Efeito clínico, radiográfico e imunológico do tratamento cirúrgico associado à terapia fotodinâmica com azul de toluidina 0,2% em peri-implantite: estudo clínico randomizado longitudinal de 1 ano / Clinical, radiographic and immunological effects of surgical treatment associated with photodynamic therapy with 0.2% toluidine blue in peri-implantitis: randomized 1-year longitudinal clinical study

O objetivo do presente estudo foi comparar os efeitos clínicos, radiográficos e imunológicos do tratamento cirúrgico para peri-implantite com ou sem terapia fotodinâmica após 1 ano. Participaram deste estudo 21 pacientes com peri-implantite (idade média 56,0 ± DP 9,6 anos). Divididos os grupos em teste e controle de forma randomizada. Foram utilizados os seguintes parâmetros clínicos: profundidade de bolsa à sondagem (PBS); índice de placa visível (IPV)e índice de sangramento à sondagem (ISS). A radiografia periapical foi utilizada como parâmetro radiográfico em baseline e 1 ano. A coleta do fluido periimplantar foi realizada com periopaper e congelada à -70°C para posterior análise. Os biomarcadores do metabolismo ósseo utilizados no fluido periimplantar foram TNF-α, SOST, PTH, OPG, OPN, OC, Leptina, IL-6, IL-1ß FGF-23. Os pacientes de ambos os grupos receberam tratamento periimplantar cirúrgico de acesso para raspagem e no grupo teste foi utilizada a terapia fotodinâmica com azul de toluidida 0,12%, na qual emite uma radiação infravermelha pulsada no comprimento de onda de 2,94 mm. Os parametros do laser foram fixados em 100 mJ / pulso (12,7 J/cm2) e 10 pps (energia de pulso na ponta: cerca de 85 mJ/pulso). Os dados clínicos foram coletados em quatro visitas em ambos os grupos (baseline, 03 meses, 6 meses e 1 ano). Os dados radiográficos e imunológicos foram coletados (baseline e 1 ano). Os biomarcadores foram mensurados por meio de um imunoensaio multiplex. Os resultados mostraram uma redução significativa dos parâmetros clínicos 3 meses após o tratamento, em ambos grupos. No baseline, os valores de PBS 8,5mm ± 0,9, ISS 100%, ISG 100% IPV 100% no grupo controle. Os valores correspondentes do grupo teste foram 8,6mm ± 0,7,100%,100% e 100%). Aos 3 meses as médias de PBS, ISS, ISG e IPV foram 5,7mm ± 0,5, 11%, 100% e 0% no grupo controle e 5,7mm, 8%, 100% e 0% no grupo teste (p<0,05). Esses valores mantiveram-se constantes até os 12 meses de acompanhamento. Aos 12 meses, foi observado uma melhora nos parâmetros ósseo estatisticamente significante no grupo controle (baseline 6,2±1 mm x 12 meses5,7± 0,6 mm) (p = 0,008). No grupo teste houve um ganho ósseo (baseline 6 ±0,8 mm x12 meses 5,9 ± 0,6 mm) (p>0,5). A análise imunológica mostrou uma redução significativa nos níveis de IL6 e OC em ambos os grupos, após 1 ano de tratamento. No entanto, no grupo teste houve uma redução significativa de Leptina (p= 0,05) e uma tendência a uma redução dos níveis de OPN (p= 0,08). Concluindo, a terapia peri-implantar cirúrgica levou a uma melhora significativa dos parâmetros clínicos periimplantares após 1 ano, um ganho ósseo no grupo controle e uma redução de biomarcadores em ambos grupos. O uso adicional da terapia fotodinânima ao acesso cirúrgico não ofereceu resultados superioresaos observados no grupo somente com acesso cirúrgico(AU)

