Immunogenicity of Streptococcus equi subsp. equi recombinant SeM protein and bacterin in mice / Imunogenicidade da proteína recombinante SeM de Streptococcus equi subsp. equi e da bacterina em camundongos

The infection caused by Streptococcus equi, known as strangles, affects the respiratory system of horses, causing high morbidity and rapid spread among the herd. Bacterin vaccines, composed of inactivated whole cells of S. equi, have variable efficacy and duration. Infected animals produce specific antibodies against SeM, the immunodominant antigen of S. equi. This makes it a promising target for vaccine development. In this context, the objective of this work was to evaluate a vaccine combining S. equi bacterin and recombinant SeM protein. Mice were vaccinated with bacterin (S. equi ~1.2 × 108CFU/ml); rSeM protein (20μg); bacterin-rSeM combination; or PBS (Control Group) and challenged with a suspension of S. equi, containing 10 × LD50. All vaccinated mice survived the challenge and produced anti-rSeM and anti-S. equi antibodies, which were assessed by indirect ELISA. The Control Group reached endpoint criteria 96 h after infection. These results demonstrate that a vaccine combining the S. equi bacterin with rSeM protein protects mice against strangles. This combination vaccine could potentially protect horses and overcome the limitations of currently available strangle vaccines.(AU)

A infecção causada por Streptococcus equi, denominada adenite, atinge o sistema respiratório de equinos, causando alta morbidade e rápida disseminação entre o rebanho. Vacinas bacterinas, compostas de células inteiras inativadas de S. equi apresentam eficácia e duração variáveis. Animais infectados apresentam anticorpos específicos à proteína SeM, antígeno imunodominante de S. equi, o que a torna um alvo promissor para o desenvolvimento de vacinas. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar uma vacina baseada na administração simultânea da bacterina e da proteína SeM recombinante. Camundongos foram vacinados com a bacterina (S. equi ~1.2 × 108CFU/ml); a proteína rSeM (20μg); a bacterina e rSeM simultaneamente; ou PBS (Grupo Controle) e, posteriormente, foram desafiados com uma suspensão de S. equi contendo 10 × LD50. Todos os animais vacinados apresentaram anticorpos anti-rSeM e contra S. equi, avaliados através de ELISA indireto, e mantiveram-se e sobreviveram ao desafio letal. O Grupo Controle atingiu critérios de endpoint 96 h após a infecção. Estes resultados demonstram que uma vacina constituída de células inteiras de S. equi com rSeM protege camundongos contra adenite, sugerindo a capacidade de proteção a equinos e, possivelmente, superando as limitações das vacinas contra adenite atualmente disponíveis.(AU)

Methanolic extract of Rhinella schneideri (Anura: Bufonidae) poison causes ultrastructural changes in nerve terminals of phrenic nerve-diaphragm preparations in mice / Extracto metanólico de Rhinella schneideri (Anura: Bufonidae) causa cambios ultraestructurales en las terminaciones nerviosas de preparaciones de nervio frénico de ratón

Abstract Rhinella schneideri (or Bufo paracnemis), popularly known in Brazil as cururu toad, is also found in other countries in South America. The cardiovascular effects of this poison are largely known and recently was shown that it is capable to affect the neuromuscular junction on avian and mice isolated preparation. In this work, we used transmission electron microscopy to investigate the ultrastructure of the motor nerve terminal and postsynaptic junctional folds of phrenic nerve-hemidiaphragm preparations incubated for either 5 or 60 min with the methanolic extract of R. schneideri (50 µg/mL). In addition, the status of the acetylcholine receptors (AChR) was examined by TRITC-α-bungarotoxin immunofluorescence location at the endplate membrane. The results show that 5 min of incubation with the gland secretion extract significantly decreased (32 %) the number of synaptic vesicles into the motor nerve terminal, but did not decrease the electron density on the top of the junctional folds where nicotinic receptors are concentrated; however, 60 min of incubation led to significant nerve terminal reloading in synaptic vesicles whereas the AChR immunoreactivity was not as marked as in control and after 5 min incubation. Muscle fibers were well-preserved but intramuscular motor axons were not. The findings corroborated pharmacological data since the decrease in the number of synaptic vesicles (5 min) followed by recovery (60 min) is in accordance with the transient increase of MEPPs frequency meaning increased neurotransmitter release. These data support the predominant presynaptic mode of action of the R. schneideri, but do not exclude the possibility of a secondary postsynaptic action depending on the time the preparation is exposed to poison. Rev. Biol. Trop. 66(3): 1290-1297. Epub 2018 September 01.

