A light- and electron microscopic study of primordial germ cells in the zebra fish (Danio rerio)

In sexually reproducing organisms, primordial germ cells (PGCs) give rise to the cells of the germ line, the gametes. In many animals, PGCs are set apart from somatic cells early during embryogenesis. This study explores the origin of primordial germ cells (PGCs) of the zebra fish and examines their morphology during early development (1st day-15th day). PGCs were selectively stained by the alkaline phosphatase histochemical reaction and viewed by light and electron microscopy from the time they are first detectable in the yolk sac endoderm. PGCs occurred in the subendodermal space on the syncytial periblast; differing from the surrounding endodermal cells. Later the PGCs moved to between the blastoderm and yolk sac and transferred to the dorsal mesentery where they formed gonadal anlage with mesoderm cells. PGCs were easily distinguished from somatic cells by their morphology and low electron density of their nuclei. Under light microscopy, PCGs were rounded with a distinct cytoplasmic membrane.

Assessment of the degree of contamination of rat germ cell preparations using specific cDNA probes

Recent reports showing a decrease in sperm count in men have brought new concerns about male infertility. Animal models have been widely used to provide some relevant information about the human male gamete, and extrapolations are made to men and to the clinical context. The present study assesses one of the methods us for separation of germ cells of the adult rat testis, namely centrifugal elutriation followed by density gradients (Percoll(). This method was chosen since it presents the best results for cell purity in separating germ cells from the rat testis. A comparison between continuous and discontinuous Percoll( gradients was performed in order to identify the best type of gradient to separate the cells. Maximal cell purity was obtained for spermatocytes (81 ñ 8.2 per cent, mean ñ SEM) and spermatids (84 ñ 2.6 per cent) using centrifugal elutriation followed by continuous Percoll( gradients. A significant difference in purity was observed between elongating spermatids harvested from continuous Percoll( gradients and from discontinuous gradients. Molecular analysis was used to assess cell contamination by employing specific probes, namely transition protein 2 (TP2), mitochondrial cytochrome C oxidase II (COX II), and sulfated glycoprotein 1 (SGP1). Molecular analysis of the samples demonstrated that morphological criteria are efficient in characterizing the main composition of the cell suspension, but are not reliable for identifying minimal contamination from other cells. Reliable cell purity data should be established using molecular analysis.

Light and electron microscopic study of germ cells of the rainbow trout (oncorhynchus mykiss)

El objetivo de este trabajo es describir las características morfológicas de las células germinales de la trucha arcoiris Oncorhynchus mykiss, durante los estados pregonádico, gonádico y gónada tempranamente diferenciada. Las células germinales primordiales se identificaron en los embriones de 11-35 días postfecundación (125-300ºD), correspondiendo al estado pregonádico. Son células grandes con un núcleo voluminoso y pálido. El citoplasma tiene un volumen mínimo y aparece homogéneo con ribosomas y mitocondrias distribuidas regularmente. También se presentan gránulos oscuros, semejantes a inclusiones vitelinas. El esbozo gonádico se forma a los 40 días postfecundación (400ºD) y la diferenciación de la gónada, en ovario o testículo, se inicia a los 150 días (1500ºD). La estructura ovárica, al inicio de la diferenciación, presenta oocitos rodeados por células prefoliculares. El testículo tempranamente diferenciado se identifica por la presencia de acúmulos de espermatogonias dispuestos en cistos. El estudio que se presenta contribuye a mejorar la caracterización de las células germinativas de la trucha arcoiris y también entregar información respecto a la cronología de los estados principales de la diferenciación gonadal, en embriones y alevines mantenidos a una temperatura constante de 10ºC

Evaluación morfologia de las uniones intercellulares en el ovario del embrión de pollo: acción de hormonas esteroideas y gonadotroficas in vitro / Morphological evaluation of intercellular junctions in the ovary of chick embryos: action of steroid and gonadotropic hormones in vitro

Se determinaron las variaciones de las uniones intercelulares de las células germinales y epiteliales en el epitelio ovárico producidas por hormonas gonadotróficas y esteroideas sobrelos ovarios del embrión de pollo a los 7 días de desarollo. Se cultivaron explantos de ovarios derecho e izquierdo Sin (controles) y con adición de hormonas (experimental durante 4 días. Los cultivos fueron procesados para su estudio ultraestructural (MET). En ambos ovarios controles los complejos de unión eran similares a los identificados in ovo. En el ovario izquierdo se observó aumento y mayor desarollo de las uniones adherens y desmosomas; en el ovario derecho los mismos disminuyeron por acción de 17 Beta-estradiol. La respuesta del ovario izquierdo a la progesterona y testoterona fue similar a la obtida con estrógeno. En la gónada derecha no se observaron cambios. En ambos ovarios se produjo una dismunucíon de las uniones intercelulares por accíon de FSH. Los cambios producidos por LH y hCG fueron semejantes a los encontrados en el ovario izquierdo por efecto del estrógeno, consistentes en un incremento de los complejos de uníon, principalmente los de tipo adherens. Estos análisis indican que las hormonas esteroideas y gonadotróficas actúan modificando las uniones intercelulares y participarían en los procesos de crecimiento y atrofia que ocurren en los ovarios del embríon de pollo.