Purification, partial characterization and role in lipid transport to developing oocytes of a novel lipophorin from the cowpea weevil, Callosobruchus maculatus

Lipid transport in arthropods is achieved by highly specialized lipoproteins, which resemble those described in vertebrate blood. Here we describe purification and characterization of the lipid-apolipoprotein complex, lipophorin (Lp), from adults and larvae of the cowpea weevil Callosobruchus maculatus. We also describe the Lp-mediated lipid transfer to developing oocytes. Lps were isolated from homogenates of C. maculatus larvae and adults by potassio bromide gradient and characterized with respect to physicochemical properties and lipid content. The weevil Lp (465 kDa) and larval Lp (585 kDa), with hydrated densities of 1.22 and 1.14 g/mL, contained 34 and 56 percent lipids and 9 and 7 percent carbohydrates, respectively. In both Lps, mannose was the predominant monosaccharide detected by paper chromatography. SDS-PAGE revealed two apolipoproteins in each Lp with molecular masses of 225 kDa (apolipoprotein-I) and 79 kDa (apolipoprotein-II). The lipids were extracted and analyzed by thin-layer chromatography. The major phospholipids found were phosphatidylserine, phosphatidylcholine and phosphatidylethanolamine in adult Lp, and phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine and sphingomyelin in larval Lp. Hydrocarbons, fatty acids and triacylglycerol were the major neutral lipids found in both Lps. Lps labeled in the protein moiety with radioactive iodine (125I-iodine) or in the lipid moiety with fluorescent lipids revealed direct evidence of endocytic uptake of Lps in live oocytes of C. maculatus.

Lipoproteína (a) y otros factores de riesgo en niños chilenos con diabetes mellitus tipo I / Lipoprotein (a) and other risk factors in chilean children with diabetes mellitus type I

Aims- To study serum Lp(a) levels and other metabolic cardiovascular risk factors in children with type I diabetes mellitus (DM) in comparison with sex and age matched nondiabetic children. To determine the influence of diabetes control on serum lipoprotein (a) concentrations. Design- Transversal observational study. Target population: diabetic group: 70 type I DM children with microalbuminuria and no macro-microvascular nor neurological complications, aged from 8 to 15 years; 30 boys, 40 girls. Mean duration of type I DM was 8 ñ 4 years. Non diabetic group: composed by 123 healthy children with no family history of DM, aged from 8 to 15 years, 53 boys, 70 girls. Methods- The lipids profile include: total cholesterol (TC) and triglyceride (TG), cholesterol high-density lipoproteins (C-HDL) cholesterol very-low-density lipoproteins (C-LDL) and cholesterol low-density lipoproteins (C-LDL). ApoAI, APOAII and ApoB, Lp(a) and fructosamine. Results- Fructosamine concentration in diabetic children was 340 ñ 108 uM/1 in 240 ñ 25 uM/I nondiabetic children. Lp(a) serum levels did not significantly differ among both groups 17 ñ 16 mg/dl in diabetics 19 ñ 18 mg/dl in controls. Multivariate analysis showed that in the diabetic children the worsening of metabolic control as reflected by fructosamine, was positively correlated with the increase in total Lp(a) serum concentration. Conclusions- In children aged 8-15 years with uncomplicated IDDM lasting less than 15 years duration (Lp(a) serum levels are positively correlated with the poorest metabolic control

Lipophorin as a lipid carrier in the hemolymph of the horseshoe crab, Limulus polyphemus

A high-density lipoprotein (HDL) was obtained from the hemolymph of Limulus polyphemus in yields generally less than 30 micrograms/ml by ultracentrifugal flotation. SDS-PAGE revealed two apolipoproteins with masses similar to those of apolipophorins (apoLp-I, 265 +/- 14 kDa; apoLp-II, 89 +/- 6 kDa). Lipid composition was different from both insect lipophorin and crustacean HDL, and showed less diacylglycerols than triacylglycerols (3.8 and 36.2 of total lipids, respectively). Since Limulus polyphemus is closely related to precambrian chelicerates, our results confirm that lipophorin was present early in the evolution of arthropods.

