Estudo da expressão imunoistoquímica e do valor prognóstico de sintases do óxido nítrico (NOS), metaloproteinases da matriz extracelular (MMP), fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), caderina e, densidade de microvasos (DMV) e da densidade de vasos linfáticos (DVL) em pacientes portadores de carcinoma de células renais / Study of immunohistochemical expression and value prognosis of nitric oxide synthases (NOS), metalloproteinases of extracellular matrix (MMP), vascular endothelial growth factor (VEGF), cadherin e, microvessel density (DMV) and the density of lymphatic vessels (DVL) in patients with carcinoma of renal cells

Introdução: O carcinoma de células renais (CCR) é neoplasia altamente letal, com evolução incerta. Novos fatores prognósticos biomoleculares em CCR são necessários. ... Dados epidemiológicos clínicos e patológicos foram coletados. Empregaram-se classificações de performance status da Eastern Cooperative Oncologic Group (ECOG), Karnofsky Performance Status (KPS) e a classificação da American Society of Anesthesiology (ASA) ... A partir da análise univariada, criou-se um Modelo Multivariado Hierárquico (MMH), que submetido à análise multivariada, permitiu a elaboração de um escore com as variáveis prognósticas mais significativas para SG e SLD. Resultados: Na análise univariada, dentre os marcadores biomoleculares, apenas a NOS-3 (p=0,047) e DMV (p=0, 052) tiveram impacto na SG. .... Na análise univariada de SLD para os 94 pacientes sem metástases, nenhum marcador biomolecular teve impacto significativo (p>0,05). Na análise multivariada para SLD, apenas o estádio Clínico foi fator independente. O estádio III (ajustado pelo estádio I) teve HR de 9,5 vezes para recidiva. Conclusão: Fatores clínicos usuais permaneceram como os fatores preditivos mais significativos em CCR e permitiram a elaboração de um escore prognóstico, no qual pacientes com mais de 4 pontos tiveram chance de óbito de mais de 50%. Este escore deve ser testado em outras casuísticas. Futuros estudos sobre as correlações da NOS-3 e seu papel prognóstico no CCR devem ser realizados.

Introduction: Renal cell carcinoma (RCC) is a tumor with high mortality rate and uncertain evolution. Therefore, new molecular factors in RCC are necessary. This study aims: to evaluate the expression of Nitric Oxide Sintases types 1, 2 and 3 (NOS-1, NO-2, NOS-3), matrix metalloproteases types 2 and 9 (MMP-2 and MMP-9), E-Cadherin and vascular endothelial growth factor (VEGF) through imunohistochemical analysis; to evaluate microvessel density (MVD) and lymphatic vessel density (LVD); to verify the association among biomarkers expression and epidemiological, clinic and pathological variables; to verify the impact of the variables as prognostic factors in 5 years overall survival (OS) and disease free survival (DFS). Material and Methods: One-hundred and ten patients with RCC were included. Clinical, epidemiological and pathological data were collected from medical charts. Performance status classifications used were: Eastern Cooperative Oncologic Group Classification (ECOG) and Karnofsky Performance Status (KPS) and the American Society of Anesthesiology Classification (ASA). The Tissue Microarray (TMA) was used and a digital microscopy program (ACIS III) was empregated. To predict recurrence, progression our death, the variables selected by univariate analysis were included in a Hierarchic Multivariate Model (HMM), to estimate the odds of deaths or disease progression or recurrence. Results: In the univariate analysis, NOS-3 (p=0.047) and MVD (p=0.052) had impact in OS. Patients with low expression of NOS-3 had an OS of 79% versus 58.1% for patients with high expression of NOS-3. The MVD showed direct correlation with OS rates: patients with high MVD had higher OS (79.9%) than the patients with low MVD (58%). E-cadherin, the VEGF, the MMP-2, MMP-9 and DVL expression were not correlated with OS and DFS. NOS expression (NOS- 1, NOS - 2 and NOS - 3) were directly correlated with tumor size: patients with low NOS expression had tumors 2.0 to 3.0cm smaller than patients with high NOS expression. High expression of NOS-3 was correlated with lymph node metastasis (31% versus 9.7%, p=0.029), with renal pelvis and ureter invasion (16% versus 3.3%, p= 0.0041) and with a higher rate of radical nephrectomies (88% versus 63.3%, p=0.003). The high expression of the MMP-2 and the MMP-9 were correlated with high grade tumors (p=0.046 and p=0.009 respectively) and with histological type not clear cell (p=0.029 and p=0.009, respectively). In the OS multivariate analysis, the significant prognostic factors were: TNM clinical staging (HR=4.5), grade (HR=2.9), KPS (HR=2.5), the occurrence of post-nephrectomy progression (HR = 5.3) and/or recurrence (HR= 6.5), all of them adjusted by the age (HR=1.1). The HMM score ranged of 0 the 7 points. There were no deaths among patients with 0 point and all patients with 7 points have died. According to the HMM score, the probability to be alive for 0, 1-2, 3-4, 5-7 score levels was respectively 100%, 83.5%, 53,5 and 13.5%. In the univariate DFS analysis for the 94 patients without metastases (16 of the 110 patients had metastasis at diagnosis), no molecular marker had significant impact. In the multivariate analysis for DFS, only the TNM clinical staging was an independent prognostic factor. Clinical staging III had HR of 9.5 times for recurrence. Conclusions: Usual clinical factors remained as most important prognostic factors in RCC and had allowed the elaboration of one score, in which patients with more than 4 points has a death probability rate higher than 50%. This MMH score must be validated for other groups. Future studies regarding the correlations and the prognostic role of NOS-3 in RCC must be conducted.