The aim of the present study was to evaluate the clinical, radiographic and immunological effects of surgical treatment for peri-implantitis after 1 year. Twenty-one patients with peri-implantitis participated in this study (mean age 56.0 ± SD 9.6 years). Patients were divided into a test and control group at random. The following clinical parameters were used: probing depth (PS); plaque index (PI)and probing bleeding index (BOP). Periapical radiography was used as a baseline and 1-year radiographic parameter. Peri-implant fluid samples were collected with periopaper and frozen at -70° C for further analysis. Bone metabolism biomarkers included TNF-α, SOST, PTH, OPG, OPN, OC, Leptin, IL-6, IL-1ß FGF-23. Patients in both groups received peri-implant surgical treatment for scaling. The test group underwent a photodynamic therapy with 0.2% toluidide blue, in which pulsed infrared radiation is emitted at a wave length of 2.94 mm. The laser parameters were set at 100 mJ/pulse (12.7 J/cm2) and 10 pps (pulse energy at the tip: about 85 mJ/pulse). Clinical data were collected in four visits in both groups (baseline, 3 months, 6 months and 1 year). Radiographic and immunological data were collected (baseline and 1 year). Biomarkers were measured using a multiplex immunoassay. The results showed a significant reduction in clinical parameters 3 months after treatment, in both groups. In the baseline, the control group presented the values of PBS 8.5 mm ± 0.9, ISS 100%, ISG 100% VPI 100%, while the test group presented PBS 8.6 mm ± 0.700%, ISS 100% and ISG 100% After 3 months, the average values of PBS, ISS, ISG and VPI were 5.7 mm ± 0.5, 11%, 100% and 0% in the control group and 5.7 mm, 8%, 100% and 0% in the test group ( p <0.05). These values remained constant until the 12-month follow-up, at which point a statistically significant bone gain was observed in the control group (baseline 6.2 ± 1 mm x 12 months 5.7 ± 0.6 mm) (p = 0.008). In the test group there was a bone gain (baseline 6 ± 0.8 mm x 12 months 5.9 ± 0.6 mm) (p> 0.5). The immunological analysis showed a significant reduction in the levels of IL6 and OC in both groups, after 1 year of treatment. However, in the test group there was a significant reduction in Leptin (p = 0.05) and a tendency towards a reduction in OPN levels (p = 0.08). In conclusion, peri-implant surgical therapy led to a significant improvement in peri-implant clinical parameters after 1 year, a bone gain in the control group, and a reduction in biomarkers in both groups. The additional use of photodynamic therapy for surgical treatment in the test group did not present superior results to those observed in the control group(AU)

The susceptibility of Streptococcus mutans to antibacterial photodynamic therapy: a comparison of two different photosensitizers and light sources

Streptococcus mutans is the main etiological agent for dental caries. Recently, photodynamic therapy (PDT) has been introduced as a new modality in bacterial decontamination. Objective: This in vitro study was carried out to evaluate the susceptibility of Streptococcus mutans to antibacterial PDT using two different photosensitizers and light sources. Material and Methods: Standard suspensions of S. mutans were exposed to laser light at 662 nm and Radachlorin® or LED 630 nm in combination with Toluidine blue O (TBO). Radiation-only groups, photosensitizer alone, and groups with no treatment were used as controls. Bacterial suspension from each treatment was subcultured onto the surface of Mueller-Hinton agar plates and bacterial growth was assessed. The results were analyzed by analysis of variance and Tukey test (p<0.05). Results: PDT with TBO and Radachlorin® significantly reduced S. mutans viability, whereas no difference was observed between two groups of PDT. In the groups treated just with the photosensitizer or irradiated alone, no significant reduction of S. mutans colonies was observed. Conclusion: S. mutans colonies were susceptible to either 662 nm laser or LED light in the presence of Radachlorin® and TBO respectively with no priority. .

Phototoxic action of light emitting diode in the in vitro viability of Trichophyton rubrum / Ação fototóxica do diodo emissor de luz na viabilidade de Trichophyton rubrum in vitro

BACKGROUND: Trichophyton rubrum is the most common agent of superficial mycosis of the skin and nails causing long lasting infections and high recurrence rates. Current treatment drawbacks involve topical medications not being able to reach the nail bed at therapeutic concentrations, systemic antifungal drugs failing to eradicate the fungus before the nails are renewed, severe side effects and selection of resistant fungal isolates. Photodynamic therapy (PDT) has been a promising alternative to conventional treatments. OBJECTIVES: This study evaluated the in vitro effectiveness of toluidine blue O (TBO) irradiated by Light emitting diode (LED) in the reduction of T. rubrum viability. METHODS: The fungal inoculums' was prepared and exposed to different TBO concentrations and energy densities of Light emitting diode for evaluate the T. rubrum sensibility to PDT and production effect fungicidal after photodynamic treatment. In addition, the profiles of the area and volume of the irradiated fungal suspensions were also investigated. RESULTS: A small reduction, in vitro, of fungal cells was observed after exposition to 100 µM toluidine blue O irradiated by 18 J/cm² Light emitting diode. Fungicidal effect occurred after 25 µM toluidine blue O irradiation by Light emitting diode with energy density of 72 J/cm². The analysis showed that the area and volume irradiated by the Light emitting diode were 52.2 mm² and 413.70 mm³, respectively. CONCLUSION: The results allowed to conclude that Photodynamic therapy using Light emitting diode under these experimental conditions is a possible alternative approach to inhibit in vitro T. rubrum and may be a promising new treatment for dermatophytosis caused by this fungus.

