RESUMO
OBJECTIVE@#To establish an cell model of hyperparathyroidism by isolation, in vitro culture, and identification of parathyroid cells from patients with secondary hyperparathyroidism (SHPT).@*METHODS@#The parathyroid gland tissues obtained from 10 patients with SHPT were dissociated by collagenase digestion for primary culture of the parathyroid cells. Morphological changes and growth characteristics of the cells were assessed by microscopic imaging and cell counting. The mRNA and protein expression levels of parathyroid hormone (PTH), calcium-sensing receptor (CaSR), and glial cells missing 2 (GCM2) in the primary and passaged cells were determined by immunofluorescence, qRT-PCR, and Western blotting.@*RESULTS@#Primary cultures of parathyroid cells were successfully obtained. The cells exhibited a high expression of PTH shown by immunofluorescence assay and had a population doubling time of approximately 71.61 h. PTH secretion in the second-passage (P2) cells was significantly lower than that in the primary (P0) and first-passage (P1) cells (P < 0.001). Despite a significant downregulation of CaSR mRNA (P=0.017) and protein (P=0.006) in P1 cells as compared with P0 cells, no significant differences were found in mRNA and protein expressions of PTH or GCM2 between the two cell generations.@*CONCLUSION@#Primary cultures of parathyroid cells isolated from SHPT patients by collagenase digestion show similar biological properties to the cells in vivo.
Assuntos
Humanos , Hiperparatireoidismo Secundário/metabolismo , Glândulas Paratireoides/metabolismo , Hormônio Paratireóideo , RNA Mensageiro/metabolismo , Receptores de Detecção de Cálcio/metabolismoRESUMO
No abstract available.
Assuntos
Idoso , Feminino , Humanos , Biomarcadores/sangue , Biópsia , Cálcio/sangue , Hiperparatireoidismo/sangue , Hiperplasia , Glândulas Paratireoides/metabolismo , Hormônio Paratireóideo/sangue , Neoplasias das Paratireoides/sangue , Paratireoidectomia , Resultado do Tratamento , Regulação para CimaRESUMO
Foram estudadas 84 paratireóides de ratas Wistar com cinco meses de idade, castradas ou não, e mantidas em hipertireoidismo por períodos de 30, 60 e 90 dias. Dois grupos eutireóideos, um castrado e o outro não, foram mantidos nas mesmas condições e serviram de controle. Ao final de cada período, foram colhidos o plasma, para determinação da concentração de T4 livre, o cálcio e o fósforo e as paratireóides, para análise morfológica e determinação da porcentagem de núcleo, citoplasma e estroma. Aos 90 dias houve reversão da hipocalcemia observada aos 60 dias nos animais eutireóideos castrados e não castrados, graças à hipertrofia da paratireóide. O mesmo não ocorreu com os grupos hipertireóideos que apresentaram hipocalcemia e hiperfosfatemia progressivas e não compensadas até os 90 dias. Na castração há pronta reversão da hipocalcemia em resposta ao aumento da atividade funcional da paratireóide. No estado hipertireóideo com gônadas funcionais, apesar da hipertrofia da paratireóide, não há retorno à isocalcemia e isofosfatemia. Na associação hipertireoidismo-castração, a paratireóide não responde satisfatoriamente à hipocalcemia e hiperfosfatemia intensas e progressivas.