Nota técnica 09 DVE/DVZ/COVISA/2020: vigilância e manejo clínico da esporotricose humana no município de São Paulo / Technical report 09 DVE / DVZ / COVISA / 2020: surveillance and clinical management of human sporotrichosis in the city of São Paulo

A Esporotricose é uma infecção fúngica de implantação, subaguda ou crônica, causada por fungo do complexo Sporothrix schenkii. No Brasil, a espécie mais frequente é S.brasiliensis. No município de São Paulo, em 2011, foram identificados os primeiros casos de esporotricose em felinos e em humanos, na região de Itaquera, na Coordenadoria Regional de Saúde Leste. A partir de 2018, houve um aumento significativo do número de casos em felinos, acompanhado do aumento de casos humanos. Esta Nota técnica, elaborada pela Coordenadoria de Vigilância em Saúde de São Paulo, tem como objetivo orientar a vigilância e o manejo clínico da esporotricose humana no município de São Paulo. O documento aborda a situação epidemiológica da esporotricose no município de São Paulo, o agente etiológico, as formas de transmissão, as manifestações clínicas, os diagnósticos diferenciais, o diagnóstico laboratorial, o tratamento, o prognóstico e as definições de casos suspeito e confirmado, além dos fluxos de atendimento e vigilância epidemiológica de esporotricose humana na cidade e da orientação para coleta e armazenamento de amostras para envio ao laboratório.

Nota técnica 09 - vigilância e manejo clínico da esporotricose humana no município de São Paulo / Technical note 09 - surveillance and clinical management of human sporotrichosis in the city of São Paulo

Nota técnica elaborada para nortear a vigilância e manejo clínico da esporotricose humana no município de São Paulo. O documento aborda a situação da esporotricose no município de São Paulo, agente etiológico, transmissão, manifestações clínicas da esporotricose humana, diagnóstico diferencial, diagnóstico laboratorial, tratamento, prognóstico, unidades de referencia, vigilância epidemiológica e fluxos de atendimento de casos humanos. Apresenta ainda orientações para coleta, armazenamento e ficha de encaminhamento de amostras para diagnóstico laboratorial, ficha para notificação, ficha de encaminhamento de caso suspeito e fluxograma de atendimento de casos humanos.

Caracterização e avaliação da capacidade protetora dos peptí­deos imunogênicos de Sporothrix brasiliensis / Characterization and evaluation of the protective capacity of the immunogenic peptides of Sporothrix brasiliensis

A esporotricose é uma doença crônica que envolve o tecido subcutâneo afetando seres humanos e animais, causada pelo fungo termodimórfico Sporothrix spp.. A esporotricose é endêmica na América latina, principalmente no Brasil que teve o maior surto zoonótico já registrado, ocorrendo na cidade do Rio de Janeiro. A espécie Sporothrix brasiliensis é a mais diagnosticada no surto e a mais virulenta entre as especies de Sporothrix spp., causando formas mais graves da doença. A esporotricose em gatos é endêmica, fatal e um dos principais fatores pelo alto número de casos no Rio de Janeiro. O tratamento é longo e não vem sendo o suficiente para conter o número de casos da doença. Uma vacina contra a esporotricose poderia mudar esse paradigma no Brasil. O presente trabalho obteve o proteoma da cepa S. brasiliensis 5110 por meio de uma eletroforese 2D, e caracterizou e identificou as possíveis proteínas imunogênicas do fungo por espectrometria de massa. Por meio de programas de predição, foi avaliado e sintetizado 7 sequências de aminoácidos,das proteínas identificadas com maiores chances de se acoplar a molécula MHC de classe II. Apenas 3 foram capazes de induzir proliferação in vitro, os peptídeos ZR3, ZR4 e ZR8, que foram utilizados como vacina na esporotricose subcutânea e avaliados sua eficácia por meio da carga fúngica, diâmetro das lesões, perfil celular e níveis de citocinas. Neste trabalho concluímos que o peptídeo ZR8 foi o melhor candidato à vacina na esporotricose, pois foi capaz de diminuir o diâmetro das lesões, aumentar os níveis de citocinas protetoras (IFN-γ, IL-17A e IL-1ß) e aumentar o número de células TCD4+ e CD3-/CD19+, sendo assim induzindo uma resposta imunológica protetora na esporotricose subcutânea

