Detection of tick-borne rickettsial pathogens in naturally infected dogs and dog-associated ticks in Medellin, Colombia / Detecção de patógenos rickettsiais transmitidos por carrapatos em cães naturalmente infectados e carrapatos associados a cães em Medellin, Colômbia

Abstract Tick-borne rickettsial pathogens (TBRP) are important causes of infections in both dogs and humans. Dogs play an important role as a biological host for several tick species and can serve as sentinels for rickettsial infections. Our aim was to determine the presence of TBRP in dogs and in dog-associated ticks and their potential risk to human diseases in Medellin, Colombia. DNA for E. canis (16S rRNA and dsb) and A. platys (groEl) was detected in 17.6% (53/300) and 2.6% (8/300) of dogs, respectively. Antibodies against Ehrlichia spp. 82 (27.3%) and Anaplasma spp. 8 (2.6%) were detected in dogs. Antibody reactivity against both agents were found in 16 dogs (5.3%). Eight dogs showed antibody for Rickettsia spp. with titers that suggest 3 of them had a probable exposure to R. parkeri. Rhipicephalus sanguineus s.l. (178/193) was the main tick in dogs, followed by R. microplus (15/193). The minimum infection rates (MIR) in R. sanguineus were 11.8% for E. canis and 3.4% for A. platys. E. canis and A. platys are the main TBRP infecting dogs and ticks and R. sanguineus s.l. is likely involved in the transmission of both agents. Interestingly, we found serological evidence of exposure in dogs for spotted fever group rickettsiae.

Resumo As riquétsias transmitidas por carrapatos (RTC) são causas importantes de infecção em cães e humanos. Os cães exercem um papel essencial como hospedeiros biológicos para diversas espécies de carrapatos, assim como podem ser úteis como sentinelas de infecções por riquétsias. O intuito deste estudo foi determinar a presença de RTC em cães, assim como em seus carrapatos, para determinar o risco potencial de doença humana em Medellín, Colômbia. DNA de Ehrlichia canis (16S rRNA e dsb) e Anaplasma platys (groEl) foi detectado em 17,6% (53/300) e 2,6% (8/300) dos cães, respectivamente. Anticorpos contra Ehrlichia spp. (82; 27,3%) e Anaplasma spp. (8; 2,6%) foram detectados nos cães. Reatividade de anticorpos contra ambos patógenos (Ehrlichia e Anaplasma) foi detectada em 16 cães (5,3%). Oito animais apresentaram anticorpos contra Rickettsia spp., e 3 deles sugerem uma provável exposição a Rickettsia parkeri. Rhipicephalus sanguineus s.l. (178/193) foi a principal espécie de carrapatos, seguida de R. microplus (15/193). A taxa de infecção mínima em R. sanguineus foi 11,8% para E. canis e 3,4% para A. platys. E. canis e A. platys são as principais RTC que infectam cãese R. sanguineus s.l. provavelmente está envolvido na transmissão de ambos os agentes. É evidente, porém, a exposição sorológica dos cães a riquétsias do grupo da febre maculosa.

Detección de bacterias de los géneros Ehrlichia Anaplasma y Rickettsia en garrapatas rhipicephalus Sanguineus sl en Pergamino Argentina / Detection of Bacteria of the Genera Ehrlichia, Anaplasma and Rickettsia in Rhipicephalus sanguineus s.l Ticks in the City of Pergamino, Argentina

Las rickettsiosis, ehrlichiosis y anaplasmosis son causadas por bacterias gramnegativas intracelulares obligadas y transmitidas por artrópodos. El objetivo de este trabajo fue determinar especies de garrapatas presentes en caninos de la ciudad de Pergamino y detectar presencia de patógenos de los géneros Ehrlichia, Anaplasma y Rickettsia. MÉTODOS: Se estudiaron 21 garrapatas Rhipicephalus sanguineus s.l obtenidas de caninos de diferentes ambientes de la ciudad de Pergamino. Las muestras fueron analizadas mediante PCR, amplificando un fragmento del gen gltA para Rickettsia spp. y del 16SrRNA para los géneros Ehrlichia/Anaplasma. RESULTADOS: Se detectó positividad a Rickettsia spp. en el 4,76%, identificándose por secuenciación a la especie Rickettsia massiliae. Para la familia Anaplasmataceae se detectó positividad para Ehrlichia canis (23,8%) y Anaplasma platys (19,04%). CONCLUSIONES: Se trata del primer reporte de patógenos de interés zoonótico y/o veterinario pertenecientes a los géneros Rickettsia, Ehrlichia y Anaplasma en garrapatas Rh. sanguineus s.l para el norte de la provincia de Buenos Aires

Molecular detection of vector-borne agents in cats in Southern Brazil / Detecção molecular de agentes transmitidos por vetores em felinos domésticos no Sul do Brasil

Abstract This study used serological and molecular methods to investigate the occurrence of vector-borne pathogens (VBP) with zoonotic potential in cats neutered at the University Veterinary Hospital in Canoinhas, Santa Catarina. The combined PCR and serological results revealed that 17 (56.6%) cats were positive for one or more pathogens. The sampled cats had antibodies to Ehrlichia spp. (7/30), Anaplasma phagocytophilum (3/30) and Leishmania infantum (2/30). The PCR assay detected DNA closely related to Ehrlichia canis in 6/30 cats, Mycoplasma haemofelis in 2/30 cats, A. phagocytophilum and Cytauxzoon sp. in one cat each. While Bartonella clarridgeiae and B. henselae were detected in two cats each, and B. koehlerae was detected in one cat.

