Efeitos da exposição à fumaça do cigarro e suas implicações na neuroinflamação / Effects of exposure to cigarette smoke and its implications on neuroinflammation

O Sistema Nervoso Central (SNC) humano é formado por cerca de 86,1 bilhões de neurônios entre o encéfalo e a medula espinhal. O desenvolvimento pré-natal humano (tempo da concepção ao nascimento) possui cerca de 38 semanas, e é dividido na fase embrionária que corresponde ao período das 8 semanas iniciais da gestação, seguido pela fase fetal. A fase embrionária é o período mais vulnerável à ocorrência de anormalidades congênitas. Por ser um órgão com grande período de desenvolvimento, o SNC está sujeito às alterações genéticas, epigenéticas e ambientais. Durante a fase de implantação do embrião, o DNA é mais vulnerável às influências externas, como à fumaça do cigarro, aumentando o risco de retardo do desenvolvimento fetal, o risco de morte súbita pós-natal e de anormalidades do sistema imune. Neste contexto, o objetivo deste trabalho é avaliar os efeitos da exposição à fumaça do cigarro sobre o processo de neuroinflamação da prole de camundongos C57BL/6 expostos à fumaça do cigarro durante a gestação e desafiados ou não com LPS. Para tanto, camundongos C57BL/6 fêmeas prenhes foram expostas à fumaça do cigarro desde o plug vaginal até o nascimento da prole. No 3º dia de vida, os filhotes foram separados para três linhas de trabalho: 1) in vivo: os animais foram desafiados com LPS pelo período de 4h, seguidos de eutanasia e análises de PCR Array do SNC. 2) in vitro: os encéfalos dissecados foram utilizados para a preparação de cultura mista de glia e da cultura enriquecida com neurônio. Após a maturação celular, as células foram estimuladas com LPS 100 ng/mL e, após 24h, foram realizados ensaios de CBA, citometria de fluxo, PCR, dosagem de NO, avaliação de morte celular e metilação global. 3) Encefalomielite Autoimune Experimental (EAE): após o desmame, os animais foram mantidos em suas caixas moradia por 8 semanas sem nenhum estímulo externo, e então foram imunizados com MOG35-55 para o desenvolvimento da EAE. Nos experimentos in vivo observamos o aumento da transcrição de genes relacionados ao processo inflamatório, como interleucinas e quimiocinas. Em relação aos experimentos in vitro observamos maior crescimento de células astrocitárias (astrogliose), e células da microglia com aumento de moléculas co-estimuladoras (CD80 e CD86) bem como da transcrição e concentração de citocinas pró-inflamatórias e produção de NO. Em cultura enriquecida de neurônio, foi observado aumento na porcentagem de células em apoptose no grupo exposto à fumaça do cigarro desafiados ou não com LPS. O bloqueio da atividade da microglia pela minociclina reverteu a apoptose e diminuiu a produção de NO minimizando a morte celular. Em relação aos experimentos de EAE, os animais expostos à fumaça do cigarro no período gestacional, quando imunizados na vida adulta apresentam aumento no grau da doença bem como maior persistência da mesma quando observado escore clínico, além de acompanhados de um grau maior de infiltrado celular e desmielinização. Desta forma podemos concluir que a exposição à fumaça do cigarro durante o período gestacional leva a uma programação fetal com aumento da resposta neuroinflamatória frente a um estimulo sistêmico, trazendo consequências na vida adulta

