intoxicación por mordedura de serpiente. La media del VPM, el INL y el ITL era significativamente mayor entre los niños con mordedura de serpiente en comparación con los controles sanos. Conclusiones.Según nuestros resultados, el uso del VPM, el INL y el ITL podría servir para el diagnóstico como marcadores inflamatorios en los casos de intoxicación por mordedura de serpiente.

Background: The objective of this study is to evaluate the relationships between the mean platelet volume (MPV), neutrophil to lymphocyte ratio (NLR) and platelet to lymphocyte ratio (PLR) variables and diagnosis or prediction of outcome in children with snakebite envenomation. Methods: Children diagnosed with snakebite envenomation and a control group of healthy subjects were retrospectively evaluated. Patients were classified into three groups as mild, moderate and severe. Results: 142 children were enrolled in the study. Leukocytosis (p= 0.003), neutrophilia (p= 0.026) and thrombocytopenia (p= 0.034) were significantly more common in severe snakebite envenomation, although no statistical significant were found in association with MPV, NLR and PLR between snakebite envenomation groups. The mean MPV, NLR and PLR were found to be significantly higher in children with snakebite compared to than among healthy controls. Conclusions: Our results suggested that MPV, NLR and PLR may be useful for the diagnosis as inflammatory markers in snakebite envenomation.

Caracterización hematológica de hicoteas (Trachemys callirostris Gray, 1856) en Córdoba, Colombia / Hematological Characterization of Hicotea Turtles (Trachemys callirostris Gray, 1856) in Córdoba (Colombia) / Caracterização hematológica de hicoteas (Trachemys callirostris Gray, 1856) em Córdoba, na Colômbia

Se recolectaron 69 muestras de Trachemys callirostris en condiciones ex situ e in situ, para determinar sus parámetros hematológicos, comparar estos valores (considerando sexo, edad y condición) y establecer la morfología de sus células. A los animales se les extrajo sangre de la vena yugular. Se determinaron hematocrito, concentración de hemoglobina, recuentos total de eritrocitos, leucocitos y trombocitos e índices eritrocitarios (volumen corpuscular medio, hemoglobina corpuscular media y concentración de hemoglobina corpuscular media). En extendidos sanguíneos se realizaron el conteo diferencial de leucocitos y la descripción de la morfología de las células encontradas. Los valores promedio encontrados para todos los individuos fueron: hematocrito (29,9% ± 5,1), hemoglobina (4,0 ± 1,0 g/dl), VCM (327 ± 15,3 fl), HCM (45 ± 17,5 pg), CMHC (14 ± 6%), conteo total de trombocitos (15,0 ± 5,4 X 10³ µL), conteo total de eritrocitos (0,92 x 10(6)/µL ± 0,12), conteo total de leucocitos (12,10 ± 5,0 x 10³ µL). Al aplicar el análisis de varianza se encontró que no existe diferencia estadísticamente significativa (p < 0,05) entre Trachemys callirostris de distintos pesos (500 a 2000 g). Sin embargo, existen diferencias significativas (p < 0,05) y altamente significativas (p < 0,01) de la mayoría de las variables hematológicas entre sexos y entre hicoteas mantenidas en condición in situ y ex situ. De esta forma, las diferencias encontradas entre individuos, dependiendo su peso, sexo y condición de mantenimiento (in situ o ex situ), sirven como referencia para el establecimiento de protocolos de manejo de la especie en cautiverio.

69 samples from Trachemys callirostris were collected in situ and ex situ, to determine their hematological parameters, to compare these values (considering sex, age, and condition), and to establish the morphology of their cells. Blood was collected from the jugular vein of the animals. Hematocrit, hemoglobin concentration, total counts of erythrocytes, leukocytes and thrombocytes, and red cell indices were determined (mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin, and mean corpuscular hemoglobin concentration). Differential leukocyte count was performed, and the morphology of cells found in blood smears was described. The average values found for all individuals were: hematocrit (29.9% ± 5.1), hemoglobin (4.0 ± 1.0 g / dl), MCV (327 ± 15.3 fL), MCH (45 ± 17.5 pg), MCHC (14 ± 6%), total count of thrombocytes (15.0 ± 5.4 x 10³ µL), total count of erythrocytes (0.92 x 10(6) µL ± 0.12), and total count of leukocytes (12.10 ± 5.0 x 10³ µL). Analysis of variance showed no statistically significant difference (p < 0.05) between Trachemys callirostris of different weights (500 to 2000 g). Nevertheless, it showed significant (p <0.05) and highly significant differences (p <0.01) for most hematologic variables between sexes and hicotea turtles maintained in situ and ex situ. Thus, differences found between individuals, depending on weight, sex and condition of maintenance (in situ or ex situ), serve as a reference to establish protocols for maintaining turtles in captivity.