Resumo Como os felinos podem ser parasitados por diversos patógenos transmitidos por vetores (PTV), alguns com caráter zoonótico, este estudo objetivou detectar por métodos sorológicos e moleculares, patógenos transmitidos por vetores hematófagos, em gatos atendidos em um Hospital Veterinário Universitário em Santa Catarina. Os resultados da PCR e da sorologia combinados, revelaram que 17 (56,6%) gatos foram positivos para um ou mais patógenos. Na sorologia, foram positivos 7/30 gatos para Ehrlichia, 3/30 para Anaplasma phagocytophilum e 2/30 para Leishmania infantum. Na PCR foi detectado DNA filogeneticamente associado a: Ehrlichia canis em 6/30 gatos; Mycoplasma haemofelis, em 2/30 gatos; A. phagocytophilum e Cytauxzoon sp. em 1/30 gatos cada. Enquanto Bartonella clarridgeiae e B. henselae foram detectadas, cada uma, em dois gatos, B. koehlerae foi detectada em um gato.

Molecular detection of Bartonella, Ehrlichia and Mycoplasma in feral dogs of El Pedregal de San Angel Ecological Reserve in Mexico City / Detecção molecular de Bartonella, Ehrlichia e Mycoplasma em cães selvagens da Reserva Ecológica El Pedregal de San Angel, na Cidade do México

Abstract Free-ranging and feral dogs represent a group of unattended companion animals. They impact wild animal populations by predating native species, displacing predators and introducing exotic pathogens. The aim of this work was to describe the molecular occurrence of Rickettsia, Ehrlichia, Anaplasma, Mycoplasma and Bartonella in feral dogs. The study was carried out in the last relict of a protected area in Mexico City. Blood clots samples from 19 dogs were obtained and analyzed for detection of specific fragments of the 16S-rRNA gene for Anaplasma, Ehrlichia and Mycoplasma and citrate synthase (gltA) for Bartonella and Rickettsia. Our results showed that DNA from three bacteria species (Bartonella vinsonii subsp. berkhoffii, Ehrlichia canis and Mycoplasma haemocanis) was present with frequencies ranging from 5.3 to 15.8%. This is the first record of B. vinsonii subsp. berkhoffii and M. haemocanis in dogs from México, and also the first finding of Ehrlichia canis in Mexico City. It is important to perform surveillance of feral dog populations in order to identify the impact of these pathogens on wild animal populations and Public Health in order to establish prevention and protection programs.

Resumo Cães errantes e selvagens representam um grupo de animais de companhia livres. Eles impactam as populações de animais selvagens pela predação de espécies nativas, deslocando predadores e introduzindo patógenos exóticos. O objetivo deste trabalho foi descrever a ocorrência molecular de Rickettsia, Ehrlichia, Anaplasma, Mycoplasma e Bartonella em cães selvagens. O estudo foi realizado no último ecossistema de uma área protegida na Cidade do México. Amostras de coágulos sanguíneos de 19 cães foram obtidas e analisadas para detecção de fragmentos específicos do gene 16S-rRNA para Anaplasma, Ehrlichia e Mycoplasma e citrato sintase (gltA) para Bartonella e Rickettsia. Nossos resultados mostraram que o DNA de três espécies de bactérias (Bartonella vinsonii subsp. berkhoffii, Ehrlichia canis e Mycoplasma haemocanis) estava presente com frequências variando de 5,3 a 15,8%. Este é o primeiro registro de B. vinsonii subsp. berkhoffii e M. haemocanis em cães do México, e também a primeira descrição de Ehrlichia canis na Cidade do México. É importante realizar a vigilância das populações de cães selvagens para identificar o impacto desses patógenos nas populações de animais silvestres e na Saúde Pública, a fim de estabelecer programas de prevenção e proteção.

Molecular identification of Ehrlichia sp. in a beef cattle from Brazilian Cerrado - case report / Identificação molecular de Ehrlichia sp em um bovino do Cerrado brasileiro - relato de caso

Ehrlichia infections in cattle are frequent in Africa but have also been reported in Brazil and North America. This paper reports natural infection by Ehrlichia sp. associated with Babesia bigemina and Anaplasma marginale in a calf in the municipality of Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul, Brazil, presenting polioencephalomalacia. The molecular evidence, based on a fragment of the dsb gene, indicates a species of Ehrlichia genetically related to Ehrlichia canis and other species of the genus found in the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus and a calf from Brazil (99 to 100% identity). It was not possible to associate the clinical signs with Ehrlichia infection due to co-infections and histological evidence of another disease. However, the circulation of the bacteria in bovines in Brazilian Cerrado was confirmed and more attention should be given to clinical suspicion of tick-borne pathogens in cattle to clarify the pathogenic potential of Ehrlichia sp.(AU)

Infecções por Ehrlichia em bovinos são frequentes na África, mas também foram relatadas no Brasil e na América do Norte. Este artigo relata uma infecção natural por Ehrlichia sp. associado a Babesia bigemina e Anaplasma marginale em um bezerro, no município de Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil, o qual apresentava polioencefalomalácia. A evidência molecular, baseada em um fragmento do gene dsb, indica uma espécie de Ehrlichia geneticamente relacionada a Ehrlichia canis e outras espécies do gênero encontradas no carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus e em um bezerro do Brasil (99 a 100% de identidade). Não foi possível associar os sinais clínicos à infecção por Ehrlichia devido a coinfecções e evidências histológicas de outra doença. No entanto, a circulação da bactéria em bovinos no Cerrado brasileiro foi confirmada, e mais atenção deve ser dada à suspeita clínica de patógenos transmitidos por carrapatos em bovinos para esclarecer o potencial patogênico de Ehrlichia sp.(AU)

Hemoparasites in ticks of wild birds of Serra dos Órgãos National Park, state of Rio de Janeiro, Brazil / Hemoparasitos em carrapatos de aves silvestres do Parque Nacional da Serra dos Órgãos, estado do Rio de Janeiro, Brasil

