The Sensitivity and Specificity of Lassa Virus IgM by ELISA as Screening Tool at Early Phase of Lassa Fever Infection

"Background: Early diagnosis; prompt treatment; and disease containment are vital measures in the management of Lassa fever (LF); a lethal and contagious arenaviral hemorrhagic disease prevalent in West Africa. Lassa Virus (LAV)-specific Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) test; the gold standard for diagnosis; is unavailable in most centers. Serologic detection of LAV IgM is a more accessible tool and this work was to investigate its adequacy as an early marker for LF. Patients and Methods: A prospective case-control study conducted July 2007-March 2011 in a tertiary referral health center in Nigeria. Blood samples for test and control were evaluated for Lassa specific antigens and IgM using RT-PCR (primers S36+ and LVS 339) and indirect ELISA (Lassa Nucleo-protein (NP)-Antigen) respectively. RT-PCR outcome was used as standard to test for the sensitivity and specificity of IgM. Results: Of the 37 confirmed cases of LF infection by RT-PCR; 21 (57) were IgM positive. Amongst the 35 confirmed negative cases (control group); eight were IgM positive. The diagnostic sensitivity and specificity of the IgM assay were 57 and 77 respectively. The negative and positive predictive values of the IgM serological assay were 63 and 72 ; respectively; while the efficiency of the test was 67. Conclusion: The specificity and sensitivity of IgM as a screening tool for early detection of LF appear weak and; hence; the need for a reliable LF ""rapid screening kit"" since RT-PCR is unavailable in most centers. In the interim; ""high clinical index of suspicion;"" irrespective of IgM status; requires urgent referral to confirmatory centers."

Antiviral effect of ribavirin on Junin virus replication in vitro

La ribavirina (1-ß-ribofuranosil-1,2,4-triazole-3-carboxamida; Virazole N. R.) es un nucleósido sintético con un amplio espectro de actividad antiviral demostrada en cultivos celulares, en animales experimentales y en ensayos clínicos. Con el objeto de evaluar el efecto de ribavirina en la replicación del virus Junin in vitro se infectaron células Vero a diferentes multiplicidades de infeccíon con la cepa atenuada XJCL3- y luego de 1 h de adsorción se agregó medio de cultivo conteniendo diferentes concentraciones de la droga (desde 3,12 a 100 microng/ml). Los parámetros medidos fueron los seguientes: 1) Inhibición de la acción citopatogénica a diferentes períodos post-infección. 2) Reducción de la producción viral mediante titulación de unidades formadoras de placas en los sobrenadantes de los cultivos al quinto día post-infección. 3) Inhibición de la formación de placas bajo medio semisólido conteniendo diferentes concentraciones del fármaco. 4) Cantidad relativa de antígeno producida por las células infectadas en presencia del quimioterápico mediante un enzimo-inmunoensayo. Se observó que una concentración de la droga de 3,12 microng/ml inhibe la acción citopatogénica presente al quinto día post-infección en cultivos no tratados mientras que concentraciones de 25 microng/ml reducen a niveles no detectables por los métodos utilizados la producción viral (Figura 1), la formación de placas (Figura 2) y la síntesis de proteínas virales (Figura 3). Estos hallazgos, sumados a la baja toxicidad observada en ensayos clínicos con ribavirina en pacientes con Fiebre de Lassa indicaron la necesidad de realizar pruebas en primates infectados con virus Junin