Sporotrichosis is a chronic disease, which involves the subcutaneous tissue affecting humans and animals caused by the thermodymorphic fungus Sporothrix spp. Sporotrichosis is endemic in Latin America, mainly in Brazil that had the largest zoonotic outbreak ever recorded, occurring in the city of Rio de Janeiro. The Sporothrix brasiliensis is the species more diagnosed in the outbreak and most virulent, causing severe forms of the disease. Sporotrichosis in cats is endemic, fatal and the main factors due to the high number of cases of the disease in Rio de Janeiro. The treatment is long, and has not been enough to contain the number of cases of sporotrichosis. A vaccine against sporotrichosis could change this paradigm in Brazil. The present work obtained the proteome of S. brasiliensis 5110 strain by 2D electrophoresis, and characterized and identified possible immunogenic proteins by mass spectrometry. By prediction programs were evaluated and synthesized 7 peptide sequence from antigenic proteins that have the highest chances of coupling to the MHC class II molecule. From these 7 peptides only 3 were able to induce proliferation in vitro, called ZR3, ZR4 and ZR8 peptides, that were used as a vaccine in subcutaneous sporotrichosis and evaluated their efficacy through fungal load, lesion diameter, cell profile and cytokine levels. We conclude that ZR8 peptide was the best candidate for sporotrichosis vaccine, since it was able to decrease the lesion diameter, increase the levels of protective cytokines (IFN-γ, IL-17A and IL-1ß) and increase the number of CD4+ T cells and CD3-/CD19+ inducing a protective immune response in subcutaneous sporotrichosis

Effects of essential oils of Rosmarinus officinalis Linn. and Origanum vulgare Linn. from different origins on Sporothrix brasiliensis and Sporothrix schenckii complex / Efeitos dos óleos essenciais de Rosmarinus officinalis Linn. e Origanum vulgare Linn. de diferentes origens em Sporothrix brasiliensis e complexo Sporothrix schenckii

Rosmarinus officinalis L. (rosemary) and Origanum vulgare L. (oregano) are known to have antimicrobial properties, but studies on sporotrichosis are scarce. This study aimed to evaluate the anti-Sporothrix spp. activity of essential oils from commercial products and oils extracted from aerial parts of these plants and analyze their chemical constituents. S. schenckii complex and S. brasiliensis (n: 25) isolated from humans, cats, dogs, and environmental soil were tested through M27-A3 guidelines of CLSI with modification for phytotherapics. The essential oils of R. officinalis L. were similar for MIC50 and MFC50 ≤2.25mg/mL for extracted oil; and 4.5mg/mL and 9mg/mL, respectively, for commercial oil. Both products showed MIC90 of 18mg/mL and MFC90 of 36mg/mL. In O. vulgare L., the extracted oil had better activity with MIC50 and MFC50 ≤2.25mg/mL, and MIC90 and MFC90 of 4.5mg/mL, whereas the commercial oil showed MIC50 and MFC50 of 9mg/mL and MIC90 18mg/mL, respectively, and MFC90 of 36mg/mL. Through gas chromatography (CG/FID), thymol and α-terpinene were majority for extracted oil of O. vulgare L., and carvacrol and γ-terpinene made up the majority of the commercial oil. Both essential oils of R. officinalis L. showed 1,8-cineole and α-pinene as major. The fungal isolates were susceptible to all tested essential oils, including in itraconazole-resistant S. brasiliensis isolates. The extracted and commercial oils of the plants presented in vitro anti-Sporothrix spp. activity, and they are promising for treatment of sporotrichosis, including in cases refractory to itraconazole. More studies should be performed about toxicity and in vivo efficacy for its safe use.(AU)