Abstract The aim of this study is to detect the presence of tick-borne agents of genera Rickettsia, Borrelia, Babesia, Ehrlichia and Anaplasma in ticks collected from native wild birds in the state of Rio de Janeiro. Birds were captured and observed carefully to find the ectoparasites. DNA detection of hemoparasites was performed by means of the polymerase chain reaction (PCR). The sequences obtained were analyzed and their homologies were compared to the available isolates in the GenBank platform database. A total of 33 birds were captured from 20 different species, of which 14 were parasitized by Amblyomma longirostre (n = 22). There was absence of DNA from agents of the genera Babesia, Anaplasma and Ehrlichia in the evaluated samples. The phylogenetic analysis indicated that one sample had 100% identity with Rickettsia bellii (KJ534309), the other two samples showed 100% identity with Rickettsia sp. Aranha strain and strain AL (EU274654 and AY360216). The positive sample for R. bellii was also demonstrated to be positive for Borrelia sp., which presented a similarity of 91% with Borrelia turcica (KF422815). This is the first description of Borrelia sp. in ticks of the genus Amblyomma in South America.

Resumo Este trabalho teve como objetivo detectar evidências moleculares da presença de agentes dos gêneros Rickettsia, Borrelia, Babesia, Anaplasma e Ehrlichia transmitidos por carrapatos coletados de aves silvestres no estado do Rio de Janeiro. Aves foram capturadas e observadas cuidadosamente a procura de ectoparasitos. A detecção de DNA de hemoparasitos foi realizada por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). As sequências obtidas foram analisadas e sua homologia comparada aos isolados disponíveis na base de dados da plataforma GenBank. Foram capturadas 33 aves, de 20 espécies diferentes das quais 14 estavam parasitadas por Amblyomma longirostre (n = 22). Houve ausência de DNA de agentes dos gêneros Babesia, Anaplasma e Ehrlichia nas amostras avaliadas. A análise filogenética indicou que uma amostra apresentou 100% de identidade com Rickettsia bellii (KJ534309), as outras duas amostras apresentaram 100% de identidade com Rickettsia sp. cepa Aranha e Cepa AL (EU274654 e AY360216.). A amostra positiva para R. bellii também apresentou positividade para Borrelia sp. que apresentou similaridade de 91% com Borrelia turcica (KF422815). Esta é a primeira descrição de Borrelia sp. em carrapatos do gênero Amblyomma na América do Sul.

Detection of a putative novel genotype of Ehrlichia sp. from opossums (Didelphis aurita) from Brazil / Detecção de um suposto novo genótipo de Ehrlichia sp. em gambás (Didelphis aurita) do Brasil

Abstract Erlichiosis affects humans and animals worldwide. Its distribution and prevalence depends on the presence of tick vectors and hosts in one geographic area. The aim of the present study was to investigate the occurrence of Ehrlichia spp. and Anaplasma spp. in opossums (Didelphis sp.) from the State of Rio de Janeiro, southeast Brazil. Blood samples from 37 animals were tested for these two pathogens using molecular methods. One animal (2.7%) was positive for Ehrlichia sp. by 16S rRNA-based nested PCR. In a phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene using the maximum likelihood method and the GTRGAMMA+I evolutionary model, we detected a novel Ehrlichia sp. genotype closely related to genotypes of E. canis previously reported in dogs from Brazil. To the authors' knowledge, this is the first molecular detection of Ehrlichia sp. in opossums from this State in the southeastern region of the country.

Resumo A erliquiose afeta seres humanos e animais em todo o mundo. Sua distribuição e prevalência dependem da presença de vetores de carrapatos e hospedeiros em uma área geográfica. O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de Ehrlichia sp. e Anaplasma sp. em gambás (Didelphis sp.) do Estado do Rio de Janeiro, sudeste do Brasil. Amostras de sangue de 37 animais foram testadas para estes dois patógenos usando métodos moleculares. Um animal (2,7%) foi positivo para Ehrlichia sp. baseado em 16S rRNA-nested PCR. Em uma análise filogenética baseada no gene 16S rRNA usando o método de máxima verossimilhança e o modelo evolutivo GTRGAMMA + I, detectamos um novo genótipo de Ehrlichia sp. intimamente relacionado a genótipos de E. canis previamente relatados em cães do Brasil. Para o conhecimento dos autores, esta é a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em gambás deste estado na região sudeste do país.

Serological evidence of exposure to some zoonotic microorganisms in cattle and humans with occupational exposure to livestock in Antioquia, Colombia / Evidencia serológica de exposición a algunos microorganismos zoonóticos en bovinos y humanos con exposición ocupacional a ganadería en Antioquia, Colombia / Evidências sorológicas de exposição a alguns microrganismos zoonóticos em bovinos e em humanos com exposição ocupacional ao gado na Antióquia, Colômbia

Bacteria belonging to Anaplasma, Ehrlichia, Rickettsia and Coxiella genera are considered emerging pathogens and livestock is one of the contexts where the transmission of these microorganisms can occur. The goal of this study was to determine serological evidence for the exposure to these bacteria in cattle and humans with occupational exposure to livestock in the subregions North and Magdalena Medio, Antioquia, Colombia, and to explore related factors. A cross-sectional study was conducted in 48 livestock farms distributed in six municipalities from both subregions: Belmira, Entrerríos and San Pedro de los Milagros (North), and Puerto Berrío, Puerto Nare and Puerto Triunfo (Magdalena Medio). Blood samples from 332 people and 384 bovines were evaluated by serology (IgM and IgG) screening for bacteria from the Anaplasma, Ehrlichia, Rickettsia, and Coxiella genera. Seropositivity in humans from both regions was 42.4% (95%CI: 31.2-55.1) for Anaplasma, 74.2% (95%CI: 66.0-84.4) for Ehrlichia, 72.5% (95%CI: 62.1-82.0) for Rickettsia, and 60.7% (95%CI: 59.7-69.1) for Coxiella burnetii. In cattle, seropositivity was 31.6% (95%CI: 19.9-44.2), 66.8% (95%CI: 55.2-78.1), 64.6% (95%CI: 53.8-74.5), and 61.6% (95%CI: 51.9-69.2), respectively. History of biting by ticks, milking, vaccination, having dogs and hens in the residence, as well as the consumption of raw milk derivatives were some factors associated with the infection by the bacteria studied. The results suggest a previous and recent exposure to these zoonotic bacteria genera in people with occupational exposure to livestock, as well as in cattle in the two studied subregions.