Coletaram-se 69 amostras de Trachemys callirostris em condições ex situ e in situ, para determinar seus parâmetros hematológicos, comparar estes valores (considerando sexo, idade e condição) e estabelecer a morfologia de suas células. Aos animais lhes foi extraído sangue da veia jugular. Determinara-se hematócrito, concentração de hemoglobina, recontagens total de eritrócitos, leucócitos e trombócitos e índices eritrocitários (volume corpuscular médio, hemoglobina corpuscular média e concentração de hemoglobina corpuscular média). No sangue estendido foi realizada a contagem diferencial de leucócitos e a descrição da morfologia das células encontradas. Os valores médios encontrados para todos os indivíduos foram: hematócrito (29,9% ± 5,1), hemoglobina (4,0 ± 1,0 g/dl), VCM (327 ± 15,3 fl), HCM (45 ± 17,5 pg), CMHC (14 ± 6%), contagem total de trombócitos (15,0 ± 5,4 x 10³ µL), contagem total de eritrocitos (0,92 x 10(6) µL ± 0,12), contagem total de leucócitos (12,10 ± 5,0 x 10³ µL). Ao aplicar a análise de variância se encontrou que não existe diferença estatisticamente significativa (p < 0,05) entre Trachemys callirostris de diferentes pesos (500 a 2000 g). Porém, existem diferenças significativas (p < 0,05) e altamente significativas (p < 0,01) da maioria das variáveis hematológicas entre sexos e entre hicoteas mantidas em condição in situ e ex situ. Desta forma, as diferenças encontradas entre indivíduos, dependendo seu peso, sexo e condição de manutenção (in situ ou ex situ), servem como referência para o estabelecimento de protocolos de manejo da espécie em cativeiro.

Thrombocyte indices in dogs infected with Ehrlichia canis and Anaplasma phagocytophilum / Índices de trombocitos en perros infectados con Ehrlichia canis y Anaplasma phagocytophilum

Objective. In the present study alterations in trombocyte numbers and trombocyte indices were investigated in 51 dogs naturally infected with E. canis and/or A. phagocytophilum. Achieved results were compared to those of 20 healty dogs comprising control group. Materials and methods. Naturally occuring vector borne diseases were diagnosed by use of a canine point-of-care ELISA kit (Snap 4Dx, Idexx). Dogs were enrolled into 3 groups as follows; II. group involved A. phagocytophilum infected dogs (n=10), III. group (n=13) E. canis+ A. phagocytophilum co-infected, and IV. group (n=28) E. canis infected dogs. Healthy controls (n=20) were enrolled in group I. Results. Mean PLT counts were significantly decreased in II., III. and IV. groups (159.6±63.5, 142.3±44.3, 148.7±33.5, respectively) in comparison to control group (370.4±28.6) (p≤0.01). Mean PCT values in groups II., III. and IV. (0.1530±0.590, 0.1531±0.0441, 0.1450±0.314, respectively) were significantly decreased in contrast to control group (0.3695±0.0283) (p≤0.01). Between PLT and PCT values, statistically significant positive correlation (p≤0.01) (r=0.988, 0.990 and 0.981, respectively) was evident among groups II., III. and IV. Conclusions. Infected dogs showed significant alterations (p≤0.01) among mean PLT and PCT values and a positive correlation was evident between those 2 parameters (p≤0.01), whereas alterations on mean MPV and PDWc were not statistically significant. Finally it was suggested that according to the aforimentioned results, PLT and PCT values may be used as valuable parameters for diagnosis and probably for monitorization and prognosis in infected dogs with Ehrlichiosis and/or Anaplasmosis.

