Potencial de inóculo de fungos micorrízicos arbusculares em solo cultivado com aveia em Umuarama - PR / Infectivity potential of arbuscular my corrhizal fungi in soil cultivated with black oais in Umuarama - PR / Potencial inoculo de hongos micorrizas arbusculares en suelo cultivado con avena en Umuarana - PR

Os fungos micorrízicos arbusculares (FMAs) são importantes para a sobrevivência e desenvolvimento das plantas e podem ser influenciados pelo manejo do solo. O objetivo do estudo foi avaliar os efeitos do cultivo da aveia preta na atividade microbiana do solo por isso da respiração basal do solo (RBS), o teor de matéria orgânica do solo (MOS), a densidade de esporos, colonização radicular e o potencial de inóculo de FMAs em relação à mata ciliar adjacente localizada na Universidade Paranaense – UNIPAR, Campus II – Unidade de Umuarama – PR. O potencial de infectividade do solo por FMAs foi definido a partir do método do número mais provável (NMP). O cultivo de aveia preta diminuiu a RBS em 22% quando comparado com o solo da mata ciliar, provavelmente devido ao maior teor de MOS na mata. A densidade de esporos dos FMAs apresentou diferenças significativas (p < 0,01), variando de 7,74 a 10,53 esporos g–1 em solo na mata ciliar e aveia preta, respectivamente. A colonização radicular por FMAs foi significativamente maior (p < 0,02) na aveia preta (36%) do que na mata ciliar (26%). O potencial de inóculo de FMAs foi maior no solo cultivado com aveia preta (1,09 propágulos g–1 de solo) do que no solo de mata ciliar (0,36 propágulos g–1). O cultivo do solo com aveia preta e baixo pH do solo aumentou a densidade de esporos, colonização radicular e potencial de inoculo de FMAs.

Arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) are important for the survival and development of plants and may be influenced by the soil management. The objective of the study was to evaluate the effects of soil cultivation with black oats on soil microbial activity, basal soil respiration (BSR), soil organic matter (SOM), spore density, root colonization and infectivity potential of AMF in relation to a nearby riparian forest located at Universidade Paranaense, Campus II, Umuarama – PR. The infectivity potential of the soil by AMF was defined by the most probable number method (MPN). Cultivation of black oats decreased BSR by 22% when compared with riparian forest, probably due to high SOM in the riparian forest. Mycorrhizal spore density had significant differences (p < 0.01) between sampled areas, 7.74 to 10.53 spores g–1 of soil cultivated by riparian forest and black oats, respectively. Mycorrhizal root colonization was significantly (p < 0.02) higher in back oats (36%) than in riparian forest (26%). The infectivity potential of the soil by AMF was higher for soil cultivated with black oats (1.09 propagules g–1 of soil) than riparian forest (0.36 propagules g–1 of soil). The soil cultivation with black oats and the low soil pH increased spore density, root colonization and infectivity potential of AMF.

Los hongos micorrizas arbusculares (HMA) son importantes para la supervivencia y desarrollo de las plantas y pueden ser influenciados por el manejo del suelo. El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos del cultivo de avena negra en la actividad microbiana del suelo, por respiración basal del suelo (RBS), el contenido de materia orgánica del suelo (MOS), la densidad de esporas, colonización radicular y potencial de inoculo de HMAs en comparación con la mata ciliar adyacente ubicada en la Universidad Paranaense - UNIPAR, Campus II - Unidad Umuarama - PR. El potencial de inefectividad del suelo por HMA se ha definido a partir del método de número más probable (NMP). El cultivo de avena negra disminuyó la RBS en 22% en comparación con el suelo de la mata ciliar, probablemente debido al mayor contenido de MOS en la mata. La densidad de esporas de los HMAs presentó diferencias significativas (p <0,01), variando de 7,74 a 10,53 esporas g-1 en suelo de la mata ciliar y avena negra. La colonización radicular por HMAs fue significativamente mayor (p <0,02) en la avena negra (36%), en comparación con la mata ciliar (26%). El potencial de inoculo de HMAs fue mayor en el suelo cultivado con avena negra (1,09 propágulos g-1 del suelo), en comparación con 0,36 propágulos g-1 del suelo de la mata ciliar. El suelo cultivado con avena negra es bajo en pH, aumentando la densidad de esporas, colonización radicular y potencial de inoculo de HMAs.