Las bacterias pertenecientes a los géneros Anaplasma, Ehrlichia, Rickettsia y Coxiella son consideradas patógenos emergentes y la ganadería es uno de los contextos donde se puede producir la transmisión de este tipo de microorganismos. El objetivo de este estudio fue determinar la evidencia serológica, debida a la exposición a estas bacterias en bovinos y humanos con exposición ocupacional a ganadería en las subregiones Norte y Magdalena Medio, Antioquia, Colombia, además de estudiar los factores relacionados. Se realizó un estudio transversal en 48 fincas ganaderas, distribuidas en seis municipios de ambas subregiones: Belmira, Entrerríos y San Pedro de los Milagros (Norte), y Puerto Berrío, Puerto Nare y Puerto Triunfo (Magdalena Medio). Las muestras de sangre de 332 personas y 384 bovinos fueron evaluadas mediante tamización serológica (IgM e IgG) para la detección de bacterias de los géneros Anaplasma, Ehrlichia, Rickettsia, y Coxiella. La seropositividad en humanos de ambas regiones fue 42,4% (IC95%: 31,2-55,1) en el caso de Anaplasma, un 74,2% (IC95%: 66,0-84,4) en Ehrlichia, un 72,5% (IC95%: 62,1-82,0) en Rickettsia, y un 60,7% (IC95%: 59,7-69,1) en Coxiella burnetii. En los bovinos, la seropositividad fue 31,6% (IC95%: 19,9-44,2), 66,8% (IC95%: 55,2-78,1), 64,6% (IC95%: 53,8-74,5), y 61,6% (IC95%: 51,9-69,2), respectivamente. El antecedente de haber sido mordido por garrapatas, ordeñar, vacunación, tener perros y gallinas en la residencia, así como el consumo de derivados de leche cruda fueron algunos de los factores asociados con la infección por las bacterias estudiadas. Los resultados sugieren la exposición previa y reciente a estas bacterias en personas con una exposición ocupacional a la ganadería, así como a los bovinos en las dos subregiones estudiadas.

As bactérias dos gêneros Anaplasma, Ehrlichia, Rickettsia e Coxiella são considerados patógenos emergentes, e a transmissão desses microrganismos pode ocorrer no contexto da pecuária. O estudo teve como objetivos determinar as evidências sorológicas de exposição a essas bactérias em bovinos e em humanos com exposição ocupacional ao gado nas sub-regiões Norte e Magdalena Médio, Antióquia, Colômbia, e explorar fatores associados. Foi realizado um estudo transversal em 48 fazendas de gado bovino distribuídas em seis municípios nas duas sub-regiões: Belmira, Entrerríos e San Pedro de los Milagros (Norte) e Puerto Berrío, Puerto Nare e Puerto Triunfo (Magdalena Médio). Amostras de sangue de 332 humanos e 384 bovinos foram analisadas com sorologia (IgM e IgG) para bactérias dos gêneros Anaplasma, Ehrlichia, Rickettsia e Coxiella. Os níveis de sorologia positiva em humanos das duas regiões foram de 42,4% (IC95%: 31,2-55,1) para Anaplasma, 74,2% (IC95%: 66,0-84,4) para Ehrlichia, 72,5% (IC95%: 62,1-82,0) para Rickettsia e 60,7% (IC95%: 59,7-69,1) para Coxiella burnetii. Nos bovinos, os níveis foram 31,6% (IC95%: 19,9-44,2), 66,8% (IC95%: 55,2-78,1), 64,6% (IC95%: 53,8-74,5) e 61,6% (IC95%: 51,9-69,2), respectivamente. Os fatores associados às bactérias estudadas foram: história de picada de carrapato, ordenha, vacinação, presença de cães e galinhas no domicílio e consumo de laticínios feitos com leite cru, entre outros. Os resultados sugerem exposição prévia e recente a esses gêneros bacterianos zoonóticos em pessoas com contato ocupacional com gado, assim como nos próprios animais, nas duas sub-regiões estudadas.

Antibodies against canine distemper virus, parvovirus and Ehrlichia spp. in wild captive carnivores in midwestern Brazil / Anticorpos contra o vírus da cinomose canina, parvovírus e Ehrlichia spp. em carnívoros selvagens cativos no centro-oeste do Brasil

The occurrence of antibodies against canine distemper virus (CDV), parvovirus and Ehrlichia spp. in wild captive carnivores was evaluated in a zoological park in midwestern Brazil. Serum samples were collected between 2007 and 2014 from 45 carnivores. Antibodies were evaluated by virus neutralization assay for CDV, hemagglutination inhibition test for parvovirus, indirect immunofluorescent and Enzyme-linked immunosorbent assay for Ehrlichia spp. Antibodies against CDV and parvovirus were detected in 75% of Canidae and Felidae. Procyonidae were negative for CDV, although one Mustelidae was positive. TwoCanidae presented antibodies reactive to E. canis antigens. The high antibodies rates to CDV and parvovirus suggest the contact with both pathogens, however since no clinical history of disease are registered in the Zoo-UFMT, we can presume that carnivores have responded satisfactorily against the antigens. The low serological rates observed against Ehrlichia spp. may be resulted to the low occurrence of ticks among carnivores.(AU)