Objetivo. Comparar las alteraciones en el número de trombocitos y en los índices de trombocitos en perros infectados naturalmente con E. canis y A. phagocytophilum. Materiales y métodos. Los perros fueron distribuidos en cuatro grupos: Grupo I; perros sanos (n=20), Grupo II; perros infectados con A. phagocytophilum (n=10), Grupo III; perros infectados con E. canis + A. phagocytophilum (n=13) y grupo IV; perros infectados con E. Canis (n=28). Resultados. Los recuentos de PLT se redujeron significativamente (p≤0.01) en los grupos II, III y IV (159.6±63.5, 142.3±44.3, 148.7±33.5, respectivamente) en comparación con el grupo control (370.4±28.6). La media de los valores de PCT en los grupos II, III y IV fue de 0.1530±0.590, 0.1531±0.0441 y 0.1450±0.314 respectivamente, cuyas reducciones fueron significativas (p≤0.01) en contraste con el grupo control (0.3695±0.0283). Entre los valores de PLT y el PCT la correlación fue positiva (r =0.988) y significativa (p≤0.01), 0.990 y 0.981, respectivamente, entre los grupos II, III y IV. Conclusiones. Los perros infectados mostraron alteraciones significativas (p≤0.01) entre PLT y los valores del PCT, así como una correlación positiva entre esos dos parámetros (p≤0.01), mientras que las alteraciones de MPV y PDWc no fueron significativas. Se sugiere que de acuerdo con los resultados obtenidos, los valores de PLT y el PCT se pueden utilizar como parámetros valiosos para el diagnóstico y probablemente, para el monitoreo y el pronóstico en perros infectados con la Ehrlichiosis o la Anaplasmosis.

Ecotoxicity and hematological effects of a natural insecticide based on tobacco (Nicotiana tabacum) extract on Nile tilapia (Oreochromis niloticus) / Ecotoxicidade e efeitos hematológicos de um inseticida natural de extrato de tabaco (Nicotiana tabacum) em tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus)

Natural insecticides from plant extracts represent an alternative to the highly toxic synthetic products in order to reduce environmental contamination; however some might also be toxic for non-target organisms. The present study determined the 50% lethal concentration (48h; LC50) for adults Nile tilapia (Oreochromis niloticus) exposed to the natural insecticide Fumydro®, based on the tobacco plant (Nicotiana tabacum), and evaluated its effect on hematological variables. After preliminary tests, adult specimens of O. niloticus were exposed to four Fumydro® concentrations (200, 300, 400 and 500 µL L-1). The 48h; LC50 of Fumydro® was determined at 370 ± 50 µL L-1. The surviving fish after exposure to Fumydro® showed an increase in the number of red blood cells, hemoglobin concentration, mean corpuscular hemoglobin and mean corpuscular hemoglobin concentration. The number of thrombocytes and leukocytes has not changed, unlike the differential leukocyte count that presented an increased percentage of neutrophils. The results indicated that the insecticide Fumydro® is highly toxic to Nile tilapia and changes in erythrocyte variables suggested the induction to hypoxemia with low effect on the immune system.

Inseticidas naturais produzidos a partir de extratos de plantas pode ser uma alternativa para diminuir a contaminação do ambiente por agrotóxicos sintéticos e altamente tóxicos, embora alguns deles possam também ser tóxicos para organismos não alvos. O presente estudo determinou a concentração letal 50% (CL50; 48h) para tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) expostas ao inseticida natural Fumydro®, produzido a base de planta de tabaco (Nicotiana tabacum) e analisou o seu efeito nas variáveis hematológicas. Após testes preliminares, exemplares adultos de O. niloticus foram expostos a quatro concentrações de Fumydro® (200, 300, 400 e 500 µL L-1). A CL50; 48h foi estimada em 370 ± 50 µL L-1. Os peixes sobreviventes a exposição ao Fumydro® apresentaram aumento no número de eritrócitos, concentração de hemoglobina, hemoglobina corpuscular média e concentração de hemoglobina corpuscular média. O número de trombócitos e de leucócitos não foi alterado, mas ocorreu alteração na contagem diferencial de leucócitos ocorrendo um aumento na porcentagem de neutrófilo nos peixes expostos a 200, 300 µL L-1 de Fumydro®. Estes resultados indicaram que o inseticida Fumydro® é extremamente tóxico para tilápia do Nilo e as alterações nas variáveis eritrocitárias sugerem que causa hipoxemia, mas tem pouca ação sobre o sistema imune.

