Identificação imuno-histoquímica de VEGF e IGF-1 em ovários de cadelas no anestro e estro / Immunohistochemical identification of VEGF and IGF-1 in ovaries of bitches on anestrus and estrus

Com o objetivo de verificar a presença de VEGF e IGF-1 nos ovários de cadelas, foram realizadas análises imuno-histoquímicas do estroma cortical; teca e granulosa de folículos secundários, terciários e terciários pré-ovulatórios luteinizados; e ovócitos de folículos primários, secundários e terciários de ovários de cinco cadelas em anestro (Anest) e cinco em estro (Est). A identificação das fases do ciclo estral foi realizada por citologia vaginal associada a dosagem plasmática de progesterona. Os ovários foram submetidos a tratamento imuno-histoquímico para identificação de VEGF (anticorpo primário PU 360-UP, Biogenex, USA; diluição 1:30) e IGF-1 (anticorpo primário PabCa, Gro-Pep, Austrália; diluição 1:100). Determinou-se um índice de imunomarcação (IM), para cada tecido avaliado, pela razão entre a área positivamente marcada dividida pela área total analisada. Para os ovócitos, verificou-se imunomarcação positiva ou negativa. As comparações de IM entre tecidos foram realizadas pelo teste de Wilcoxon (diferentes tecidos em mesmo grupo) ou Mann-Whitney (mesmo tecido entre diferentes grupos), todas no nível de 5% de significância. VEGF e IGF-1 foram identificados, de forma semelhante (P>0,05), em todas as estruturas avaliadas em ambos os grupos experimentais. Conclui-se que esses fatores de crescimento estão presentes em cadelas no anestro e estro, no estroma cortical ovariano, folículos em diferentes estádios de desenvolvimento e ovócitos.(AU)

In order to verify the presence of VEGF and IGF-1 in the ovaries of bitches, immunohistochemical analyzes of the cortical stroma; theca and granulosa of secondary, tertiary and tertiary luteinized preovulatory follicles; and oocytes of primary, secondary and tertiary follicles of ovaries from five bitches in anestrous (Anest) and five in estrus (Est) was performed. The identification of the phases of the estrous cycle was performed by vaginal cytology associated with the measurement of plasma progesterone. The ovaries were treated for immunohistochemical identification of VEGF (PU 360 primary antibody-UP, Biogenex, USA, dilution 1:30) and IGF-1 (primary antibody PabCa, Gro-Pep, Australia; 1:100 dilution). The immunostaining index (MI) was determined for each tissue by the ratio of positively marked area divided by total analyzed area. For oocytes immunostaining was determined as positive or negative. Comparisons of IM between tissues were performed with the Wilcoxon test (deferent tissues in the same group) or Mann-Whitney test (same tissue between different groups), all at 5% significance level. VEGF and IGF-1 have been similarly identified (P>0.05) in all structures evaluated in both groups. It is concluded that in bitches in estrus and anestrous these growth factors are present in ovary cortical stroma, follicles at different stages of development and oocytes.(AU)

Influence of Insulin-like Growth Factor I (IGF-I) on the survival and the in vitro development of caprine preantral follicles / Influência do Fator de Crescimento Semelhante à Insulina-I (IGF-I) sobre a sobrevivência e o desenvolvimento in vitro de folículos pré-antrais caprinos

The aim of this study was to investigate the effects of the insulin-like growth factor -I (IGF-I) on survival, activation (transition from primordial to primary follicles) and growth of caprine preantral follicles cultured in vitro. Fragments of ovarian cortex were cultured for one and seven days in the absence or presence of IGF-I (0, 50 and 100ng/ml). The non-cultured and cultured tissues were processed and analyzed by histology and transmission electron microscopy. The culture for one day in a medium with 100ng/ml of IGF-I showed 86.7% of morphologically normal follicles. These results were similar (P>0.05) to the percentage of normal follicles found in the control (96.7%). It was also found that this medium increased the percentage of follicular activation (developing follicles) with one day of culture. The oocyte and follicular diameters remained similar to the control by culturing for one day in a medium containing 100ng/ml of IGF-I. The ultrastructural analysis did not confirm the integrity of the follicular fragments in a medium containing IGF-I (100ng/ml) after one and seven days of culture. In conclusion, this study demonstrated that the addition of 100 ng/ml of IGF-I in the culture medium enables the development of preantral follicles of goats with one day of culture. However, it is not sufficient to maintain the follicular integrity and the follicular survival rate after seven days of culture.