A ocorrência de anticorpos contra o vírus da cinomose canina (CDV), parvovírus e Ehrlichia spp. em carnívoros selvagens em cativeiro foi avaliada em um parque zoológico do centro oeste do Brasil. As amostras de soro foram coletadas entre 2007 e 2014 de 45 carnívoros. Os anticorpos foram avaliados por ensaio de neutralização de vírus para CDV, teste de inibição de hemaglutinação para parvovírus, imunofluorescência indireta e ensaio imunoenzimático ligado à enzima para Ehrlichia spp. Anticorpos contra CDV e parvovírus foram detectados em 75% de canídeos e felídeos. Procionídeos foram negativos para CDV, embora um mustelídeo fora positivo. Dois canídeos apresentaram anticorpos reativos aos antígenos de E. canis. As altas taxas de anticorpos para CDV e parvovírus sugerem o contato com ambos os patógenos, entretanto desde que nenhuma história clínica de doença está registrada no Zoo-UFMT, podemos presumir que os carnívoros têm respondido satisfatoriamente contra os antígenos. As baixas taxas serológicas observadas contra Ehrlichia spp. pode ser resultado da baixa ocorrência de carrapatos entre os carnívoros.(AU)

Molecular detection of Anaplasmataceae agents in Dasyprocta azarae in northeastern Brazil / Detecção molecular de agentes Anaplasmataceae em Dasyprocta azarae no nordeste do Brasil

Abstract Recently, the importance of wild-living rodents for maintenance of pathogens of the family Anaplasmataceae in the environment was investigated. These mammals play a role as reservoirs for these pathogens and act as hosts for the immature stages of tick vectors. The aim of the present study was to investigate the prevalence of Ehrlichia sp. and Anaplasma sp. in 24 specimens of Azara's agouti (Dasyprocta azarae) that had been trapped in the Itapiracó Environmental Reserve, in São Luís, Maranhão, northeastern Brazil, using molecular methods. Four animals (16.7%) were positive for Ehrlichia spp. in nested PCR assays based on the 16S rRNA gene. In a phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene, using the maximum likelihood method and the GTRGAMMA+I evolutionary model, Ehrlichia sp. genotypes detected in Azara's agoutis were found to be closely related to E. canis and to genotypes relating to E. canis that had previously been detected in free-living animals in Brazil. The present work showed the first molecular detection of Ehrlichia sp. in Azara's agoutis in Brazil.

Resumo Recentemente, a importância de roedores selvagens na manutenção de agentes Anaplasmataceae no ambiente tem sido investigada, haja visto o papel que tais mamíferos podem desempenhar como reservatórios para os patógenos e como hospedeiros para estágios imaturos dos carrapatos vetores. O presente estudo objetivou investigar a ocorrência de Ehrlichia sp. e Anaplasma sp. em 24 cotias (Dasyprocta azarae) capturadas na Reserva Ambiental de Itapiracó, em São Luís, Maranhão, nordeste do Brazil, utilizando métodos moleculares. Quatro animais (16,7%) mostraram-se positivos nos ensaios de nested PCR para Ehrlichia spp. baseados no gene 16S rRNA gene. Na análise filogenética baseda no gene 16S rRNA e utilizando o método de Máxima Verossimilhança e modelo evolutivo GTRGAMMA+I, os genótipos de Ehrlichia sp. detectados em cotias mostraram-se filogeneticamente relacionados às sequências de E. canis e outros genótipos relacionados a E. canis detectados previamente em animais selvagens no Brasil. O presente trabalho mostrou a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em cotias no Brasil.

Abortion and fetal death in bitches due anemia caused by vector-borne diseases / Abortamento e morte fetal em cadelas devido anemia causada por doenças transmitidas por vetores

Doenças infecciosas são as maiores responsáveis por falhas reprodutivas (FR) em cadelas, causando aborto, morte fetal e natimortalidade. Este estudo teve como objetivo investigar a associação entre agentes infecciosos, FR inexplicáveis e anemia em cadelas. Todas as amostras maternas e fetais foram negativas para a presença dos principais agentes infecciosos causadores de FR: herpes vírus canino 1, Neospora caninum, Brucella spp. e B. canis, enquanto agentes como o de Leishmania spp., parvovírus canino, Ehrlichia canis e Anaplasma platys foram encontrados em sangue materno. Coinfecções de A. platys/E. canis e A. platys/Leishmania spp. foram diagnosticadas. Os resultados indicam que os animais com anemia causadas por doenças transmitidas por vetores podem ser mais suscetíveis a sofrerem FR do que animais com valores hematológicos normais.(AU)

Seropositivity for Rickettsia spp. and Ehrlichia spp. in the human population of Mato Grosso, Central-Western Brazil

Abstract INTRODUCTION The epidemiology of Rickettsia and Ehrlichia species infection is underestimated in Mato Grosso State. METHODS: Serum samples obtained during a Dengue outbreak in 2011-2012 were tested via indirect immunofluorescence and/or ELISA. RESULTS: Samples from 19/506 (3.8%) patients presented antibodies for at least one of three Rickettsia species; 2/506 (0.4%) samples reacted against Ehrlichia canis. Most afflicted patients are residents of cities from the south-central region of the state, where these diseases have been reported in animals. CONCLUSIONS: These results show serological evidence of human exposure to Rickettsia and Ehrlichia species in Mato Grosso State.