The human central nervous system (CNS) is made up of about 86.1 billion neurons between the brain and the spinal cord. The human prenatal development (time from conception to birth) is about 38 weeks, and is divided into the embryonic phase that corresponds to the period of the initial 8 weeks of gestation, followed by the fetal phase. The embryonic stage is the period most vulnerable to the occurrence of congenital abnormalities. Because it is an organ with a long period of development, the CNS is subject to genetic, epigenetic and environmental changes. During the embryo implantation phase, DNA is more vulnerable to external influences such as cigarette smoke, increasing the risk of delay on fetal development, risk of sudden postnatal death, and abnormalities of the immune system. In this context, the aim of this work is to evaluate the effects of exposure to cigarette smoke on the neuroinflammation process of offspring of C57BL/6 mice exposed to cigarette smoke during gestation and challenged or not with LPS. For this, pregnant female C57BL/6 mice were exposed to cigarette smoke from vaginal plug to offspring birth. On the 3rd day of life the offspring were separated into three lines of work: 1) in vivo: the animals were challenged with 1mg/Kg LPS and after 4h they followed to euthanasia; PCR analysis of the CNS was made in this period. 2) in vitro: dissected encephalons were used for the preparation of mixed culture of glia and the culture enriched with neuron. After cell maturation, the cells were stimulated with 100 ng/mL LPS and, after 24 hours, CBA, flow cytometry, PCR, NO assay, cell death and global methylation assays were performed. 3) Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE): After weaning, the animals were kept in their housing for 8 weeks without any external stimulus, and then were immunized with MOG35-55 for the development of EAE. In the in vivo experiments we observed increased transcription of genes related to the inflammatory process, such as interleukins and chemokines. In vitro experiments showed higher growth of astrocytes (astrogliosis) and microglia cells with increased stimulatory molecules (CD80 and CD86) as well as the transcription and concentration of proinflammatory cytokines and NO production. In the enriched neuron culture, an increase in the percentage of cells in apoptosis was observed in the group exposed to cigarette smoke challenged or not with LPS. Blocking microglial activity by minocycline reversed apoptosis and decreased NO production by minimizing cell death. The EAE experiments shows that the animals exposed to cigarette smoke in the gestational period, when immunized in adulthood, present an increase in the degree of the disease as well as a greater persistence of the disease; The higher as the clinical score higher is the degree of cellular infiltration and demyelination. In this way we can conclude that the exposure to cigarette smoke during the gestational period leads to a fetal programming with increased neuroinflammatory response to a systemic stimulus and that this is able to last until the adult stage

Desenvolvimento e aplicação de um novo índice para avaliação do pré-natal / Development and application of a new index for assessment of prenatal care

OBJETIVO: Desenvolver e aplicar um novo instrumento para avaliar o pré-natal com base nas diretrizes do Programa de Humanização do Pré-Natal e do Nascimento do Ministério da Saúde brasileiro, inserindo elementos quanti-qualitativos distribuídos segundo a tríade avaliativa de infra-estrutura, processo de trabalho e resultados. MÉTODOS: Este estudo transversal, de natureza analítico-descritiva e abordagem quantitativa, foi desenvolvido com 238 usuárias em 44 serviços da atenção primária à saúde do Município de João Pessoa, Nordeste do Brasil, de novembro de 2010 a dezembro de 2011. Também foram entrevistados médicos e enfermeiros envolvidos no cuidado pré-natal. O instrumento elaborado pelos pesquisadores continha 23 questões relativas a infra-estrutura, processo de trabalho e resultados da assistência pré-natal. A partir das informações coletadas, o pré-natal foi classificado pelo que denominamos de Índice IPR/Pré-Natal. Para cada questão atribui-se o valor 1 para adequado, quando em conformidade com os critérios estabelecidos, e 2 para inadequado. Com base na porcentagem representada pela soma do número de questões adequadas dos três componentes em relação ao total de 23 questões, o cuidado pré-natal foi classificado em: adequado superior (100% de questões adequadas); adequado (>75%); intermediário (51 a 74%); e inadequado (<50%). As categorias de classificação do IPR/Pré-Natal foram comparadas com as dos índices de Kessner e Adequacy of Prenatal Care Utilization (APNCU). RESULTADOS: As questões referentes ao processo de trabalho foram as que contribuíram com significância estatística para que o pré-natal fosse classificado em maior proporção na categoria intermediário pelo Índice IPR/Pré-Natal. As categorias de classificação do Índice IPR/ Pré-Natal mostraram-se consistentes para detectar as variáveis prematuridade, peso insuficiente ao nascer e não realização do aleitamento materno exclusivo. CONCLUSÕES: O Índice IPR/Pré-Natal foi eficaz na incorporação de elementos quanti-qualitativos para classificação do cuidado pré-natal.