Acute aerocistitis induced by thioglycolate, lipopolysaccharide and inactivated Aeromonas hydrophila in Piaractus mesopotamicus: hematological effects / Aerocistite aguda induzida por tioglicolato, lipolisacarídeo e Aeromona hydrophila inativada em Piaractus mesopotamicus: efeitos hematológicos

The effects of swim bladder injection with thioglycolate, Escherichia coli lipopolysaccharide (LPS) and heat-inactivat ed Aeromonas hydrophila were assessed on hematological responses in pacu, Piaractus mesopotamicus (Characidae). A quantitative assessment was done on erythrocytes, thrombocytes e leucocytes at 6, 24, and 48 h pos-injection of the inflammatory agents and compared with fish injected with saline solution (control). Fish injected with inactivated A. hydrophila showed a reduction of erythrocytes and hemoglobin, whereas the hematocrit increased 6 h pos-injection. The results show that thioglycolate and LPS also induced a reduction on hemoglobin and an increase on the hematocrit. The thrombocytes count decreased 6 h post A. hydrophila injection, whereas increased 48 hours post LPS injection. The leukocytes count increased after 6 h post A. hydrophila injection, while the lymphocytes and PAS-positive granularleukocytes (PAS-LG) count decreased after 24 h post injection. In fish injected with thioglycolate or with LPS showed an increase in the LG-PAS counts when compared to A. hydrophila or control groups. The monocytes count was not affected by the different inflammatory agents.

Os efeitos da injeção de tioglicolato, lipolissacarídio de Escherichia coli e Aeromonas hydrophila inativada na bexiga natatória de pacus, Piaractus mesopotamicus (Characidae) foram avaliados quanto às respostas de células vermelhas, leucócitos e trombócitos do sangue. Ensaios quantitativos de eritrócitos, leucócitos e trombócitos foram realizados 6, 24 e 48 h após os estímulos e comparados com peixes que receberam solução salina 0,65% pela mesma via. Peixes inoculados com A. hydrophila apresentaram redução do número de eritrócitos e da taxa de hemoglobina enquanto o hematócrito aumentou 6 h após o estímulo. Os resultados mostraram que o tioglicolato e o LPS também induziram redução da hemoglobina e aumento do hematócrito. A contagem de trombócitos diminuiu 6 h após a inoculação de A. hydrophila inativada e aumentou 48 horas após a injeção de LPS. A contagem de leucócitos aumentou 6 h após a inoculação de A. hydrophila enquanto a de linfócitos a leucócitos granulares PAS positivos (PAS_LG) diminuiu 24 h depois. Peixes injetados com tioglicolato o LPS apresentaram aumento do número de LG_PAS em relação aos inoculados com A. hydrophila inativada ou grupo controle. A contagem de monócitos não foi afetada pelos diferentes agentes.

Efecto del cadmio y de la temperatura sobre el conteo de células sanguíneas del pez dulceacuícola Colossoma macropomum / Cadmium and temperature effect on blood cell counts of freshwater fish Colossoma macropomum