Rosmarinus officinalis L. (alecrim) e Origanum vulgare L. (orégano) são conhecidos pelas propriedades antimicrobianas, entretanto seus estudos na esporotricose são escassos. Este trabalho objetivou avaliar a atividade anti-Sporothrix spp. de óleos extraídos e comerciais dessas plantas e analisar seus constituintes químicos. Isolados do complexo S. schenckii e S. brasiliensis (n: 25) de humanos, gatos, cães e solo, foram testados pela diretriz M27-A3 do CLSI com modificações para fitoterápicos. Os óleos de R. officinalis L. foram similares com CIM50 e CFM50 ≤2.25mg/mL para extraído; e 4.5mg/mL e 9mg/mL, respectivamente, para comercial. Ambos os produtos demonstraram CIM90 de 18mg/mL e CFM90 de 36mg/mL. Em O. vulgare L., o óleo extraído apresentou melhor atividade com CIM50 e CFM50≤2.25mg/mL e CIM90 e CFM90 de 4.5mg/mL, ao passo que o óleo comercial mostrou CIM50 e CFM50 de 9mg/mL; e CIM90 de 18mg/mL e CFM90 de 36mg/mL. Por meio da cromatografia gasosa (CG/FID), timol e α-terpineno foram majoritários para o óleo extraído de O. vulgare L., e carvacrol e γ-terpineno para o comercial. Ambos os óleos de R. officinalis L. apresentaram 1,8-cineol e α-pineno como prevalentes. Os isolados foram sensíveis a todos os óleos essenciais testados, inclusive S. brasiliensis, resistentes ao itraconazol. Os óleos extraídos e comerciais de R. officinalis L. e O. vulgare L. apresentaram atividade anti-Sporothrix spp. in vitro e são promissores para o tratamento da esporotricose, inclusive em casos refratários ao itraconazol. Mais estudos devem ser realizados sobre toxicidade e eficácia in vivo para seu uso seguro.(AU)

Esporotricosis y paracoccidioidomicosis en Perú: experiencias en prevención y control / Sporotrichosis and paracoccidioidomycosis in Peru: experiences in prevention and control

El panorama epidemiológico de la esporotricosis y la paracoccidioidomicosis en Perú y Latinoamérica es esporádico, fragmentario, y geográficamente limitado, debido principalmente a la falta de notificación obligatoria y a la escasa cobertura diagnóstica. Sin embargo, los aportes de investigaciones relacionados a entender la interacción de estos hongos, la respuesta del huésped y el ambiente, como el uso de un análisis espacial que relacione la distribución de estas micosis, la densidad poblacional y el clima, contribuyen o están encaminadas, al diseño de medidas de prevención y control de estas micosis y propone el manejo de mapas de riesgo epidemiológicos, a partir del hábitat del hongo, por los médicos, los turistas y las personas que viven en zonas rurales, donde estas micosis son endémicas. El objetivo del artículo es presentar una revisión del tema mediante resultados de investigaciones que contribuyen a la prevención y control de estas micosis.

The epidemiological picture of sporotrichosis and paracoccidioidomycosis in Peru and Latin America is sporadic, fragmented, and geographically limited, mainly due to lack of mandatory reporting and limited diagnostic coverage. However, research contributions related to understanding the interaction of these fungi, the response of the host and the environment, the use of spatial analysis that relates the distribution of these mycoses, population density and climate, contributes to the design of prevention and control strategies of these mycosis and suggest epidemiological risk maps management, based on the habitat of the fungus. This information will be used by doctors, tourists and people living in rural areas where mycoses are endemic. The aim of the paper is to present a review of the topic through research findings that contribute to the prevention and control of these mycosis.

Construção e expressão de anticorpo humanizado a partirdo anticorpo monoclonal contra proteína de 70 kDa de Sporotrix schenckii (P6E7) / Construction and expression of humanized antibody from the monoclonal antibody against the protein of 70 kDa Sporotrix schenckii (P6E7)