Escenciales en biomedicina (biología, patobiología y bioclínica) humana de las NOSS (Óxido Nítrico-Sintetasas): [revisión] / Essentials in human biomedicine (biology, patobiology and bioclinic)of the nitric oxide synthetases (NOS): [review]

El Óxido Nítrico (NO) es un radical libre gaseoso que juega roles prominentes en señalamiento celular, expresión y regulación génica, energética celular, proliferación celular y citostasis, e inmunidad celular y tolerancia, incluyendo funciones inflamatorias. Aunque NO sirve a roles beneficiosos como citotrófico, vasodilatador, antiangiogénico, anti-trombótico, anti-inflamatorio, defensa inmune del huésped, antiproliferativo y antioxidante, su excesiva producción puede ser citotóxica, vasoconstrictora, pro-angiogénica, protrombótica, pro-inflamatoria, proproliferativa y oxidante, a causa de la endógena producción de intermediarios reactivos del nitrógeno y/o el oxígeno. Esta revisión explora el conocimiento colectivo del rol de las NO-Sintetasas (NOSs) en biología, patobiología, bioclínica humana y nuevas oportunidades en prevención y tratamiento...

The Nitric Oxide (NO) is a gaseosus free radical that plays prominent roles in cell signaling, gene expression and regulation, cellular energetics, cell proliferation and cytostasis, and cell immunity and tolerence including inflammatory functions. Althoug NO serves benificial rolesas cytotrophic, vasodilator, anti-angiogenic, antithrombotic, anti-inflammatory, host defense, antiproliferativeand antioxidant, excessive production can be cytotoxic, vasoconstrictor, pro-angiogenic, prothrombotic, proinflammatory, pro-proliferative and oxidant, because endogenous production of reactive nitrogen and/o oxygen intermediates. The review explores the collective knowledge of the role of NO-Synthetases (NOSs) in human biology, pathobiology, bioclinic and new opportunities in prevention and treatment.

Dexametasona incrementa os efeitos neuronais produzidos por óxido nítrico sintetizado no músculo esquelético / Dexamethasone develops the neuronal effect produced by synthecized nitric oxide in the skeletal muscle

A acetilcolina é o mediador químico responsável pela trasmissão neuromuscular. Ao ser liberada doneurônio motor, a acetilcolina ativa os receptores nicotínicos da placa motora e gera o potencial de placa terminal. Por sua vez, tal potencial deflagra o potencial de ação muscular iniciando, assim os procesos de contração muscular. A acetilcolina liberada para a fenda sináptica pode também modular su própria liberação ativando receptores nicotínicos e/ou muscarínicos do terminal nervoso motor. O acionamento dos receptores nicotínicos do terminal determina um aumento na quantidade de acetilcolina liberada para a fenda sináptica. Quando os receptores muscarínicos do terminal nervoso motor são ativados ocorre uma redução na quantidade de neurotransmissor liberada para a fenda sináptica. A ativação dos receptores colinérgicos pré-sinápticos é dependente da frequência e da duração dos estímulos elétricos aplicados no nervo motor...

Dexametasona incrementa os efeitos neuronais produzidos por óxido nítrico sintetizado no músculo esquelético / Dexamethasone develops the neuronal effect produced by synthecized nitric oxide in the skeletal muscle

A acetilcolina é o mediador químico responsável pela transmissão neuromuscular. Ao ser liberada do neurônio motor, a acetilcolina ativa os receptores nicotínicos da placa motora e gera o potencial de placa terminal. Por sua vez, tal potencial deflagra o potencial de ação muscular iniciando, assim, o processo de contração muscular. A acetilcolina liberada para a fenda sináptica pode também modular sua própria liberação ativando receptores nicotínicos e/ou muscarínicos do terminal nervoso motor. [...]o presente trabalho objetivou: 1. Determinar a importância relativa do NO produzido pelo músculo esquelético, nervo motor e tecido vascular nos efeitos neuromusculares induzidos pela L-arginina. Para tanto, utilizou-se a hemoglobina como agente quelante de NO em preparações nervo frênico-diafragma de ratos in vitro estimuladas com pulsos de baixa ou alta freqüências. 2. Investigar os efeitos neuromusculares do doador de NO (nitroprussiato de sódio) em preparações nervo frênico-diafragma de ratos estimuladas com pulsos de baixa ou alta freqüências. 3. Investigar os efeitos da dexametasona (doses ou concentrações utilizadas na terapia de pulso) na transmissão neuromuscular de preparações nervo ciático-tibial anterior de ratos in vivo e nervo frênico-diafragma de ratos estimuladas com pulsos de baixa ou alta freqüências. 4. Investigar os efeitos neuromusculares da associação NO (nitroprussiato de sódio ou L-arginina) e dexametasona em preparações nervo frênico-diafragma de ratos estimuladas com pulsos de baixa ou alta freqüências. [...] Estes resultados sugerem que: (1) NO, sintetizado no músculo, atua no nervo motor e no músculo esquelético. NO produzido no nervo ou no tecido vascular parecem não atuar na musculatura esquelética. (2) Os efeitos neuromusculares induzidos pelo nitroprussiato de sódio assemelham-se àqueles observados com L-arginina e são decorrentes da liberação espontânea de NO da sua molécula. (3) Os efeitos pré-sinápticos induzidos pela dexametasona.