Partículas lipoproteicas: concepto, aislamiento e implicancias clínicas / Lipoprotein particles: concept, isolation and clinical significance

La utilización de la cromatografía de afinidad con concanavalina A o de cromatografía de inmunoafinidad con anticuerpos anti apoB permite obtener dos grupos de lipoproteínas: las que contienen apoA y las que contienen apoB. El subfraccionamiento por cromatografía de inmunoafinidad secuencial de las partículas lipoproteicas que contienen apoA permite obtener a su vez tres mayores partículas lipoproteicas: LP-A-I, LP-A-I:A-II y LP-A-II. El subfraccionamiento a través de inmunoprecipitación secuencial o cromatografía de inmunoafinidad secuencial de las partículas lipoproteicas que contienen apoB permite obtener cinco mayores grupos de partículas: LP-B, LP-B:C, LP-B:E, LP-B:C:E y LP-A-II:B. La diferencia entre normo e hiperlipoproteinémicos sería el resultado de cambios cuantitativos (y no cualitativos) de las partículas lipoproteicas. En hipercolesterolémicos se destaca un aumento de LP-B en tanto que en hipertrigliceridémicos aumentan la LP-B-C y LP-B:C:E. Las drogas hipolipemiantes, independientemente de su mecanismo de acción, afectan en diferentes sentidos las concentraciones de las partículas lipoproteicas que contienen apoA y apoB. Bajas concentraciones de LP-A-I y elevadas de LP-B:C y LP-B:C:E se asocian con riesgo aterogénico

Bioquímica del ciclo evolutivo del Triatoma infestans (vinchuca): X. Lipoproteinas hemolinfáticas de hembras / Biochemistry of the evolutive cycle of Triatoma infestans (venchuca): X. Hemolymph lipoproteins of females

En la hemolinfa de Triatoma infestans hembras se separaron por ultracentrifugación una lipoproteína de alta densidad, HDL y tres de muy alta densidad, VHDL-I, VHDL-f y VHDL-II. La proporción de lípidos es mayor en HDL y la de proteínas en VHDL-II. En todas las lipoproteínas se reconoció la presencia de 1,2 y 1,3-diacilgliceroles, triacilgliceroles, ácidos grasos libres, colesterol, ésteres de colesterol e hidrocarburos. Entre los fosfolípidos se reconocieron la fosfatidilcolina y fosfatidiletanolamina. Los lípidos mayoritarios fueron fosfolípidos, 1,2 y 1,3-diacilgliceroles e hidrocarburos. Para estudiar las correspondientes apoliproteínas se deslipidizaron las lipoproteínas. Se examinaron por electroforesis en gel de poliacrilamida con SDS en presencia de 2-mercaptoetanol. Las apo-HDL se separaron en 4 bandas polipeptídicas intensas de PM aproximados 19 000, 45 000, 86 000 y 200 000. Las apo-VHDL-I fraccionaron en 3 bandas polipeptídicas, una mayoritaria de PM 18 500 y dos débiles de 28 000 y 45 000. Las apo-VHDL-f que sólo aparecen en hembras se separaron en 10 bandas. Las mayoritarias correspondieron a los PM 58 000, 86 000 y 160 000. Las bandas de 58 000 y 160 000 presentaron reacción positiva de hidratos de carbono. En las apo-VHDL-II las subunidades proteicas más intensas correspondieron a las bandas de PM 86 000 y 160 000. Aparentemente, estas cuatro lipoproteínas tendrian dos cadenas polipeptídicas comunes

Bioquímica del ciclo evolutivo del Triatoma infestans (Vinchuca): VIII. Estudio preliminar de las apolipoproteinas hemolinfáticas de machos adutos / Biochemistry of the evoluation of Triatoma infestans (Vinchuca): VIII. Preliminary study of hemolymph apolipoproteins of adult males

Las tres lipoproteínas de alta (HDL) y muy alta densidad (VHDL-I y VHDL-II) fueron separadas de la hemolinfa de machos adultos de T. infestans. Ellas fueron deslipidizadas y las correspondientes apolipoproteínas se examinaron por electroforesis en gel de dodecil sulfato sodio en poliacrilamida en presencia de 2-mercapto-etanol. Luego, fueron separadas por enfoque isoelétrico en un gradiente de pH de 5 a 8. Los tres grupos de apolipoproteínas fueron separados en varias cadenas polipeptídicas, las que tenían en común una unidad glicoproteica de peso molecular 86 000. Las VHDL-II presentaron la composición más simple, con predominio de una banda de 86 000. La apo-HDL fue la más complicada y mostró bandas intensas con peso molecular tan alto como 210 000 y tan bajo como 17 000, conjuntamente con bandas de 44 000 y 86 000 y otras de menor intensidad. La apo-VHDL-I se separó en cadenas polipeptídicas en el rango de 86 000 a 17 000. Aparentemente, las distintas apoproteínas están formadas por la asociación, al menos en parte, de polipéptidos comunes