Resumen Rhinella schneideri (o Bufo paracnemis), conocido popularmente en Brasil como sapo cururu, también se encuentra en otros países de América del Sur. Los efectos cardiovasculares de este veneno son ampliamente conocidos y recientemente se demostró que es capaz de afectar la unión neuromuscular en la preparación aislada de aves y ratones. En este trabajo, utilizamos microscopía electrónica de transmisión para investigar la ultraestructura de la terminación nerviosa motora y pliegues de unión postsináptica de preparaciones de nervio frénico-hemidiafragma incubadas durante 5 o 60 min con el extracto metanólico de R. schneideri (50 μg/mL). Además, se examinó el estado de los receptores de acetilcolina (AChR) mediante la ubicación de inmunofluorescencia de TRITC-α-bungarotoxina en la membrana de la placa terminal. Los resultados muestran que 5 min de incubación con el extracto de secreción de glándula disminuyeron significativamente (32 %) el número de vesículas sinápticas en el terminal del nervio motor, pero no disminuyeron la densidad electrónica en la parte superior de los pliegues de unión donde se concentran los receptores nicotínicos. Sin embargo, 60 min de incubación condujeron a una recarga significativa de los terminales nerviosos en las vesículas sinápticas, mientras que la inmunorreactividad del AChR no fue tan marcada como en el control y después de 5 min de incubación. Las fibras musculares estaban bien conservadas, pero los axones motores intramusculares no. Los hallazgos corroboraron los datos farmacológicos ya que la disminución en el número de vesículas sinápticas (5 min) seguida de recuperación (60 min) está de acuerdo con el aumento transitorio de la frecuencia de MEPPs, lo que significa una mayor liberación de neurotransmisores. Estos datos apoyan el modo de acción presináptico predominante de R. schneideri, pero no excluyen la posibilidad de una acción postsináptica secundaria dependiendo del tiempo en que la preparación esté expuesta al veneno.

Infection of sparrows (Passer domesticus) and different mice strains with Lawsonia intracellularis / Infecção de pardais (Passer domesticus) e diferentes linhagens de camundongos com Lawsonia intracellularis

The susceptibility of sparrows (Passer domesticus) and strains of mice (Swiss, BALB/c, C-57 and DB-A) to Lawsonia intracellularis infection was studied. Thirty-two sparrows were inoculated with pure culture of L. intracellularis and eleven received sham inoculum. Feces were collected on -1, 7, 14 and 21 days post infection (dpi) for detection of L. intracellularis by PCR. After 21 days, all sparrows were euthanized and the tissues processed for histology and immunohistochemistry (IHC). One hundred sixty mice of four different strains (n=40, per strain) were used. For each mouse strain, 16 animals received mucosa homogenate from a pig infected with L. intracellularis, 16 received pure culture of L. intracellularis and eight animals received sham inoculum. Two control and four inoculated mice from each group were euthanized on 7, 14, 21 and 28 dpi. Sections of intestine were collected for histologic analysis and IHC and pooled feces were collected for L. intracellularis PCR. None of the sparrows had any histologic lesions characteristic of proliferative enteropathy or antigen labeling by IHC. All sparrow fecal samples were negative by PCR. All mice strains studied had histopathological lesions typical of PE and IHC labeling consistent with L. intracellularis infection, especially those animals inoculated with pure culture. The most severe lesions were observed in DB-A and Swiss mice. Fecal shedding was detected in all mice strains, with peak at 14 dpi. We conclude that sparrows do not seem to be relevant in the epidemiology of L. intracellularis. The results showed variations in the lesions among the four mice strains used.