Sporothrix shenckii é o agente etiológico da esporotricose, micose de carater crônico e de ampla distribuição mundial. No Brasil, vem crescendo o número de casos da doença, bem como a incidência de formas clínicas graves ou atípicas. Nosso grupo de pesquisa desenvolveu um anticorpo monoclonal contra o componente antigênico proteíco de 70 kDa, secretado pelas células leveduriformes de S. schenckii, denominado anticorpo monoclonal (AcMo) P6E7. Este AcMo apresentou atividade profilática e terapêutica na esporotricose experimental, no entanto, este anticorpo possui origem murina, o que pode gerar uma resposta imunogênica quando administrado em humanos, impossibilitando sua utilização por tempo prolongado. Visando sua possível utilização no tratamento da esporotricose humana, a nossa proposta foi a humanização do AcMo P6E7 na forma de FvFc (Fv-linker- Fc) através de engenharia genética. Inicialmente construimos duas versões uma humanizada e outra quimérica do AcMo contra a fração de 70 kDa do antigeno de S. schenckii. Os anticorpos foram expressos em vetores de expressão dicistrônicos e produzidos com eficiência e estabilidade estrutural em células de mamíferos da linhagem CHO. Posteriormente, esses anticorpos foram purificados por cromatografia de afinidade e analisados quanto a sua capacidade de ligação ao fungo e função efetora. Verificamos que os FvFcs construídos foram capazes de se ligar a porção de 70 kDa do antígeno de S. schenckii. Através de ensaios de fagocitose, constatamos que os fragmentos FvFc do P6E7 humanizado e quimérico foram capazes de opsonizar as leveduras de S. schenckii aumentando, assim, o índice fagocítico em macrófagos humanos. Esses dados em conjunto, sugerem a possível utilização do anticorpo construído no tratamento da esporotricose humana

Sporothrix shenckii is the etiological agent of sporotrichosis, a chronical fungal infection that shows a worldwide distribution. In Brazil, there is a growing number of cases of sporotrichosis, as well as the incidence of severe or atypical clinical forms. Our research group developed a monoclonal antibody (mAb) against the fungal antigenic component a protein of 70 kDa, secreted by S. schenckii yeasts called P6E7. This mAb showed prophylactic and therapeutic activity in experimental sporotrichosis, however, this antibody has murine origin, which can generate an immune response when administered to humans, precluding their use for prolonged time. For its possible use in the treatment of human sporotrichosis, our proposal is the humanization of mAb P6E7 through genetic engineering. Initially, we built two versions of the original antibody: an humanized version and a chimeric antibody both against the 70 kDa fraction from S. schenckii antigen. The antibodies were expressed in dicistronic expression vectors and were efficiently produced in mammalian cells CHO strain, showing good structural stability. Subsequently, these antibodies were purified by affinity chromatography and assayed for their binding ability to the fungus and effector function. We found that the built os FvFcs (Fv-linker- Fc) fragments were capable of binding to the 70 kDa portion of S.schenckii antigen. Through phagocytosis assays, we found that the FvFc fragments from the humanized and chimeric P6E7 were able to opsonize S. schenckii yeasts, thus increasing the phagocytic index in human macrophages. Together, These data suggest the potential use of the antibodies constructed in the treatment of human sporotrichosis

Esporotricose: a evolução e os desafios de uma epidemia / Sporotrichosis: development and challenges of an epidemic

A ocorrência de esporotricose em animais e sua transmissão ao ser humano têm sido relatadas em diversos países. Contudo, em nenhum lugar a doença assumiu proporções epidêmicas, envolvendo pessoas e gatos, como no Estado do Rio de Janeiro, Brasil. Dados preliminares apontam para aproximadamente 2200 casos humanos diagnosticados até dezembro de 2009. No Laboratório de Pesquisa Clínica em Dermatozoonoses em Animais Domésticos foram atendidos, até essa data, aproximadamente 3244 gatos. A distribuição geográfica mostra concentração de casos na região metropolitana da Cidade do Rio de Janeiro. O grupo mais acometido são as mulheres de baixo nível socioeconômico, com idade de 40 a 59 anos, que realizam atividades domésticas. O itraconazol foi a droga de primeira escolha para o tratamento. Embora a esporotricose normalmente não acometa órgãos além da pele, mucosa e subcutâneo, tem um custo social indireto - pelo absenteísmo ao trabalho, pelo sofrimento durante a doença ativa e pelo aspecto desagradável das lesões cicatriciais. Por sua vez, nos gatos, é comum o acometimento sistêmico, levando a formas graves de difícil tratamento e evolução para o óbito. Considerando que o tempo de tratamento dos animais é maior do que nos seres humanos, tratar gatos com esporotricose tem sido um dos maiores entraves e permanece como o grande desafio para o controle da epidemia.