FUNDAMENTOS: Trichophyton rubrum é o agente mais comum das micoses superficiais de pele e unhas causando infecções de longa duração e altas taxas de recidiva. As desvantagens do tratamento atual envolvem medicações tópicas as quais não são capazes de alcançar o leito ungueal em concentrações terapêuticas, antifúngicos sistêmicos que não erradicam o fungo antes das unhas serem renovadas, efeitos colaterais graves e seleção de isolados fúngicos resistentes. A terapia fotodinâmica tem sido uma alternativa promissora aos tratamentos convencionais. OBJETIVOS: Este estudo avaliou a eficácia, in vitro, de azul de orto-toluidina irradiado por diodo emissor de luz na redução da viabilidade de T. rubrum. MÉTODOS: O inóculo fúngico foi preparado e exposto a diferentes concentrações de azul de orto-toluidina e densidades de energia do diodo emissor de luz, para avaliar a sensibilidade de T. rubrum e o efeito fungicida, após terapia fotodinâmica. Além disso, os perfis da área e volume das suspensões fúngicas irradiados também foram investigados. RESULTADOS: Uma pequena redução, in vitro, de células fúngicas foi observada após a exposição a 100 mM azul de orto-toluidina irradiados por diodo emissor de luz a 18 J/cm². Efeito fungicida ocorreu após irradiação 25 µM orto-toluidina por diodo emissor de luz com densidade de energia de 72 J/cm². A análise mostrou que a área e o volume irradiados pelo diodo emissor de luz foram 52,2 mm² e 413,70 mm³, respectivamente. CONCLUSÕES: Os resultados permitiram concluir que a terapia fotodinâmica com diodo emissor de luz, nas condições experimentais é uma abordagem alternativa para inibir, in vitro, T. rubrum e pode ser um tratamento promissor para as dermatofitoses causadas por este fungo.

In Vitro Effect of photodynamic therapy on Aggregatibacter actinomycetemcomitans and Streptococcus sanguinis

New periodontal disease treatments are needed to prevent infection progression. Photodynamic therapy (PDT) is one of the greatest pledges for this purpose. It involves the use of light of specific wavelength to activate a nontoxic photosensitizing agent in the presence of oxygen for eradication of target cells, and can be used for photokilling of microorganisms. This study evaluated in vitro the photodynamic effect of 0.01 percent toluidine blue-O (TBO) in combination with an AlGaInP diode laser light source on Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A.a.) and Streptococcus sanguinis (S.s.). Suspensions (2 mL) containing A.a. and S.s. at 1.5 x 108 CFU/mL concentration were prepared and divided into 3 groups: Control group (no treatment), Dye group (inoculum and TBO for 5 min) and Dye/Laser group (inoculum, TBO for 5 min and laser for 3 min). Next, a dilution for subsequent subculture in 20 mL of Trypic Soy Agar (A.a) and Brucella Agar (S.s.) in Petri dishes (Pourplate Method) was done. Incubation of A.a. in microaerophilia and S.s. in aerobiosis at 35oC for 48 h was performed for subsequent visual counting of CFU/mL. Data were analyzed by one-way ANOVA and Tukey’s HSD test at 5 percent significance level. For both strains, the control group showed a significantly higher (p<0.05) bacterial growth (1.5 x 108 CFU/mL), while the Dye group presented no significant reduction (p>0.05) in the CFU counts. The Dye/Laser group presented a significant decrease in the CFU counts (p<0.05) compared with the Control group (61.53 percent for A.a. and 84.32 percent for S.s.). It may be concluded that PDT was effective in reducing the numbers of A.a. and S.s. in vitro.