A susceptibilidade de pardais (Passer domesticus) e linhagens de camundongos (Swiss, BALB / C, C-57 e DB-A) à infecção por L. intracellularis foi testada. Trinta e dois pardais foram inoculados com cultura pura de L. intracellularis e onze receberam placebo. As fezes foram coletadas nos dias -1, 7, 14 e 21 após a infecção (dpi) para a detecção de Lawsonia intracellularis por PCR. Após 21 dias, todos os pardais foram eutanasiados e os tecidos processados para a realização da histologia e imuno-histoquímica (IHQ). Cento e sessenta camundongos de quatro linhagens diferentes (n=40, por linhagem) foram utilizados. Para cada linhagem de camundongo, 16 receberam homogeneizado de mucosa preparado a partir de um suíno infectado com L. intracellularis, 16 receberam cultura pura de L. intracellularis e oito animais receberam placebo. Dois camundongos controle e quatro camundongos inoculados de cada grupo foram sacrificados aos 7, 14, 21 e 28 dpi. Seções de intestino foram coletadas para análise histológica e IHQ e amostras de fezes foram coletadas para a realização da PCR para detecção de L. Intracellularis. Nenhum dos pardais apresentou lesões histológicas características da enteropatia proliferativa ou marcação positiva por meio da IHQ. As amostras de fezes dos pardais foram negativas na PCR. Todas as linhagens de camundongos estudadas tinham lesões histopatológicas típicas de enterite proliferativa e IHQ positiva para a infecção por L. intracellularis, especialmente aqueles animais inoculados com a cultura pura. As lesões mais graves foram observadas em camundongos DB-A e Swiss. A eliminação fecal foi detectada em todas as linhagens de camundongos, com pico 14 dpi. Conclui-se que os pardais não são relevantes na disseminação da L. intracellularis. Os resultados mostraram variações nas lesões entre as quatro linhagens de camundongos utilizadas, indicando o potencial risco que os camundongos representam na transmissão de L. Intracellularis.

Microbial pathogens in ticks, rodents and a shrew in northern Gyeonggi-do near the DMZ, Korea

A total of 1,618 ticks [420 individual (adults) and pooled (larvae and nymphs) samples], 369 rodents (Apodemus arius, Rattus norvegicus, Tscherskia triton, Mus musculus, and Myodes regulus), and 34 shrews (Crocidura lasiura) that were collected in northern Gyeonggi-do near the Demilitarized Zone (DMZ) of Korea during 2004-2005, were assayed by PCR for selected zoonotic pathogens. From a total of 420 individual and pooled tick DNA samples, Anaplasma (A.) phagocytophilum (16), A. platys (16), Ehrlichia (E.) chaffeensis (63), Borrelia burgdorferi (16), and Rickettsia spp. (198) were detected using species-specific PCR assays. Out of 403 spleens from rodents and shrews, A. phagocytophilum (20), A. platys (34), E. chaffeensis (127), and Bartonella spp. (24) were detected with species-specific PCR assays. These results suggest that fevers of unknown causes in humans and animals in Korea should be evaluated for infections by these vector-borne microbial pathogens.

Leptospirosis en mus musculus: aislamiento y serología / Leptospirosis in mus musculus: isolation and serology

