Avaliação da atividade biológica de adutos derivados da reação morita-baylis-hillman sobre Trypanosoma cruzi: uma abordagem molecular, citoquímica e ultraestrutural / Biological activity evaluation of morita-baylis-hillman adducts against Trypanosoma cruzi: a molecular, cytochemical and ultrastructural approach

A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, é um importante problema de saúde pública na América Latina, com cerca de 7,6 milhões de pessoas infectadas. O benznidazol e o nifurtimox são os únicos fármacos disponíveis para o tratamento, e além de apresentarem sérios efeitos colaterais, a sua eficácia na fase crônica da doença ainda é controversa. Neste sentido, nós sintetizamos o aduto Morita-Baylis-Hillman 3-hidroxi-2-metileno-3-(4-nitrofenilpropanonitrilo) (MBHA 3) e avaliamos sua atividade biológica sobre o T. cruzi. O MBHA 3 inibiu fortemente o crescimento das formas epimastigotas, com IC(50) / 72h de 28,5 µM e causou intensa lise de tripomastigotas, com IC(50)/ 24h de 25,5 µM. A análise ultraestrutural mostrou alterações morfológicas significantes, como arredondamento do corpo celular e desorganização intracelular. Alterações indicativas de apoptose, autofagia ou necrose também foram observadas nas células mais afetadas. A fim de melhor compreender o mecanismo envolvido na morte celular induzida pelo composto, nós utilizamos a microscopia confocal e a citometria de fluxo aliadas a sondas fluorescentes, como anexina-V (AV)/ iodeto de propídio (IP); Calceína-AM (CA)/ homodímero de etídio (HE); laranja de acridina (LA) e rodamina 123. O tratamento com 6 e 12 µg/ mL revelou uma alta porcentagem de células viáveis pela CA/ HE, mas também induziu alterações mitocondriais e aumento da marcação com a LA, sugerindo que um processo de morte celular programada (MCP) por autofagia poderia estar ocorrendo. Por outro lado, o tratamento com 24 µg/ mL levou à perda de viabilidade celular com danos excessivos sobre a membrana plasmática e mitocondrial e fragmentação inespecífica do DNA. Em conclusão, nossos achados sugerem que o MBHA 3, em alta concentração, induz MCP por necrose em T. cruzi.

Estudo comparativo experimental da injeção perineural do álcool benzílico 0, 75 e do álcool etílico absoluto nos nervos palmares de eqüinos / Experimental comparative study of perineural injection of benzyl alcohol 0, 75 and absolute ethyl alcohol in equine palmar nerves

Foi estudada a neurólise química dos nervos Palmares em 10 eqüinos. Usando-se uma ferradura especial para induzir claudicação, a locomoção avaliada ao passo e trote e os graus foram registrados antes e após a injeção perineural do álcool benzílico 0,75% (Grupo A) e o álcool etílico absoluto (Grupo B). Os testes mostraram que ambos os neurolíticos dessensibilizaram completamente a sola dos animais a partir de 30 dias, assim permanecendo até o 150º dia nos animais do Grupo A, quando ocorreu retorno progressivo da sensibilidade. Jáno Grupo B, aos 180 dias, a sensibilidade permanecia ausente. A análise histopatológica revelou que nos nervos infiltrados com álcool benzílico 0,75% prevaleceram lesões próprias de axonotemese,sugerindo tendência de regeneração e restabelecimento da condução nervosa, enquanto que nos nervos infiltrados com álcool etílico absoluto, prevaleceram lesões simuladoras de neurotemese, com degeneração nervosa permanente. Concluiu-se que os álcoois utilizados foram eficientes bloqueadores temporários ou permanentes dos nervos Palmares em eqüinos.

The clinical and histopathological effects of two alcoholic neurolytics were studied in horses. Normal horses were shod with a designed shoe adaptted with 5 screws to produce solar pain. After gait and lameness score analysis, the palmar nerve of 5 horses was injected with 5 ml of 0,75% benzyl alcohol (Group A) and 5 horses were injected with 5 ml of absolute ethyl alcohol (Group B). The animals were submitted to regular lameness evaluation and solar sensibility tests during next six months. The solar sensitivity returned 5 months latter in the group injected with benzyl alcohol 0,75%, while in the group injected with absolute ethyl alcohol, the sole was still desensitized 6 months latter. The histopathological findings showed that the nerve injected with benzyl alcohol 0,75%, resulted inaxonotmesis, characterized by axonal nerve degeneration, with possibilities for the nerve conduction recovery. The perineural injectionof ethyl alcohol absolute, resulted in neurotmesis with difficult nerve regeneration. It was concluded that chemical neurolysis with alcoholis an option for temporary or permanent nerve blocks in horses.