Prevalencia de anticuerpos a Rickettsias y Ehrlichias en cuatro departamentos fronterizos del Perú / Prevalence of antibodies to Rickettsias and Ehrlichias in four border departments of Peru

Para determinar la prevalencia de anticuerpos a Rickettsia y Ehrlichia, relacionada a contacto reciente y pasado, en localidades fronterizas de los departamentos Loreto, Madre de Dios, Tumbes y Tacna, durante los años 2010 y 2011, se llevaron a cabo encuestas para evaluación serológica empleando el ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IFI), a fin de detectar inmunoglobulinas G (IgG) e inmunoglobulinas totales (IgA+IgM+IgG) en 1634 personas. Se encontró una prevalencia de contacto reciente para Ehrlichia de 3,7% (IC95%: 3,0-4,4) y para Rickettsia de 10,6% (IC95%: 9,112,1), y de contacto pasado para Ehrlichia de 19,0% (IC95%: 17,1-21,0) y para Rickettsia de 23,3% (IC95: 21,2-25,3). Se concluye, que existe una mayor prevalencia para contacto o infección pasada en la población estudiada, tanto para Rickettsia como para Ehrlichia, lo cual nos estaría indicando un comportamiento endémico de ambos agentes infecciosos en las áreas geográficas mencionadas.

To determine the prevalence of antibodies to Rickettsia and Ehrlichia, related to recent and past contact, in the border towns of the departments Loreto, Madre de Dios, Tumbes and Tacna, during the years 2010 and 2011, surveys for serological evaluation were carried out using the indirect immunofluorescence assay (IIF), in order to detect immunoglobulins G (IgG) and Total immunoglobulins (IgA + IgM + IgG) in 1634 persons. A recent contact prevalence was found for Ehrlichia of 3.7% (CI 95%: 3.0-4.4) and for Rickettsia of 10.6% (CI 95%: 9.1-12.1), and past contact for Ehrlichia of 19.0% (CI 95%: 17.1-21.0) and for Rickettsia of 23.3% (CI 95%: 21.2-25.3). It is concluded that there is a higher prevalence for past contact or infection in the population studied, both for Rickettsia and Ehrlichia, which would indicate an endemic behavior to both infectious agents in the geographic areas mentioned.

Detection and molecular characterization of Hepatozoon canis, Babesia vogeli, Ehrlichia canis, and Anaplasma platys in dogs from Metro Manila, Philippines

The study of canine vector-borne diseases in the Philippines started in the 1970s but only gained interest in the past decade. Characterization of such diseases in the Philippines remains incomplete, thus, it is necessary to obtain additional information on the prevalence and diversity of canine tick-borne diseases in the country. In this study, blood samples were obtained at two veterinary clinics in Metro Manila, Philippines from 114 dogs suspected of having canine tick-borne pathogens. Polymerase chain reaction (PCR) was performed on whole blood DNA extracts followed by sequencing, and the following pathogens were detected: Hepatozoon (H.) canis (5.26%), Babesia (B.) vogeli (5.26%), Ehrlichia (E.) canis (4.39%), and Anaplasma platys (3.51%). Additionally, a set of multiplex PCR primers were developed to detect H. canis, Babesia spp. (B. canis and B. vogeli), and E. canis in canine blood. Multiplex and conventional single-reaction PCR results for the 114 dog blood samples were similar, except for one H. canis sample. Multiplex PCR is, therefore, a useful tool in screening infected dogs in veterinary clinics. This study's results, together with those of previous studies in the country, show that canine vector-borne pathogens are an emerging veterinary concern in the Philippines.

Avaliação das alterações hemostáticas e do risco tromboembólico em cães com AHIM / Evaluation of hemostatic abnormalities and thromboembolic risk in dogs with IMHA

A anemia hemolítica imuno-mediada (AHIM) é a causa mais comum dentre as anemias hemolíticas e a doença imuno-mediada de maior prevalência em cães, incluindo causas primárias e secundárias. As AHIM tem sido associadas a estados de hipercoagulabilidade, sendo o tromboembolismo a complicação mais comum. Este estudo teve como objetivo correlacionar as possíveis alterações hemostáticas e o risco tromboembólico nas AHIM e nas anemias por outras etiologias. Para tanto, foram selecionados 76 cães anêmicos (hematócrito ≤ 20%) somados ao menos um sinal clínico comumente associado à AHIM ou possuir pré-disposição racial. Foram realizados os seguintes testes para os animais selecionados: teste de citometria de fluxo e avaliação do perfil hemostático (contagem de plaquetas, TP, TTPA, TT, AT, PDF e Dímeros D); além de hemograma com contagem de reticulócitos, pesquisa de hematozoários em sangue periférico, PCR para Ehrlichia sp. e sorologia para leptospirose. 59 cães foram positivos para AHIM. O estado tromboembólico foi caracterizado pela presença de alteração em três ou mais testes do perfil hemostático. 74,6% casos de AHIM foram atribuídos às doenças infecciosas, sendo em sua maioria associados à Ehrlichia sp. (88,6%). 72,1% apresentaram trombocitopenia e 57,6% apresentaram anemia regenerativa com valores significativamente maiores de metarrubrícitos e contagem de reticulócitos. Não houve diferença estatística entre os grupos de cães anêmicos (positivos e negativos para AHIM). Os cães anêmicos apresentaram valores médios maiores de TTPA e menores de AT e contagem de plaquetas quando comparados aos cães saudáveis (p < 0,05). 25 cães positivos e sete negativos apresentaram estado tromboembólico. A especificidade de PDF foi menor (30,2%) quando comparada outros estudos. A escolha da classe de Ig não interfere no diagnóstico de AHIM...