En este trabajo se evaluó el efecto del cadmio y de la temperatura sobre la fragilidad osmótica y el número de células sanguíneas, en el pez Colossoma macropomum. Los organismos fueron expuestos a 0,5 mg/L de cloruro de cadmio durante 24 días y a dos temperaturas (25 y 30ºC). A los 0; 10 y 24 días de exposición, se les tomó muestras de sangre para determinar la curva de fragilidad osmótica, el conteo diferencial de células blancas y el conteo de reticulocitos. Los eritrocitos presentaron principios de hemólisis a 90 mmol/L de NaCl y hemólisis total a10 mmol/L. El porcentaje de linfocitos fue >62 por ciento, incrementándose en los peces expuestos a cadmio, no obstante, el porcentaje absoluto (controles y expuestos) de linfocitos, disminuyó a los 24 días de experimentación, siendo más significativo a la temperatura de 30°C. Después de los neutrófilos, los trombocitos fueron el tercer tipo celular encontrado, sobre los cuales, ni el cadmio ni la temperatura, tuvieron efecto significativo. Sin embargo, el número absoluto de estas células aumentó en los organismos mantenidos a 25°C/24 días; contrario a lo observado en los peces a 30°C/24 días, quienes registraron un descenso de 4 por cierto en su abundancia. Los peces expuestos a Cd/30°C revelaron un significativo aumento de trombocitos en comparación con los expuestos Cd/25ºC. Los reticulocitos disminuyeron por la exposición al metal. El cadmio y la temperatura ejercen un efecto sinérgico sobre el número de trombocitos y afectan individualmente la producción de reticulocitos en el pez.

In this work, the cadmium (CD) and temperature effect on the red cell osmotic fragility and blood cells count in the tropical fish Colossoma macropomum were evaluated. The fishes were exposed to 0.5 mg/L of cadmium chloride during 24 days and two temperatures (25 and 30°C). At 0; 10 and 24 days of Cd exposure, blood samples were taken from fishes to determine the osmotic fragility curve, the differential white cell and reticulocyte count. The erythrocytes osmotic fragility began at 90 mmol/L of NaCl and total hemolysis was observed at 10 mmol/L of NaCl. Lymphocytes were the more abundant cells (>62%). These cells increased in Cd-exposed fish; moreover, the lymphocytes absolute percentage (control and exposed) decrease at 24 days of experimentation, being more significant at 30°C. After the granulocytes acidophils, trombocytes were the third cellular type, they were not affect by Cd neither temperature. However, trombocyte absolute number increased than fishes at 25°C/24 d as fishes at 30°C/24. On the other hand, the Cd/30°C exposed fishes showed a significant increase of thrombocytes. Both, cadmium and temperature affect thrombocyte number. The reticulocytes decrease due to cadmium exposed fishes. A synergic effect is produced by Cd and temperature on trombocytes; however, these factors exert an individual effect in fish reticulocytes.

Morfologia das células do sangue periférico em emas (Rhea americana) / Morphology of cells peripheral blood in rheas (Rhea americana)

A ema (Rhea americana) é uma ave sul-americana do grupo das ratitas, da ordem Rheiforme, freqüentemente explorada com fins econômicos, como pecuária alternativa em países europeus e sul-americanos. No Brasil, destaca-se o Rio Grande do Sul e, em fase inicial, o Nordeste. O presente estudo objetivou descrever a morfologia das células sangüíneas em ema. Neste trabalho foram utilizados dez exemplares, desconsiderando-se idade e sexo. Foram colhidos 3 mL de sangue periférico por punção da veia braquial, com seringa descartável. As amostras foram utilizadas, em parte, na confecção de extensões coradas com Leishman. Feita a análise morfológica ao Microscópio de Luz, foram observados sete tipos celulares nucleados. O eritrócito mostrou-se elíptico, com núcleo geralmente condensado, de forma elíptica; citoplasma acidófilo. O trombócito apresentou-se elíptico, com núcleo localizado em um dos pólos; citoplasma pálido. Quanto aos leucócitos, de forma arredondada, entre os granulócitos os heterófilos apresentaram-se com núcleo excêntrico, condensado, lobulado; citoplasma rico em grânulos fusiformes de coloração salmão. Os eosinófilos distinguem-se dos heterófilos pelos grânulos arredondados eosinofílicos. Os basófilos destacam-se dos outros granulócitos pelo núcleo grande e central, com grânulos citoplasmáticos específicos arredondados e fortemente basofílicos. Entre os agranulócitos, os monócitos mostraram núcleo rineforme, freqüentemente central, de cromatina frouxa, com pequenas áreas de condensação; citoplasma levemente basofílico e com vacúolos. Os linfócitos apresentaram-se variados em forma e tamanho; núcleo grande com cromatina frouxa, com alguns nucléolos; citoplasma escasso e basofílico. As células do sangue periférico de Rhea americana apresentam ao Microscópio de Luz morfologia semelhante às demais aves já estudadas.