Produção de lacase de fungos basidiomicetos por fermentação submersa com cascas de café / Laccase production from basidiomycetes by submerged fermentation with coffee hurks / Producción de lacase de hongos basidiomicetos por fermentación sumergida con cascaras de café

Cascas de café são fonte de carboidratos e nutrientes que podem ser bioconvertidos em produtos de interesse como enzimas. Lacases são cobre polifenol oxidases que oxidam compostos fenólicos, enquanto reduzem oxigênio molecular à água e; sua baixa especificidade a substratos permite sua aplicação em várias áreas como indústria têxtil, de alimentos e biorremediação. Os objetivos desse trabalho foram avaliar a capacidade de produção de lacase de três linhagens de fungos basidiomicetos (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9 e Pleurotus florida U6/10) por fermentação submersa com cascas de café e avaliar o uso de cobre como indutor dessa enzima. A casca de café mostrou ser um bom substrato para produção de lacases e das três linhagens testadas Pleurotus ostreatus (U6/9) foi a mais produtiva (22,5 U mL-1). A melhor fonte de nitrogênio para produção de lacases de Pleurotus ostreatus (U6/9) foi o extrato de levedura na concentração de 9 g/L (20 U mL-1). A adição de 150 μM de CuSO4 resultou na indução significativa na produção de lacases nessa linhagem (21 U mL-1) no 12° dia de cultivo.

Coffee husks are a source of carbohydrates and nutrients that may be bioconverted into products of interest, such as enzymes. Laccases are copper polyphenol oxidases that oxidize phenolic compounds while reducing molecular oxygen to water. Laccase’s low specificity to substrates allows its application in several areas such as textiles, food processing and bioremediation industries. The aims of this study were to evaluate the potential to produce laccase from three strains of basidiomycetous fungi (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9, and Pleurotus florida U6/10) by submerged fermentation with coffee husks, and to evaluate the use of copper as an inducer of the enzyme. Coffee husk proved to be a good substrate for laccase production, with Pleurotus ostreatus (U6/9) being the most productive strain (22.5 U mL-1). The best source of nitrogen for laccase production of Pleurotus ostreatus (U6/9) was yeast extract 9 g/L (20 U mL-1). The addition of CuSO4 (150 μM) resulted in significant induction of laccase (21 U mL-1) on the 12th day of cultivation.

Cáscaras de café son fuente de carbohidratos y nutrientes que pueden ser bioconvertidos en productos de interés, tales como enzimas. Lacases son cobre polifenol oxidasas que oxidan compuestos fenólicos, mientras reducen el oxígeno molecular a el agua y; su baja especificidad a sustratos permite su aplicación en diversas áreas, como la industria textil, de alimentos y de biorremediación. Los objetivos de este estudio fueron evaluar la capacidad de producción de lacase de tres linajes de hongos basidiomicetos (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9 y Pleurotus florida U6/10) por fermentación sumergida con cáscaras de café, y evaluar el uso del cobre como inductor de esta enzima. La cáscara de café resultó ser un buen sustrato para la producción de lacases y, de las tres linajes probadas, Pleurotus ostreatus (U6/9) fue la más productiva (22,5 U mL-1). La mejor fuente de nitrógeno para la producción de lacases de Pleurotus ostreatus (U6/9) fue el extracto de levadura a una concentración de 9 g L-1 (20 U mL-1). La adición de 150 μM de CuSO4 resultó en la inducción significativa de Cáscaras de café son fuente de carbohidratos y nutrientes que pueden ser bioconvertidos en productos de interés, evadura a una concentración de 9 g L-1 (20 U mL-1). La adición de 150 μM de CuSO4 resultó en la inducción significativa de la producción de lacases en esa linaje (21 U mL-1), en el 12º día de cultivo.

Diversity of foliar endophytic fungi from the medicinal plant Sapindus saponaria L . and their localization by scanning electron microscopy

Endophytic fungi inhabit vegetable tissues or organs, without causing them any harm. Endophytes can co-evolve with plant hosts and possess species-specific interactions. They can protect the plant from insect attacks and diseases, and are also able to produce substances of biotechnological interest. In folk medicine, the bark, roots and fruits of Sapindus saponaria is used to produce substances with anxiolytic, astringent, diuretic and expectorant properties, as well as tonics, blood depuratives and cough medicine. This study evaluated the diversity of endophytic fungi present in the leaves of S. saponaria L. and observed the colonization of host plants by endophytes, using light and scanning electron microscopy. We verified that these fungi are found in intercellular and intracellular spaces. The genera of some isolates of S. saponaria were identified mainly by sequencing of ITS region of rDNA and, when possible, also by their microscopic features, as follows: Cochliobolus, Alternaria, Curvularia, Phomopsis, Diaporthe and Phoma. Phylogenetic analysis showed the existence of genetic variability of the genera Phomopsis and Diaporthe and interspecific variation among the Curvularia, Alternaria and Phoma, belonging to family Pleosporaceae.

