Hybrid & El Tor variant biotypes of Vibrio cholerae O1 in Thailand.

Background & objectives: El Tor Vibrio cholerae O1 carrying ctxBC trait, so-called El Tor variant that causes more severe symptoms than the prototype El Tor strain, first detected in Bangladesh was later shown to have emerged in India in 1992. Subsequently, similar V. cholerae strains were isolated in other countries in Asia and Africa. Thus, it was of interest to investigate the characteristics of V. cholerae O1 strains isolated chronologically (from 1986 to 2009) in Thailand. Methods: A total of 330 V. cholerae O1 Thailand strains from hospitalized patients with cholera isolated during 1986 to 2009 were subjected to conventional biotyping i.e., susceptibility to polymyxin B, chicken erythrocyte agglutination (CCA) and Voges-Proskauer (VP) test. The presence of ctxA, ctxB, zot, ace, toxR, tcpAC, tcpAE, hlyAC and hlyAE were examined by PCR. Mismatch amplification mutation assay (MAMA) - and conventional- PCRs were used for differentiating ctxB and rstR alleles. Results: All 330 strains carried the El Tor virulence gene signature. Among these, 266 strains were typical El Tor (resistant to 50 units of polymyxin B and positive for CCA and VP test) while 64 had mixed classical and El Tor phenotypes (hybrid biotype). Combined MAMA-PCR and the conventional biotyping methods revealed that 36 strains of 1986-1992 were either typical El Tor, hybrid, El Tor variant or unclassified biotype. The hybrid strains were present during 1986-2004. El Tor variant strains were found in 1992, the same year when the typical El Tor strains disappeared. All 294 strains of 1993-2009 carried ctxBC ; 237 were El Tor variant and 57 were hybrid. Interpretation & conclusions: In Thailand, hybrid V. cholerae O1 (mixed biotypes), was found since 1986. Circulating strains, however, are predominantly El Tor variant (El Tor biotype with ctxBC).

Determinación del origén clonal de aislamientos colombianos de Vibrio cholerae / Determination of the clonal origin of Vibrio cholerae 01 Colombian isolations

Colombia ha sido uno de los países afectados por la epidemia de cólera que se inició en el Perú en 1991 y a la fecha se han informado al Ministerio de Salud un total de 37.799 casos clínicos ocasionados por Vibrio cholerae 01, biotipo El Tor. Actualmente, la aplicación de un gran número de técnicas de biología molecular en el área de la microbiología ha permitido tipificar aislamientos de agentes infecciosos para realizar estudios epidemiológicos. algunas de estas técnicas han sido empleadas en el estudio del agente del cólera con el fin de determinar su origen molecular. Durante 1994 se ribotipificaron 173 aislamientos colombianos de V. cholerae 01 y se observó la presencia de 3 ribotipos, el ribotipo B5 o 5, en 165 aislamientos (95, 4 por ciento), el ribotipo B21, en 2 aislamientos (1,1 por ciento) y un nuevo ribotipo denominado B20, en 6 aislamientos (3.5 por ciento). Sólo el ribotipo B5 había sido descrito como característico de la epidemia Latino Americana. Con base en éstos resultados, se realizó este estudio, con el fin de determinar el origen clonal o múltiple de los aislamientos colombianos de V. cholerae 01. Se estudiaron 204 aislamientos, recuperados de 1991 a 1997, se determinaron las características fenotípicas (serotipo y biotipo) y genotípicas, con el empleo de la ribotipificación y el ADN polimórfico amplificado al azar (RAPD) con dos inciciadores. Todos los aislamientos se identificaron como V. cholerae, 01 biotipo el Tor 84(41.2 por ciento) aislamientos serotipo Inaba y 120 (58,8 por ciento) Ogawa. A nivel molecular todos los aislamientos fueron ribotipo 5 y el ADN polimórfico amplificado al azar determinó 4 diferentes patrones para el iniciador 1 (A, B, C, y D) y 3 patrones con el iniciador 3 (A, B y C). Sin embargo, el patrón A, con ambos iniciadores, se observó en el 84,4 por ciento de los aislamientos y con una distribución geográfica amplia, Los otros patrones presentaron baja frecuencia y algunos de ellos fueron restringidos geográficamente. Los resultados obtenidos permiten concluir, que los aislamientos colombianos de V. cholerae 01 tienen un origen clonal único, pero que posiblemente, se han presentado pequeñas alteraciones genéticas en el clon, las cuales permiten expresar patrones diferentes. Se podría explicar así que la variación genética expresada en los ribotipos B20 y B21 ha sido de muy baja frecuencia. Por esa razón, la vigilancia epidemiológica debe reforzarse con el empleo de técnicas moleculares

Vacunas contra el cólera / Vaccines against cholera

El cólera es una enfermedad aguda e infecciosa que fue descrita antes de la época de Hipócrates en el siglo V AC. Se describieron varias epidemias de esta enfermedad en Asia entre los siglos XV y XVIII. A mediados del siglo XIX John Snow en Inglaterra fue el primero en describir las medidas de prevención de la enfermedad a raíz de una epidemia ocurrida en Londres. En 1883, Robert Koch realizó el descubrimiento del agente causal, Vibrio cholerae, un bacilo curvo de gran movilidad. Durante los siglos XIX y XX han ocurrido siete pandemias de cólera; en la actualidad ocurre la transmisión de la séptima. El cólera es una de las causas más importantes de morbilidad y mortalidad de algunos países de Asia y Africa y desde 1991 también en Latinoamérica. Desde principios del siglo se ha empleado una vacuna parenteral elaborada con una cepa de V. cholerae 01, inactivada con calor, la cual únicamente induce 50 por ciento de protección en jóvenes y adultos, durante un período de aproximadamente 6 meses. El empleo de adyuvantes no ha tenido influencia en su eficiencia, sino por el contrario incrementa las reacciones colaterales. Las perspectivas para el desarrollo de una vacuna eficaz contra el cólera se basan en el hecho de que más del 90 por ciento de los sujetos infectados en forma natural quedan protegidos para una segunda reinfección. El avance del desarrollo de las vacunas del cólera se ha podido efectuar gracias a un mejor conocimiento de los mecanismos de patogenicidad y antigenicidad del agente etiológico, aunque persisten incógnitas importantes. La vacuna ideal contra el cólera debería ser tan eficaz como la infección natural, sin riesgo de causar enfermedad infecciosa, de fácil administración, de bajo costo, de una sola dosis, inocua, que proteja contra la infección y obviamente contra la enfermedad grave, con protección de larga duración y probablemente de administración oral