The rhea (Rhea americana) is a South American bird of the ratite group and of the Rheiformes order. It has been exploited for economical purposes, as cattle alternative in European and South American countries. In Brazil, the State of Rio Grande do Sul is outstanding, in rhea rearing and it is in the process of implantation in the Country Northeasty Region. This work aims to describe the morphology of the blood cells in rheas. In this work ten rheas were used, regardless age and sex. Two ml of peripheral blood were collected by puncture of the brachial vein with disposable syringe. The samples here partially used to make extensions with Leishman stain. Seven types of nucleate cells have been observed through morphologic analysis on the light microscope. The erythrocyte revealed an elliptical form, with condensed nucleus of elliptical form; acidophilic cytoplasm. The thrombocyte revealed an elliptical form, with nucleus located in one of the polarregions; pale cytoplasm. As to the round-shaped leukocytes, within the granulocytes, the heterophils presented excentric, condensed, and lobulated nucleus; cytoplasm rich in fusiform salmon-colored granules. The eosinophils distinguish from the heterophils due to the round eosinophilic granules. The basophils stand out from the other granulocytes due to its large and central nucleus with round specific cytoplasmic and highly basophilic granules. Within the agranulocytes, the monocytes presented reniform nucleus, which is frequently central, with slack chromatin, with small areas of condensation; cytoplasm lightly basophilic and with vacuoles. The lymphocytes presented varies forms and sizes; large nucleus with slack chromatin with some nucleoli; scarce and basophilic cytoplasm.The cells of the peripheral blood of Rhea americana present on the light microscope morphology similar to the other birds which have already been studied.

Methodological limitations of counting total leukocytes and thrombocytes in reptiles (Amazon turtle, Podocnemis expansa): an analysis and discussion / Limitações metodológicas de contagens de leucócitos e trombócitos totais em répteis (tartaruga da Amazônia, Podocnemis expansa): uma análise e discussão

The aim of this paper is to compare three different methods for counting white blood cells [WBC] (Natt and Herrick method, estimation with 1,000 and 2,000 erythrocytes) and three methods for counting total thrombocytes [TT] (Wojtaszek method, estimation with 1,000 and 2,000 erythrocytes) in a South American freshwater turtle species, Podocnemis expansa, Schweigger 1812 (Reptilia, Pelomedusidae). Direct WBC counts using the Natt and Herrick method showed limitations, which are discussed here. The WBC and TT counts using 1,000 erythrocytes from blood smears are not recommended for Amazon turtles nor other reptilian species, since wide variation in counts can be observed. Estimation methods for determining WBC and TT based on 2,000 erythrocytes of blood smears were most acceptable because they allow a differentiation between leukocytes and thrombocytes and also had a smaller variation. The methods investigated here for the Amazon turtle, which have been widely used in other reptile species, provided evidence that the most acceptable method is not that of using diluted stains and a hemocytometer.

O objetivo deste estudo foi comparar três diferentes métodos para contar leucócitos totais [LT] (método de Natt & Herrick, de estimação em 1000 e 2000 eritrócitos) e três métodos para contar trombócitos totais [TT] ( método de Wojtaszek, de estimação em 1000 e 2000 eritrócitos) em uma espécie de tartaruga de água doce da América do Sul, Podocnemis expansa, Schweigger 1812 (Reptilia, Pelomedusidae). As contagens diretas de LT usando o método de Natt & Herrick mostraram limitações que são aqui discutidas. As contagens de LT e TT usando estimativa em 1000 eritrócitos na extensão sanguínea não são recomendadas para tartaruga-da-Amazônia nem para outras espécies de répteis, pois houve ampla variação nestas contagens. Os métodos para determinar LT e TT baseados em 2000 eritrócitos nas extensões sanguíneas foram mais aceitáveis porque eles permitem uma diferenciação entre leucócitos e trombócitos, além disso, teve uma variação menor. Os métodos aqui investigados para tartaruga-da-Amazônia, os quais são amplamente usados em outras espécies de répteis, proveram evidências de que o método mais aceitável não é o que usa corantes diluentes e um hemocitômetro.