OBJECTIVE: To develop and apply a new instrument to evaluate prenatal care based on the guidelines of the Brazilian Humanization Program for Prenatal Care and Birth, including quantitative and qualitative elements distributed according to the evaluation triad of structure, process, and outcomes. METHODS: An analytic, descriptive, quantitative cross-sectional study was carried out with 238 women receiving care in 44 primary care services in the city of João Pessoa, Northeast Brazil, between November 2010 and December 2011. Physicians and nurses involved in prenatal care were also interviewed. The instrument developed by the investigators contains 23 questions relating to structure, process and outcomes of pre-natal care. Based on the information collected, pre-natal care was classified according to an IPR/Pre-Natal index (Índice IPR/Pré-Natal, where I stands for infrastructure, P for work process and R for results). A value of 1 is attributed to each question if it complies with the criteria established for quality, or 2 if it does not comply. The percent of adequate answers in relation to the 23 total questions is used to classify prenatal care as: upper adequate (100% adequate answers); adequate (>75%); intermediate (51 to 74%); and inadequate (<50%). The classification categories for the Pre-Natal/IPR index were compared to those of the Kessner and Adequacy of Prenatal Care Utilization (APNCU) indices. RESULTS: Questions relating to the work process contributed significantly to the classification of prenatal care as intermediate according to the IPR/Pre-Natal. IPR/Pre-Natal classification categories were consistent to detect prematurity, insufficient weight at birth and absence of exclusive breastfeeding. CONCLUSIONS: The IPR/Pre-Natal index effectively incorporated quantitative and qualitative elements for the assessment of pre-natal care.

A study on utilization and quality of coverage of antenatal care services at the subcentre level.

A community based cross-sectional study was done by interviewing a sample of 360 women of Anchuri Block in the district of Bankura, West Bengal to know the determinants of utilization and coverage quality of antenatal care services of subcentres using an appropriate scoring system for analysis. The study revealed underutilization of subcentres by the women and also sub-optimal performance of subcentres with regard to coverage quality of ANC services The main reason for under utilization of subcentres was found to be better service provision and easy accessibility of B.S.Medical College Hospital. Multiparous mothers were seen to be at a disadvantage both in terms of utilization of the source of choice as well as in terms of coverage of ANC services by subcentre ANMs.

Protocologo para la atención obstétrica y pediátrica: dirigido a personal de enfermeria / Protocol for the obstetrics attention and pediatrics: directed to personnel of in nurse

El presente documento forma parte del esfuerzo del Ministerio de Salud de Nicaragua a través de la Dirección de Atención Integral a la Mujer, Niñez y Adolescencia, a fin de que se priorice la calidad de atención a lasmujeres y la niñez, especialmente a la población de extrema pobreza y con problemas de accesibilidad a los servicios de salud. Además pretende actualizar los conocimientos científicos al personal de enfermeria y la estandarizaión en el manejo de las principales patologías causantes de la mortalidad materna e infantil

Protocologo para la atención obstétrica y pedriátrica: dirigido a personal médico / Protocol for the obstetric attention and pediatric directed to medical personnel

El presente documento forma parte del esfuerzo del Ministerio de Salud de Nicaragua, a través de la Dirección de Atención Integral a la Mujer, Niñez y Adolescencias, a fin de que se priorice la calidad de atención a las mujeres y la niñez, especialmente a la población de extrema pobreza y con problemas de accesibilidad a los servicios de salud. Además pretende actualizar losconocimientos científicos al personal médico que esta en contacto directo con los pacientes y la estandarización en el manejo de las principales patologías causantes de la mortalidad materna e infantil