Cambios en la actividad biológica de un antígeno debido a la temperatura generada durante la electroforesis de poliacrilamida / Changes in the biological activity of an antigen due to the temperature generated during the polyacrylamide electrophoresis

Se evaluó el efecto que origina la temperatura sobre la actividad biológica de un antígeno durante la electroforesis en geles no reductores de poliacrilamida, porque en ocasiones la técnica precede a la electroelusión, método empleado en la purificación de determinadas proteínas. Se utilizó el antígeno específico prostático para el ensayo, este se purificó a partir del semen de pacientes voluntarios, precipitado con sulfato de amonio 70 por ciento. Las corridas (3 para cada temperatura), se llevaron a cabo a 4 y 25 °C, y se realizaron a 20 mA. Para cada temperatura ensayada, los fragmentos provenientes de los geles cortados a la talla esperada para el antígeno específico prostático (33 kDa), se electroeluyeron a 4 °C. Mediante la comparación de las concentraciones de proteínas empleando la técnica de Lowry y el método radioinmunoenzimático, se cuantificó la cantidad de proteína biológicamente activa posterior a la electroforesis. Se utilizó un antígeno específico prostático comercial como control. Los resultados indican que el antígeno a 4 °C, conserva 80 por ciento de su actividad biológica, lo que no sucede a 25 °C donde más de 50 por ciento de la proteína es biológicamente inactiva

The effect of short-wavelength ultraviolet light on antigens, lection receptors and the ultraestructure of Crithidia fasciculata

Crithidia fasciculata is an important trypanosomatid parasite commonly affecting insects and is used extensively as a model for the study of the biochemistry, ultrastructure and organization of the kDNA network of trypanosomatids. The present study describes the evolution of UV-induced morphological changes detectable by transmission electron microscopy in Crithidia fasciculata. Although only rare and minor changes in Kinetoplast DNA were demonstrable 7 h after UV irradiation, alterations of this orgtanelle were present in almost al flagellates observed 24 h and 48 h after irradiation. Other cell structures were apparently undamaged. Ultrastructural changes in kDNA did not correspond to changes in antigenicity of protein bands in western blotting against serum from Chagas' disease patients or in the presence of 3 different lectin receptors on the surface of the parasite