Comparison of fast protein liquid chromatography (FPLC) with HPLC, electrophoresis & microcolumn chromatography techniques for the diagnosis of β-thalassaemia.

Background & objectives: β-thalassaemia is a genetic disorder and an important health problem around the world. Quantitative haemoglobin A2 (HbA2) levels are used for the diagnosis of β-thalassaemia. The conventional methods are high performance liquid chromatography (HPLC), electrophoresis, and microcolumn chromatography techniques. We established a fast protein liquid chromatography (FPLC) method, to measure quantitatively of HbA2 levels, and compared its efficacy with conventional methods. Methods: The FPLC method, using a DEAE Sepharose, Hi Trap anion-exchange column chromatography technique was set up for HbA2 measurement. In this study, 220 blood samples were screened for haemoglobin type by FPLC technique and also using HPLC, microcolumn chromatography and electrophoresis. Results: The FPLC results were highly correlated (r = 0.985, P<0.001) with those of HPLC for quantification of HbA2 as well as cellulose acetate electrophoresis (r = 0.977) and microcolumn chromatography (r = 0.980). The FPLC method showed 100 per cent sensitivity and specificity, positive and negative predictive value for β-thalassaemia diagnosis. In addition, the FPLC method was simple, rapid, low cost and reproducible. The HbA2/E range of FPLC for β-thalassaemia was 6-10 per cent, HbE trait was 10-40 per cent, β-thalassaemia/HbE was 40-60 per cent and homozygous HbE was more than 60 per cent. Interpretation & conclusions: Our findings suggested that FPLC method could be used as a cost-effective method for routine β-thalassaemia diagnosis.

Cardiac and ocular manifestations in Egyptian patients with mucopolysaccharidoses

Cardiac and ocular manifestations were evaluated in 21 patients clinically suspected of mucopolysaccharidosis. After electrophoresis analysis of urinary glycoaminoglycans, 3 patients were excluded because their results did not correlate with any known type of mucopolysaccharidosis. Echocardiography revealed abnormal findings in 11 patients [61.1%]. The mitral valve was the most commonly affected valve; 7 patients [38.9%] had thickened mitral valve and 6 had mitral regurge. Corneal opacities were found in 3 patients [16.7%] and progressive increase in intraocular pressure in 1 patient [5.6%], while fundus examination showed early optic atrophy in 1 patient [5.6%] and bilateral papilloedema in 2 patients [11.1%]

Utilidad clínica de la electrforesis de proteínas

El suero humano contiene más de 120 proteínas que pueden ser identificadas bioquímicamente,y separadas y cuantificadas electroforéticamente según sus respectivas características físico-químicas. De acuerdo con las técnicas utilizadas, en la electroforesis de proteínas en acetato de celulosa es posible identificar cinco grupos, a saber: albúmina, a1 globulinas, a2 globulinas, b globulinas y y globulinas. El análisis de la electroforesis de proteínas debe ser cuantitativo y cualitativo. La electroforesis de proteínas no aporta resultados patognomónicos y , en consecuencia, las alteraciones que en ella se encuentren deben ser confirmadas por métodos de mayor sensiblidad y especificidad. Como tal, la prueba es una excelente heramienta de tamización, muy similar al hemograma y al citoquímico de orina en la clínica. Se definen los valores de referencia, las alteraciones más significativas de cada banda electroforética y los principales patrones, en particular aquellos de mayor interés clínico. Por último, se establecen las bases para su adecuada interpretación.

El laboratorio en la investigación de la esclerosis múltiple / Laboratory in multiple sclerosis

Finalmente, no existen tests definitivos para EM en el laboratorio; sin embargo, los múltiples resultados anormales, producto del examen combinado del LCR pueden ser sensibles y específicos para el diagnóstico de EM. Más del 90 por ciento de los individuos con EM tendrán anormalidades en LCR. El hallazgo diagnóstico más ampliamente usado es el de síntesis de IgG localizada en LCR y la demostración de bandas oligoclonales en la zona Y por IEF o EF en gel de agarosa

La electroforesis de proteínas y su aplicación en la clínica

La experiencia clínica de muchos años ha demostrado que la electroforesis de proteínas en suero es una excelente prueba de laboratorio. Son múltiples las entidades en las que tienen gran importancia clínica. Para su adecuada utilización e interpretación se requiere tener conocimientos acerca de su composición, comportamiento y variaciones de acuerdo a cada entidad nosológica. Las publicaciones sobre este tópico son escasas y las revisiones disponibles fueron publicadas hace muchos años. En este artículo se describen las principales fracciones obtenidas en la electroforesis en acetato de celulosa y se establece una correlación con las principales patologías que la modifican. Además, se definen y esquematizan los patrones electroforéticos mas característicos y de mayor ocurrencia clínica.