Evaluation of foliar fungal endophyte diversity and colonization of medicinal plant Luehea divaricata (Martius et Zuccarini)

Endophyte microorganisms are organisms that live inside plants without causing any apparent damage to their hosts. Since all plants exhibit endophyte microorganisms, it is believed that mutual association is of great importance in nature. Luehea divaricata (Martius & Zuccarini), known popularly in Brazil as agoita-cavalo, is a big-sized tree with a wide distribution in the country that possesses medicinal qualities for: dysentery, leucorrhea, rheumatism, blennorrhoea, tumors, bronchitis, and depuration. This research aims at isolating and molecularly characterizing fungi isolates from L. divaricata by sequence analysis of ITS1-5.8S-ITS2 rDNA. Further, the colonization of endophyte in the host plant by Light and Scanning Electron Microscopy will also be investigated. Whereas, genera Alternaria, Cochliobolus, Diaporthe, Epicoccum, Guignardia, Phoma, and Phomopsis, were identified; rDNA sequence analysis revealed intra-species variability among endophyte isolates of the genus Phomopsis sp. Light and Scanning Electron Microscopy techniques showed the presence of endophyte fungi inside L. divaricata leaves, inhabiting inter- and intra-cellular spaces. These types of extensive colonization and dissemination were reported throughout all the leaf parts in palisade parenchyma, esclerenchyma, spongy parenchyma, adaxial epidermis, and vascular bundle indicating colonization of endophytes in múltiple structural sub-niches in the host plant.

Influence of buffer systems on Trichoderma reesei Rut C-30 morphology and cellulase production

The cellulase enzyme production is a key issue in the enzymatic hydrolysis of lignocellulosic materials. Since fungal morphology influences the productivity of fungal fermentations, it is of major importance to well know the fungal behavior during culture for cellulase production. In this work, the influence of medium supplementation, with different buffer systems at two different concentrations and pH conditions, on the morphology of T. reesei Rut C-30 and cellulase production, was investigated. A medium without buffer was used as control. The results suggest that fungal morphology is significantly dependent on the addition of different buffer systems to the nutrient broth. The mycelial morphology shows a clear transition from clumped to pelleted forms in cultures with variation of buffer systems and concentration. The higher filter paper activity was obtained using 100 mM succinate buffer, at pH 4.8, in the medium supplementation, corresponding to a dispersed mycelial morphology.

Effect of sugars on the association between cowpea vicilin (7S storage proteins) and fungal cells

Vicilins (7S storage proteins) found in various legume seeds have been previously shown to interfere with the germination of spores or conidia of phytopathogenic fungi and inhibit yeast growth and glucose stimulated acidification of the medium by yeast cells. In the present work vicilins from cowpea (Vigna unguiculata) seeds were added to the growth medium of Saccharomyces cerevisiae cells and Fusarium oxysporum conidia. Helix pomatia lectin, wheat germ agglutinin and Ulex europaeus lectin were used to identify differences in the binding of the vicilins to the surface of cells of S. cerevisiae and F. oxysporum treated with this protein. After the growth period, the material in suspension (yeast cells) was centrifuged and the final pellet was also treated with different sugar (glucose, sucrose, glucosamine, N-acetyl-glucosamine) concentrations and 0.1 M HCl for extraction of vicilins associated to chitinous structures present in yeast cells. Our results showed that vicilin sub-units were present in the different sugar extracts of yeast cells pretreated with the vicilins and these proteins were eluted by 0.5 M solutions of sugars in the following order of efficiency of elution: N-acetyl-glucosamine, sucrose/glucose and glucosamine.