Óxido nítrico: fisiología y farmacología / Nitric oxide: physiology and pharmacology

El óxido nítrico pasó de ser una molécula tóxica, producto de la combustión a ser un mediador de múltiples procesos biológicos. Los principales investigadores que trabajaron sobre el mismo recibieron en el año 1998 el premio Nobel. Se lo encuentra presente en las células del endotelio de todos los mamíferos y juega un papel fundamental en el proceso de relajación. Posteriormente se ha demostrado que se sintetiza en las plaquetas, células del sistema inmune, neuronas y otras células del organismo donde ejerce, otras acciones más allá de la vasodilatación. Su exceso o defecto permitió la comprensión de distintos mecanismos fisiopatológicos (shock séptico, hipertensión arterial). Su modulación permite tratar distintas entidades. La administración por vía inhalatoria tiene utilidad en diversas patologías. El tratamiento de la hipertensión pulmonar del recién nacido es el ejemplo más relevante, porque permitió mejorar la sobrevida y disminuyó el número de pacientes sometidos a Membrana de Oxigenación Extracorpórea. En el tratamiento de las cardiopatías congénitas que cursan con hipertensión pulmonar ocupa un lugar destacado en el intra, pre y postoperatorio. El Síndrome de Distrés Respiratorio del Adulto es quizá la entidad más cuestionada; ya que, si bien mejora la hipoxemia, no hay estudios que demuestren que mejora la sobrevida.

Oxido nítrico exhalado como marcador de inflamación en niños con asma / The exhaled nitric oxide is a inflammatory response

El óxido nítrico es un gas reactivo que se produce de manera endógena por enzimas óxido nítrico sintetasa. Existe una gran producción de óxido nítrico inducida por la isoforma de la enzima óxido nítrico sintetasa, que da como resultado la formación de productos citotóxicos, que son importantes mediadores de los mecanismo de defensa y de la respuesta inflamatoria normal. El óxido nítrico puede detectarse en el aire exhalado en humanos, sus concentraciones están incrementadas en pacientes con asma, y después de la exposición a alergenos. La medición del óxido nítrico exhalado se efectúa por métodos sencillos, no invasivos, para valorar el grado de inflamación de la vía aérea y la respuesta al tratamiento con esteroides en pacientes pediátricos

Possible roles of nitric oxide and peroxynitrite in murine leishmaniasis

Activated macrophages simultaneously synthesize nitric oxide and superoxide anion which can react with each other producing peroxynitrite. Consequently, it has been difficult to assess the precise contribution of each of the formed reactive oxygen- and nitrogenderived species to the microbicidal activities of macrophages, particularly in vivo. To explore this problem, we are examining the formation and potential roles of nitrogen-derived intermediates in Leishmania amazonensis murine infection. Thus far, our results have demonstrated that peroxynitrite is a potent leishmanicidal agent in vitro and that both nitric oxide and peroxynitrite are formed during infection of susceptible BALB/c mouse strain. Nitric oxide was detected as the nitrosyl-hemoglobin complex by electron paramagnetic resonance analysis of blood drawn from mice at different times of infection, and it was shown to increase with the evolution of the disease. These results will be discussed in the context of the dual physiological role of nitric oxide either as a signaling molecule or as a deleterious agent.

Evidence for the involvement of nitric oxide in the electrically induced relaxations of human lower esophageal sphincter and distal pylorus

The aim of the present study was to investigate in vitro the effect of Ng-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME), a nitric oxide (NO) synthase inhibitor, on neurogenic relaxation of human lower esophageal sphincter (LES) and distal pylorus (DP) circular muscle strips induced by electr4ical field stimulation (EFS). Muscle strips obtained from 5 patients who underwent total gastrectomy were suspended in 10-ml organ baths containing Krebs solution for recording isometric tension. L-NAME(30 uM) reduced the amplitude of the EFS-induced relaxation by 85 ñ 9% (N=3) in the LES and by 52 ñ 16% (N=3) in the DP but did not affect sodium nitroprusside-induced relaxation. L-Arginine (300 uM) partially reversed the L-NAME inhibition in the LES and totally in the DP. These findings suggest a role for L-arginine-derived NO in the nerve-mediated NANC relaxation of the human LES and DP