O objetivo do presente estudo foi investigar os efeitos do fator de crescimento semelhante a insulina-I (IGF-I) na sobrevivência, ativação (transição de folículos primordiais para primários) e crescimento de folículos pré-antrais caprinos cultivados in vitro. Fragmentos de córtex ovariano foram cultivados por um e sete dias na ausência ou presença de IGF-I (0, 50 e 100ng/mL). Os tecidos não cultivados e cultivados foram processados e analisados por histologia e microscopia eletrônica de transmissão. O cultivo por um dia em meio com 100ng/mL de IGF-I apresentou 86,7% de folículos morfologicamente normais. Estes resultados foram semelhantes (P>0,05) ao percentual de folículos normais encontrados no controle (96,7%). Verificou-se ainda que este meio aumentou o percentual de ativação folicular (folículos em desenvolvimento) com um dia de cultivo. Os diâmetros ovocitário e folicular mantiveram-se semelhantes ao controle ao cultivar por um dia em meio contendo 100ng/mL de IGF-I. As análises ultraestruturais não confirmaram a integridade folicular dos fragmentos em meio contendo IGF-I (100 ng/mL) após um e sete dias de cultivo. Em conclusão, esse estudo demonstrou que a adição de 100 ng/mL de IGF-I no meio de cultivo ativa o desenvolvimento de folículos pré-antrais de caprinos com um dia de cultivo. Entretanto, não é suficiente para manter a integridade folicular e a taxa de sobrevivência folicular após sete dias de cultivo.

Comparación de los niveles séricos del factor de crecimiento similar a la insulina tipo I en los recien nacidos con peso bajo, normal y alto para la edad gestacional

Para evaluar la relación entre los niveles séricos del factor de crecimiento similar a la insulina tipo 1 (IGF-1) y el peso al nacer en los neonatos, se cuantificaron los niveles séricos del IGF-I en 23 neonatos con bajo peso para la edad gestacional (PBEG), 27 con peso adecuado para la edad gestacional (PAEG) y 27 con peso alto para la edad gestacional (PAEG). El peso al nacer en el primer grupo fue de 1.630ñ 147 gms (MñDS), del segundo fue de 3.108ñ 290gms, y del tercero fue de 4.235ñ 268mgs. Los valores de IGF-I fueron de 0.3ñ 0.08, 47.9ñ 30.4, 104.3ñ 50.1 ng/ml, respectivamente (p<0.0001). Se encontró una correlación significativa entre el peso al nacer y los valores séricos de IGF-I con r=0.7 y p<0.0001. En conclución, hay una relación significativa entre los niveles séricos de IGF-I y el peso al nacer, a mayor peso nivel de IGF-I.

Factor de crecimiento similar a la insulina tipo I en neonatos con retardo del crecimiento intrauterino: modificación temprana con la alimentación enteral

Para mostrar el efecto de la alimentación enteral sobre los niveles séricos del factor de crecimiento similar a la insulina tipo I (IGF-I) en neonatos con retardo del crecimiento intrauterino (RCIU), se midieron los niveles séricos de IGF-I en 25 neonatos con RCIU, antes y a las 12 y 24 horas de iniciar la alimentación. Los niveles básales de IGF-I en los neonatos con RCIU fueron 0.48ñ 1.02 nmol/I. A las 12 horas de iniciar la alimentación los niveles séricos de IGF-I fueron de 1.18 ñ 1.88 (p=0.22), y a las 24 horas fueron 4.39ñ 2.63 (p<0.0001). Los neonatos que fueron alimentados con leche materna tuvieron valores más altos de IGF-I (6.12ñ 2.44) a las 24 horas que los alimentados con fórmula láctea (2.72ñ1.3) (p=0.009). En conclusión, la alimentación enteral en los neonatos con RCIU aumenta rápidamente los niveles séricos de IGF-I, siendo este aumento mayor en los alimentados con leche materna