Cytotoxicities of metabolites from a monocillium species

The cultural both of a Monocilliuni species upon extraction with ethyl acetate afforded an antimicrobial compound, 5-hydroxymethyl furfural [1]. Both the ethylacetate extract and isolated compound [1] showed strong cytotoxicities in brine shrimp lethality' bioassay. The LC [5] values of ethyl acetate extract and compound 1 were determined graphically and found to be 14.16 mirco g/ml and 27.99 mirco g/ml, respectively

Isolation of new gasteromycetes fungi species in Egypt

Seven species of gasteromycetes were collected from eight different localities inside Gharbia Governorate from September 1995 to September 1996. The species were found to belong to the three genera; Scleroderma, Lycoperdon and Pisolithus

Actin cytoskeleton structure and its localization in gongronella butleri, mucor javanicus and absidia cylindrospora (mucorales-zygomycetes)

Mediante estudios de microscopia òptica de fluorescencia se describe y caracteriza la estructura, distribución y localización de la actina, en tres especies de hongos de la clase zygomycetes: absidia cylindrospora, gongronella butleri y mucor javanicus. La estructura de la actina fué analizada utilizándose el marcador fitc-phalloidina, especifico para actina, en muestras fijadas con formaldehido. En los resultados se observan diferencias en la estructura, distribución y localización de esta proteina en las especies analizadas. Filamentos , aglomerados, placas o aglomerados periféricos y gránulos, fueron las formas más comunes encontradas en los hongos, con prevalencia de los aglomerados observados en todos los citoplasma de las hifas. La tinción de actina en losápices de las hifas, solo se observó en mucor javanicus, esta diferencia en la estructura de la actina podría estar asociada a zonas de expansión de la pared celular de los hongos

The use of calcofluor white for the detection of fungi wich cause subcutaneous and systemic mycoses

Esta técnica facilita la observación microscópica de elementos fúngicos en materiales clínicos, donde su presencia es escasa o no fácilmente detectable por las técnicas tradicionales. Se colocó una gota de la solución de blanco de calcofluor con una gota de KOH al 20 porciento sobre el material estudiado, examinándolo microscópicamente con luz u.v. Los elementos fúngicos presentaron una fluorescencia verde manzana, lo que facilitó su detección en micosis sistémica y subcutáneas. Presenta una sensibilidad similar a la coloración de gomori-grocott, pero tiene la ventaja de ser mucho más simple. Se concluye que esta técnica es mucho más sensible y específica que la observación microscópica directa.

Morphological, cytological, and cultural aspects of Curvularia pallescens

Curvularia pallescens Boedijn (Hyphomycetes) is redescribed with the aid of scanning electron microscope, and the optimal cultural conditions for growing this fungus are discussed. Cytological analysis and nuclear condition, observed through the HCl-GIEMSA techique, showed vegetative and reproductive structures (hypha and conidia) formed by uni, bi, tri, and multinucleated segments. Cultures of C. pallescens in Complete Medium and in Potato Dextrose Agar varied on growth, on aspects of the border of the colonies and also on medium pigmentation. The Complete Medium and the temperature between 25-28degreeC were the most indicated for growth of C. pallescens.

Scanning electron microscopy of vegetative and reproductive structures from beauveria bassiana (bals.) vuill. strain stored in mineral oil

Se estudió por microscopía electrónica de barrido, la morfogénesis de cepas de beauveria bassiana mantenidas en aceite mineral durante 7 años, comparándolas con otras más recientes conservadas en medios organizados. Se observó regularmente el clásico modelo simposial con proliferación de la célula conidiogéna y el desarrollo conidial holoblástico. La conidiogénesis de ambos grupos de cepas presentó pocas diferencias morfológicas, comprobándose que el método de conservación en aceite mineral, no afecta mayormente a esta especie en este lapso de tiempo

Ultraestructura de hongos encontrados en la atmósfera de Santafé de Bogotá / Ultrastructure of molds found in the atmosphere of Santa Fe de Bogotá

Se describen las características morfológicas de esporulación al microscopio electrónico de rastreo (MER) de algunos de los principales hongos encontrados en la atmósfera de Santa Fe de Bogotá. Los hongos se fijaron con vapores de acroleína pura y cristales de OsO subíndice 4 y se secaron en alto vacío, que evita el daño de las estructuras aéreas y arreglos característicos, como lo hemos informado previamente. El análisis al MER reveló la variedad morfológica de los hongos estudiados y permitió observar con detalle las características ultraestructurales de la superficie de los hongos, lo cual es de importancia en la realización del estudio morfológico, estructural y taxonómico; reveló estructuras y características morfológicas y detalles de la conidiogénesis que ayudan a un mejor entendimiento del proceso; algunos de estos detalles estructurales son difíciles de observar al microscopio de luz o al microscopio de contraste de fase

Comparación de algunos métodos de procesamiento para Fonsecaea pedrosoi al microscopio electrónico de rastreo / Comparation of some procedural methods for Fonsecaea pedrosoi by scanning electron microscopy