In the state of Rio de Janeiro, Brazil, sporotrichosis reached epidemic levels, involving humans and cats. Preliminary data indicate that approximately 2200 human cases were diagnosed between 1998 and December of 2009, and 3244 cats were treated. The geographic distribution of cases reveals a concentration in the City of Rio de Janeiro metropolitan area. The disease affects mostly women of a low socioeconomic status, aged 40 to 55 years, who work as housekeepers. Itraconazole has been the drug of choice for treatment. Although sporotrichosis does not usually affect organs other than the skin, mucosa, and subcutaneous tissue, it has an indirect social impact resulting from absenteeism, pain, and discomfort during the active disease stage, and the unpleasant appearance of the scars. In turn, systemic involvement is frequent in cats, leading to serious and difficult- to-treat forms of the disease and death. Considering that treatment time in animals is longer than in human beings, treating cats with sporotrichosis has been the greatest obstacle and the most important challenge for the control of this epidemic infection.

Esporotricose óssea e cutânea em canino / Cutaneos and osseous sporotrichosis in dog

A esporotricose é uma micose subcutânea causada pelo fungo dimórfico Sporothrix schenckii. Este artigo descreve o primeiro caso de esporotricose óssea e cutânea, em canino, na cidade de Pelotas, Rio Grande do Sul. O animal apresentava lesões ulceradas e crostosas, há aproximadamente três anos no plano nasal e membro torácico direito, dispnéia e apatia. Para confirmação do diagnóstico, foram realizados exames micológico, histopatológico, radiológico e hematológico. O animal foi tratado durante três meses com 10mg/kg de itraconazol,por via oral, obtendo-se a cura das lesões. Este estudo alerta clínicos de pequenos animais para a ocorrência desta micose em caninos na região de Pelotas, RS.

The sporotrichosis is a subcutaneous mycosis caused by dimorphic fungus Sporothrix schenckii. This article describes the first cutaneous and osseous sporotrichosis case in canine in the Pelotas city, Rio Grande do Sul. The animal presented crusts and ulcerated lesions,approximately the three years in the nasal plan and right hind-foot,dispneic and apathy. Mycological, histopathological, radiological and hematological diagnosis was realized. The animal was treated by three months with itraconazole, administered orally at a dosage of 10mg/kg, until lesions disappeared. This study alert small animals clinicians for the occurrence of this mycosis in dogs in the region of Pelotas, RS.

Uveíte anterior granulomatosa causada por Sporothrix schenckii / Granulomatous anterior uveites caused by Sporothrix schenckii

Os autores relatam o caso de uma paciente de 12 anos, com uveíte anterior granulomatosa portadora de esporotricase e ocular concomitantes. O caso é comparado com os achados da literatura e é chamada atençäo para a necessidade de se iniciar o tratamento específico precocemente.

Esporotricosis, historia natural y niveles de prevención / Sporotrichosis, natural history and levels of prevention

Se hace una revisión acerca de la esporotricosis, de acuerdo a la historia natural de la enfermedad y los niveles de prevención. Se hace énfasis en las medidas preventivas para evitar la infección, sobre todo en personas que están en contacto con productos vegetales que pudieran estar contaminados. Se revisan métodos de diagnóstico, tanto de laboratorio como de gabinete, resaltando la importancia a la intradermorreacción de la esporotriquina

Esporotricosis / Sporotrichosis

La esporotricosis es la micosis profunda más frecuente en Uruguay. Se expone la revisión del tema. A propósito de él se analizan las características del único agente etiológico de la enfermedad: el sporothrix schenckii. Respécto de la epidemiología se exponen el reservorio natural, los mecanismos de infección, la población receptiva, distribución geográfica, prevalencia e incidencia. Destaca la relación demostrada con la cacería de "mulitas" (Dasypus novemcinctus). Se exponen asimismo aspectos clínicos del diagnóstico, tratamiento y prevención