En Febrero y Junio de 1989, se realizó el estudio bacteriológico y serológico en 22 roedores de la especie Mus musculus, capturados vivos en viviendas y locales de diversas zonas de Lima y Callao, mediante trampas especialmente diseñadas para tal fin. En la preparación directa del tejido renal y orina al microscopio de campo oscuro, se observaron Leptospiras en 7 (31 por ciento) roedores. Del cultivo del tejido renal de un especimen hembra, en medio de Korthof modificado, se aisló una cepa de Leptospira, con cepa de referencia MV-1 y clasificada por reacción cruzada de aglutinación microscópica dentro del serogrupo Pomona. Se determinaron anticuerpos mediante la RAM frente a 17 serovars vivos de Leptospira, obteniendose 10 (45 por ciento) sueros positivos con títulos > ó = 1:20, de los cuales 8 (36 por ciento) presentaron reacciones multiples a L. celledoni, L. javanica, L. australia, L. andamana, L. pomona, L. grippotyphosa, L. patoc y 2 (9 por ciento) a L. andamana y L. celledoni respectivamente. Los reportes en el Perú sobre aislamientos y presencia de anticuerpos en roedores que frecuentan las viviendas o locales de trabajo, como Mus musculus, son muy raros, por lo que se desconoce su real implicancia en el mantenimiento de la cadena epidemiológica de la leptospirosis en zonas urbanas.

Algunos aspectos de la bacteriología de Mycobnacterium leprae / Some aspects regarding Mycobacterium leprae bacteriology

Se brinda una información de algunos aspectos de la baceteriología de Mycobacterium leprae, a través de la historia del descubrimiento del agente causal, sus características, estructura, modelos experimentales (ratón y armadillo), antígenos carbohidratos y genética

Viabilidad y patogenicidad experimental de nocardia caviae y nocardia brasiliensis conservadas en agua según Castellani / Experimental pathogenicity and viability of nocardia brasiliensis and nocardia caviae preservated in water accord Castellani

Se evalúa la viabilidad, pureza y patogenicidad de 6 cepas de N. caviae y 12 de N. brasiliensis mantenidas por el método de castellani modificado (7) durante diferentes períodos de tiempo (6-1/2 hasta 17 años), el la micoteca de la Sección de Micología del Instituto de Medicina Tropical, Universidad Central de Venezuela. El 83,3 por ciento (n=15) de las cepas fueron viables, y de éstas sólo un 40 por ciento (n=6) resultaron patógenas. Estos resultados difieren de aquellos obtenidos con C. neoformans (3) y S. schenckii (datos inéditos enviados a Mycopathology para su publicación) donde se logró enfermar a un 93 por ciento y 100 por ciento de los ratones respectivamente, es decir, conservaron su patogenicidad. El método de Castellani por lo tanto pareciera no ser tan favorable para la conservación de las Nocardias como para los hongos aún cuando mantienen su viabilidad

Modelo de decontaminación `in vivo' para el aislamiento de leptospiras y modificación de los medios de Korthof y Fletcher / Decontamination pattern `in vivo' for the isolation of leptospira and modification of Korthof and Fletcher media

Se realizó un estudio experimental utilizando 100 ratones Swiss de diferentes edades, en la búsqueda de aquellos cuya edad fuera la adecuada para cumplir la función de `filtro vivo'. Cultivos puros de leptospira se obtuvieron en ratones de dos y tres semanas de edad a partir de sangre obtenida por punción cardiaca a los 10, 20 y 30 minutos de postinoculación intraperitoneal con cultivo contaminado. Se modificó la composición de los medios de cultivo Korthof y Fletcher sustituyendo el suero de conejo al 10 por ciento por suero de carnero al 8-10 por ciento inactivado a 56 grados C por 30 minutos para leptospira biflexa y suero total para Leptospira interrogans. La metodología y modificación descrita en ambos procesos para su bajo costo y simplicidad, pueden ser de gran ayuda para el aislamiento de leptospira patógenas o saprofitas a partir de muestras clínicas contaminadas, suelo y agua en los medios modificados

Determinaçäo da dose letal 50 (por cento) para staphylococcus aureus (NCTC 8530) em camundongos portadores de tumor de Ehrlich / Letahl dose 50 (LD50) to Staphylococcus auresus (NCTC 8530) in mice bearing Ehrlich tumor

Resumo:Camundongos normais e portadores de tumor de Ehrich foram infectados com Staphylococcus aureus (NCTC 8530), e a dose letal 50 (DL50) determinada usando-se a análise de probitos. Os resultados demonstraram que para os tempos de 24 a 48 horas, a DL50 foi maior para camundongos portadores do tumor, embora sem significância estatística (au)