Se evaluaron cuatro métodos de procesamiento para el estudio estructural de hongos al microscopio electrónico de rastreo (MER). Se utilizaron microcultivos de cepas colombianas de Fonsecaea pedrosoi aisladas de lesiones de pacientes en el Instituto Dermatológico Federico Lleras Acosta, Santafé de Bogotá. Los resultados mostraron alteraciones, distorciones o artificios en los hongos procesados por tres de los métodos utilizados, debido probablemente a los efectos físicos o químicos durante el procesamiento. Se propone el método de fijación con vapores de acroleína pura y cristales de OsO subíndice 4 con deshidratación y secado en alto vacío que evitó la pérdida de estructuras y conservó los arreglos característicos, presentando rapidez, fácil manipulación del especimen y disminución de reactivos. Se destaca la importancia del MER en el estudio morfológico, estructural y taxonómico de los hongos y el uso de los vapores de acroleína para la fijación y el alto vacío para el secado, como alternativas metodológicas para el procesamiento de especímenes biológicos de difícil manipulación o que presentan fácil alteración por su composición higrófila

Ultrastructure of hyphae in gigaspora albida schenck & smith (glomales)

Se efectuaron estudios para determinar la ultraestructura de las hifas en gigaspora albida. Se observó una distribución regular de los organelos citoplasmáticos, con nucleos interespaciados con vacuolas y granos de polifosfato. Las evidencias indicaron que la condición nuclear cambia después de la formación del tubo germinativo. No se encontró ninguna prueba de procesos meióticos o mitóticos, pero se observó la presencia de núcleos alargados, una linea divisoria en la región central de algunos de éstos y organelos asociados al núcleo

Un raro caso de hialohifomicosis en uñas por polypaecilum insolitum G. Smith / A rare case of hyalohyphomycosis in nails by polypaecilum insolitum Smith

Se presenta un caso clínico de un varón de 63 años con una rara infección en las uñas de los pies por Polypaecilum insolitum Smith, agente etiológico fúngico oportunista no descrito con anterioridad en el país y raro en la literatura. La anamnesis del paciente incluye antecedentes antiguos de alcoholismo crónico, cirrosis hepática compensada, neumapatías repetidas y antecedentes de TBC pulmonar. Además presenta lesiones dermíticas crónicas de ambas extremidades inferiores, con úlceras infectadas a repetición de evolución superior a los 30 años. Se aportan datos micro y macromorfológicos para su diagnóstico diferencial

Importancia de la microscopía electrónica en enfermedades infecciosas / Importance of the electron microscopy on infectious diseases

Con el advenimiento del microscopio electrónico casi todas las disciplinas del área biológica se han visto favorecidas. La infectología tal vez constituye uno de los ejemplos más claros del importante apoyo que esta técnica ha tenido en su desarrollo. El conocimiento morfológico a nivel molecular de los microrganismos ha sido trascendente, no sólo en el desarrollo de la infectología misma, sino también por las perspectivas que ha abierto en otros campos; por ejemplo: es indiscutible que en la bioquímica y fisiología dichos conocimientos incidieron de alguna forma en la generación de bases sobre las cuales se apoyó el nacimiento de la biología molecular. De igual manera, estos conocimientos han contribuido al desarrollo de la biología celular, que a su vez ha beneficiado a la patología, y por último, algunos aspectos taxonómicos se han resuelto a medida que se amplían nuestros conocimientos sobre la estructura fina de organismos infectantes. No se exagera al afirmar que miles de ejemplos podrían citarse, ya que al hablar de infectología se implica a la virología, bacteriología, micología y parasitología

Observaciones sobre la histopatología de la viruela del apio / Histopathology of the smallpox of celery

Con el objeto de determinar la vía de penetración y posterior desenvolvimento de Septoria apiicola Speg, en hojas de apio, se desarrolló una técnica histopatológica de aclaramiento y tinción para poder efectuar esas observaciones. El micelio resultante de la germinación de las esporas penetra a través de los estomas y a partir de ellos se desenvuelve un micelio grueso, intercelular que forma picnidios con desarrollo sinfógeno. De ese micelio interno surgen a través de los estomas de 1 a 4 hifas gruesas y largas. Se supone que este es un medio más de diseminación que posee el hongo. Este mismo mecanismo se observó en S. Iycopersici Spet. y S. musiva Pk. por lo que se sospecha sea propio del género Septoria. Estudios adicionales confirmarán o no esta hipótesis