Novos tratamentos são propostos para evitar a progressão da periodontite, sendo a terapia fotodinâmica (PDT) uma notória promessa. Sua aplicação associa o Azul de orto-toluidina a 0,01 por cento (TBO) e uma fonte luminosa a laser de diodo (TwinFlex, Mmoptics), liberando assim, toxinas às bactérias. O objetivo do estudo é avaliar in vitro a eficiência da PDT sobre Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A.a.) e Streptococcus sanguinis (S.s.). Preparou-se suspensões distintas de 2 mL contendo A.a. e S.s. na concentração de 1,5x108 UFC/mL, e divisão de cada suspensão em 3 grupos: Controle (sem tratamento); Corante (suspensão e TBO por 5min) e Corante/Laser (suspensão, TBO por 5 min e laser por 3 min). Promoveu-se a diluição, a semeadura em 20 mL de TSA (A.a.) e de Ágar Brucella (S.s.), em placas de Petri (Método Pourplate), e a incubação da A.a. em microaerofilia e da S.s. em aerobiose, por 48 h a 35oC, para posterior contagem visual das UFC. Os grupos Controle mostraram ótimo crescimento bacteriano (1,5 x 108 UFC/mL). Os grupos Corante não apresentaram redução significativa para ambas bactérias. Os grupos Laser apresentaram redução em relação ao controle, 61,53 por cento para A.a. e 84,32 por cento para S.s. A análise estatística (ANOVA, p<0,05) corrobou que a PDT é eficaz na redução destas bactérias in vitro.

Radiographic assessment of photodynamic therapy as an adjunctive treatment on induced periodontitis in immunosuppressed rats

OBJECTIVE: The aim of this study was to assess radiographically the effect of photodynamic therapy (PDT) as an adjunctive treatment to scaling and root planing (SRP) on induced periodontitis in dexamethasone-induced immunosuppressed rats. MATERIAL AND METHODS: The animals were divided into 2 groups: ND group (n=60): saline treatment; D group (n=60): dexamethasone treatment. In both ND and D groups, periodontal disease was induced by the placement of a ligature in the left first mandibular molar. After 7 days, ligature was removed and all animals received SRP, being divided according to the following treatments: SRP: saline and PDT: phenothiazinium dye (TBO) plus laser irradiation. Ten animals per treatment were killed at 7, 15 and 30 days. The distance between the cementoenamel junction and the height of the alveolar bone crest in the mesial surface of the mandibular left first molars was determined in millimeters in each radiograph. he radiographic values were analyzed statistically by ANOVA and Tukey's test at a p value <0.05. RESULTS: Intragroup radiographic assessment (ND and D groups) showed that there was statistically signifcant less bone loss in the animals treated with PDT in all experimental periods compared to those submitted to SRP. Intergroup radiographic analysis (ND and D groups) demonstrated that there was greater bone loss in the ND group treated with SRP compared to the D group treated with PDT at 7 and 30 days. CONCLUSION: PDT was an effective adjunctive treatment to SRP on induced periodontitis in dexamethasone-induced immunosuppressed rats.

Efeitos de baixas doses de radiaçäo sobre a gênese e a evoluçäo do tecido de granulaçäo / Effects of low doses of radiation on the genesis and evolution of granulation tissue

O presente trabalho teve por finalidade pesquisar a gênese e a evoluçäo do tecido de granulaçäo induzido experimentalmente em ratos, sob a açäo local de baixas doses de radiaçäo X, comparando-se os possíveis efeitos produzidos quando da aplicaçäo em dose única e em dose dividida com o tecido de granulaçäo normal. O tecido de granulaçäo foi estudado aos 2, 4, 7, 11, 14, 21 e 28 dias de evoluçäo. Os estudos realizados foram: técnica histofotométrica, com coloraçäo pelo azul de toluidina pH=4, para se verificar a síntese dos mucopolissacarídeos ácidos, e técnica de impregnaçäo pela prata, para se verificar o dicroísmo entre as fibras colágenas e a conseqüente organizaçäo macromolecular do tecido neoformado. Os animais foram divididos em 3 (três) grupos experimentais, sendo eles: controle, dose única (7,0 R) e dose dividida (7,0 R, divididos igualmente em três fraçöes). Os resultados encontrados mostraram näo haver efeitos qualitativos da radiaçäo X sobre a gênese e a evoluçäo do tecido de granulaçäo nestas condiçöes experimentais, pois näo observamos alteraçöes na organizaçäo do tecido de reparo

Lesiones blancas de la mucosa bucal: métodos auxiliares de diagnóstico / White lesions of the oral mucosa: auxiliary methods of diagnosis

El propósito de este trabajo consistió en evaluar la confiabilidad de la tinción con azul de toluidina para la determinación del sitio a biopsiar en pacientes con lesiones bucales rojas y blancas. Se estudiaron 65 pacientes por medio de tinción seguida inmediatamente de biopsia. El análisis microscópico resultó en un 10 por ciento de falsos positivos (conviene aclarar que, previamente, habíamos determinado que el 6 por ciento de los casos correspondía a lesiones inflamatorias, siempre positivas). No encontramos falsos negativos. la confiabilidad de la técnica fue de 95.38 por ciento