Immune-mediated hemolytic anemia (IMHA) is the most common cause of hemolytic anemia and the most prevalent immune-mediated disease in dogs, which is classified in primary or secondary. IMHA has been associated with hypercoagulability state and thromboembolism has been referred as the most common complication. The purpose of this study was to correlate the possibility of hemostatic abnormalities and the thromboembolic risk in IMHA and in anemias of other etiologies. 76 dogs were selected, all exhibiting hematocrit lower than 20% and at least one clinical sign commonly associated with IMHA or breed predisposition. These dogs were tested for IMHA by flow cytometry. Hemostatic tests (platelet count, PT, APTT, TT, AT, PDF and D-dimer) as well as CBC, reticulocyte count, blood parasite search in peripheral blood smear, Ehrlichia sp. and leptospirosis tests were performed in all dogs. 59 dogs were positive for IMHA. The thromboembolic risk was characterized by the presence of three or more changes in the tests of the hemostatic profile. 74.6% cases of IMHA were attributed to infectious diseases and was mostly associated with Ehrlichia sp. (88.6%). 72.1% of dogs had thrombocytopenia and 57.6% had regenerative anemia with significantly higher values of metarubricyte and reticulocyte count. There were no significant changes between two anemic groups (positive and negative for IMHA). Anemic dogs had higher APTT mean value and lower AT and platelet counts mean values than the control group (p<0.05). 25 dogs with IMHA and seven dogs without IHMA had thromboembolic state. The specificity of PDF was lower (30.2%) than previous studies. The choice of the Ig class does not affect the diagnosis of IMHA...

Tick-borne rickettsial pathogens in questing ticks, removed from humans and animals in Mexico

Tick-borne rickettsial diseases (TBRD) are commonly encountered in medical and veterinary clinical settings. The control of these diseases is difficult, requiring disruption of a complex transmission chain involving a vertebrate host and ticks. The geographical distribution of the diseases is related to distribution of the vector, which is an indicator of risk for the population. A total of 1,107 ticks were collected by tick dragging from forests, ecotourism parks and hosts at 101 sites in 22 of the 32 states of Mexico. Collected ticks were placed in 1.5 mL cryovials containing 70% ethanol and were identified to species. Ticks were pooled according to location/host of collection, date of collection, sex, and stage of development. A total of 51 ticks were assayed by polymerase chain reaction (PCR) to confirm species identification using morphological methods. A total of 477 pools of ticks were assayed using PCR techniques for selected tick-borne pathogens. Anaplasma phagocytophilum was the most commonly detected pathogen (45 pools), followed by, Ehrlichia (E.) canis (42), Rickettsia (R.) rickettsii (11), E. chaffeensis (8), and R. amblyommii (1). Rhipicephalus sanguineus was the tick most frequently positive for selected pathogens. Overall, our results indicate that potential tick vectors positive for rickettsial pathogens are distributed throughout the area surveyed in Mexico.

Detecção de Theileria equi e Babesia caballi e anticorpos anti-Ehrlichia spp. em equídeos do Pantanal Mato-Grossense, Brasil / Detection of Theileria equi, Babesia caballi and anti-Ehrlichia spp antibodies in equides from the Pantanal of Mato Grosso State

O presente estudo avaliou equídeos de 19 fazendas da região do Pantanal Mato-Grossense, sendo 121 equídeos testados pela reação em cadeia pela polimerase (PCR), para detectar fragmentos dos genes dos seguintes gêneros: Babesia, Theileria, Anaplasma, Ehrlichia, e Neorickettsia, e pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), para detectar anticorpos anti-Ehrlichia spp. Das amostras testadas na PCR, 17 (14,0%) animais de nove (47,3%) fazendas foram positivos. Das amostras positivas, 16 foram 100% idênticas a sequencias de Theileria equi e uma foi 99% similar à sequência de Babesia caballi, todas disponíveis no GenBank. Pela RIFI, 48 (39,6%) equídeos foram soropositivos para antígenos de E. canis, sendo 40 (83,3%) amostras com títulos de 40 e oito (16,6%) com títulos de 320. Todas as fazendas avaliadas (100%) apresentaram equídeos soropositivos. Os resultados do presente estudo demonstram que T. equi e B. caballi infectam equinos na região, e a presença de anticorpos anti-Ehrlichia spp. indica a circulação de espécies antigenicamente relacionadas aos gêneros Ehrlichia e Anaplasma, apesar de a negatividade nos exames de PCR indicar provável processo crônico desses agentes.

The present study evaluated 121 equids from 19 ranches in the Pantanal region of Mato Grosso State through Polimerase Chain Raction (PCR) to detect Babesia, Theileria, Anaplasma, Ehrlichia and Neorickettsia partial genes and the Imunofluorescent Antibody Test (IFAT) to evaluate anti-Ehrlichia spp. antibodies. From the total tested in PCR, 17 (14.0%) equids from 9 (47.3%) farms were positive, and 16 yielded amplicons 100% identical to Theileria equi and one presented 99% similarity to Babesia caballi available on GenBank. Forty eight (39.6%) equids were positive by IFAT and 40 showed titers of 40 (83.3%) and 8 showed titers of 320 (16.6%). All ranches (100%) presented seropositive equids. Our results showed that T. equi and B. caballi are infecting equids in the region and the presence of anti-Ehrlichia antibodies suggests that species closely related to the genera Ehrlichia and Anaplasma are circulating among the equid local population. Moreover, the negative results in PCR is possibly related to the chronic infection phase.

