Purificaçäo, caracterizaçäo parcial e expressäo da sacarose-fosfato sintase durante o amadurecimento da banana / Purification, partial caracterization and expression of sacarose-phosphate synthase during banana ripening

A enzima sacarose-fosfato sintase foi parcialmente purificada de bananas fisiologicamente imaturas (70 dias após antese), fisiologicamente maturas pré-climatéricas (110 dias após a antese) e climatéricas (130 dias após a antese). De acordo com os resultados apresentados a SPS de banana é uma enzima constituída de subunidade de 116kD, apresentando peso molecular nativo de 440 kD por filtraçäo em gel e bandas de 180, 240 e 686 kD por eletroforese em gel de poliacrilamida, nos três estágios estudados. Uma sequência parcial do gene da SPS foi amplificado através de PCR, clonado e seu sequenciamento indicou que a enzima de banana apresenta elevada homologia com as de outras fontes vegetais. A análise dos níveis de proteína e mRNA durante o desenvolvimento e amadurecimentro do fruto permitem correlacionar o aumento de atividade com o aumento na expressäo do gene da SPS. Näo foram observadas alteraçöes significativas no estado de ativaçäo, sugestivas de modificaçäo covalente como mecanismo de ativaçäo durante o amadurecimento

A simplified method for the partial purification and enzyme assay of glucosyltransferase from human dental plaque

Um método simplificado para a purificaçäo parcial e o ensaio enzimático da glicosiltransferase da placa dentária humana é descrito. A enzima obtida possui uma razoável atividade específica para o ensaio da síintese de polissacarídeos solúveis e insolúveis. Este método pode ser de grande utilidade para pessoal näo ambientado com métodos enzimáticos e, também, na avaliaçäo ®in vitro¼ de substâncias antiplaca