RESUMO
Números recentes de casos de Diabetes tipo 2 revelam a urgência parao desenvolvimento de novos fármacos para o tratamento desta patologia.Nosso grupo sintetizou compostos triazólicos glicoconjugados (TGCs) com atividade inibitória 20X maior do que a acarbose (um anti-hiperglicemiante,inibidor de α-glicosidase e alfa-amilase pancreática, em uso clínico) contra MAL12 de levedura (Saccharomyces cerevisiae maltase). Estudos sobre o mecanismo cinético de inibição destes compostos mostraram que todos os inibidores apresentam mecanismo de inibição do tipo mista tanto em maltase de levedura quanto em α-amilase pancreática suína. Baseando-se em dados cinéticos, um mecanismo de inibição estrutural, para ambas enzimas por TGCs, foi considerado como hipótese por nosso grupo. Esstes compostos estariam ligados nos subsítios +2 e +3, adjacentes ao substrato (p-nitrofenil-α-D- glicopiranosideo - pNPG para MAL12 e 2-cloro-4-nitrofenil-α-Dmaltotriosídeo- CNPG3 no caso de AAPs). Dada a ausência de dados experimentais no aspecto estrutural do processo de inibição dos TGCs, nós realizamos uma análise comparativa da topologia sítio ativo das três enzimas pertencentes à família GH13: MAL12, α-amilase pancreático humano (AAPH) eAAPS. De acordo com os resultados de inibição do tipo mista, nós usamos asenzimas livres (E) e o complexo enzima-substrato (ES) como receptores emsimulações de docking dos ligantes TGC, usando o protocolo induced fitdocking (IFD) (Schrõdinger, LLC). Os resultados obtidos corroboram a hipótese levantada pelo nosso grupo, na qual os compostos TGC estariam ligados em subsítios adjacentes ao do substrato. E, também, ressalta-se a inversão das subunidades de alguns ligantes ao estarem ancorados ao sítio ativo de APP eo deslocamento dos ligantes GPESBs para o centro catalítico das enzimas, oque comporta uma característica de mecanismo de inibição do tipo mista...
Recent numbers of cases of Type II diabetes demonstrate the urgency todevelop new drugs for the treatment of this pathology. Our group hassynthesized glycoconjugate triazole compounds (GTCs) with 20X greaterinhibitory activity than acarbose (a hypoglycemiant alpha-glucosidase andpancreatic α-amylase inhibitor in clinical use) against yeast MAL12(Saccharomyces cerevisiae maltase). Studies on the kinetic mechanism ofinhibition of these compounds showed that all inhibitors act non-competitivelyboth on yeast maltase and porcine (Sus scrofa) pancreatic α-amylase (PPA).Based on kinetic data, the structural mechanism of inhibition against bothenzymes by GTCs has been hypothesized by our group where thesecompounds can be bound in the +2 and +3 subsites, adjacent to the substrate(4-nitrophenyl-α-D-maltoglucoside - pNPG for Mal12 and 2-chloro-4-nitrophenyl-α-D-maltotrioside - CNPG3 in the case of PPA). Since there is a lack ofexperimental data on the structural aspects of the inhibition process of theGTCs, we performed a comparative analysis of the active site topology of threeenzymes belonging to GH13 family: MAL12, PPA and human pancreatic α-amylase (HPA). In accordance with the results of non-competitive inhibition, weused both free enzyme (E) and enzyme - substrate (ES) complexes asreceptors in docking simulations of the GTC ligands using the induced-fitdocking (IFD) protocol (Schrõdinger, LLC). The obtained results corroboratewith our hypothesis, which suggests that TGC compounds bind to adjacentsubsites of substrate. In addition, the inversion of subunits of some ligandshighlights when they are anchored to the active site of PPA and thedisplacement of GBESB ligands to the enzyme catalytic center. Thischaracteristic reveals an inhibition mechanism of mixed type...