Canine ehrlichiosis: prevalence and epidemiology in northeast Brazil / Erliquiose canina: prevalência e epidemiologia no nordeste do Brasil

Ehrlichiosis is a zoonotic disease that is caused by bacteria of the genus Ehrlichia. The aims of this study were to detect the presence of Ehrlichia spp. in the blood of dogs in Ituberá, Bahia, and to compare the sensitivities and specificities of blood smear, serological, and molecular examinations. Furthermore, this study identified factors associated with exposure to the agent in dogs in this locality. Blood samples were collected from 379 dogs and submitted for indirect immunofluorescent assay and polymerase chain reaction testing for the detection of Ehrlichia spp. antibodies and DNA, respectively. Additionally, a peripheral blood smear was obtained from the ear tip for parasite identification. Of the 379 animals, 12.4%, 32.7%, and 25.6% were identified as positive on the blood smear, serological, and molecular tests, respectively. The dogs positive in one of the three techniques were considered exposed (46.9%). Younger dogs and rural habitat were protective factors and presence of ticks and contact with other dogs were the risk factors associated with exposure to the agent. It was concluded that dogs of Ituberá have high positivity for Ehrlichia spp. and that the diagnostic methods used for detection are complementary.

Erliquiose é uma doença zoonótica causada por bactérias do gênero Ehrlichia. O objetivo desse estudo foi detectar a presença de Ehrlichia spp. no sangue de cães em Ituberá-BA, e comparar as sensibilidades e especificidades do esfregaço sanguíneo, e testes sorológico e molecular. Além disso, esse estudo identificou fatores associados com a exposição ao agente em cães desta localidade. Amostras de sangue foram coletadas de 379 cães e submetidas à Reação de Imunofluorescência Indireta e Reação em Cadeia de Polimerase para detecção de anticorpos e DNA de Ehrlichia spp., respectivamente. Adicionalmente, sangue periférico de ponta de orelha foi coletado para identificação do parasita. Dos 379 animais, 12,4%, 32,7% e 25,6% foram identificados como positivos no esfregaço sanguíneo, teste sorológico e molecular, respectivamente. Cães positivos em uma das três técnicas foram considerados expostos (46,9%). Cães mais novos e hábitat rural foram fatores de proteção e presença de carrapatos e contato com outros cães foram os fatores de risco associados à exposição ao agente. Foi concluído que, os cães do município de Ituberá têm alta positividade para Ehrlichia spp. e que os diferentes métodos diagnósticos utilizados para sua detecção são complementares.

Detection of Tick-Borne Pathogens in the Korean Water Deer (Hydropotes inermis argyropus) from Jeonbuk Province, Korea

The objective of this study was to investigate the prevalence of tick-borne pathogens in the Korean water deer (Hydropotes inermis argyropus). Pathogens were identified using PCR which included Anaplasma, Ehrlichia, Rickettsia, and Theileria. Rickettsia was not detected, whereas Anaplasma, Ehrlichia, and Theileria infections were detected in 4, 2, and 8 animals, respectively. The most prevalent pathogen was Theileria. Of the 8 Theileria-positive animals, 2 were mixed-infected with 3 pathogens (Anaplasma, Ehrlichia, and Theileria) and another 2 animals showed mixed-infection with 2 pathogens (Anaplasma and Theileria). Sequencing analysis was used to verify the PCR results. The pathogens found in this study were identified as Anaplasma phagocytophilum, Ehrlichia canis, and Theileria sp. To the best of our knowledge, this is the first report identifying these 3 pathogens in the Korean water deer. Our results suggest that the Korean water deer may serve as a major reservoir for these tick-borne pathogens, leading to spread of tick-borne diseases to domestic animals, livestock, and humans. Further studies are needed to investigate their roles in this respect.

Estudo da coinfecção Leishmania infantum e Ehrlichia canis em cães numa área endêmica para leishmaniose visceral canina / Study co infection Leishmania infantum and Ehrlichia canis in dogs in an endemic area for canine visceral leishmaniasis

A Erliquiose Monocítica Canina (EMC) e a Leishmaniose Visceral Canina (LVC) são duas doenças, transmitidas por vetores, com ampla distribuição mundial. Os agentes causadores dessas doenças são Ehrlichia canis e Leishmania infantum, respectivamente. Enquanto a EMC é transmitida por carrapatos, principalmente Rhipicephalus sanguineus, a Leishmania é inoculada no hospedeiro através do inseto-vetor da subfamilia Phlebotominae. A maioria dos sinais físicos são comuns às duas enfermidades, o que dificulta o diagnóstico clínico e o tratamento, especialmente em áreas endêmicas. Poucos são os estudos relacionados à coinfecção da erliquiose e leishmaniose caninas no Brasil. No Piauí, particularmente em Teresina, ainda não se tem dados concretos sobre a prevalência dessas afecções.Os sinais físicos variam com a severidade da infecção, a resposta imune do hospedeiro e a presença de coinfecção. Assim, buscamos avaliar cães, independente dos sinais físicos, atendidos no hospital universitário e clínicas particulares da cidade de Teresina, Piauí quanto a frequência de erliquiose e leishmaniose caninas no período de março de 2012 a setembro de 2014...

The Canine Monocytic Ehrlichiosis (CME) and Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) are the two vector-borne diseases with worldwide distribution. The causative agents of these diseases are Ehrlichia canis and Leishmania infantum, respectively. While CME is transmitted by ticks, especially Rhipicephalus sanguineus, Leishmania is inoculated into the host through the insect vector of the subfamily Phlebotominae. Most clinical signs are common to both conditions, which hinders the clinical diagnosis and treatment, especially in endemic areas. There are few studies related to the coinfection of canine ehrlichiosis and leishmaniasis in Brazil. In Piaui, particularly in Teresina, there is not yet concrete data on the prevalence of these diseases. The clinical signs vary according to the severity of the infection, to the host immune response and to the presence of coinfection. Thus, we sought to evaluate dogs, regardless of clinical signs, seen at university hospital and private clinics in the city of Teresina, Piauí, for the frequency of canine ehrlichiosis and leishmaniasis from March 2012 to September 2014...