Diferentes momentos de aplicação de gonadotrofina coriônica equina em protocolo de inseminação artificial em tempo fixo para vacas de leite / Different times of application of equine chorionic gonadotropin in fixed-time artificial insemination protocols for dairy cows

Avaliaram-se diferentes momentos de aplicação da gonadotrofina coriônica equina (eCG) em protocolos de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) para vacas de leite. Foram utilizadas 76 fêmeas, as quais receberam, no dia zero (D0) do protocolo, dispositivos intravaginais de progesterona, sendo esses retirados no D9, e os animais foram, então, distribuídos aleatoriamente em três tratamentos: T1 - aplicação de eCG no momento da retirada dos dispositivos; T2 e T3 - aplicação de eCG 48h e 24h antes da retirada dos dispositivos, respectivamente. No D10 os animais receberam 1mg de GnRH, e a IATF foi realizada 52 horas após a retirada do implante. Não houve diferença (P>0,05) para intervalo entre a retirada do implante à ovulação (72,56±3,92h), o diâmetro do maior folículo no D9 (10,88±1,49mm), o diâmetro do folículo ovulatório (15,15±1,16mm) e do segundo maior folículo (7,49±0,52mm), a taxa de crescimento folicular (1,38±0,04mm/dia), a taxa de ovulação (96,67%), o intervalo entre diâmetro final e inicial do folículo dominante (73,49±3,84h), a área de corpo lúteo (2,27±0,43cm²), a porcentagem de CL no ovário direito (53,00%) e no esquerdo (26,33%) e a taxa de gestação (33,33%). O momento da aplicação da eCG não influenciou na eficiência do protocolo. Recomenda-se a utilização da eCG no momento da retirada do implante por otimização do manejo.(AU)

Different times of application of equine chorionic gonadotropin (eCG) in Fixed-Time Artificial Insemination (FTAI) protocols for dairy cows were evaluated. A total of 76 females were used, which received intravaginal progesterone devices on day zero (D0) of the protocol, which were withdrawn on D9, and the animals were then randomly distributed in three treatments: T1- application of eCG at the time of device withdrawal; T2 and T3 - application of eCG 48h and 24h before withdrawal of the devices, respectively. On D10 the animals received 1mg of GnRH and the FTAI was carried out 52 hours after the removal of the implant. There was no difference (P>0.05) for interval from implant removal to ovulation (72.56±3.92h), diameter of the largest follicle of D9 (10.88±1.49mm), diameters of ovulatory follicle (15.15±1.16mm) and of the second largest follicle (7.49±0.52mm), follicle growth rate (1.38±0.04mm/day), ovulation rate (96.67%), interval between final diameter and initial diameter of dominant follicle (73.49±3.84h), corpus luteum area (2.27±0.43cm²), percentage of CL in right ovary (53.00%) and in left ovary (26.33%) and pregnancy rate (33.33%). The time of the application of eCG did not influence the efficiency of the protocol. We recommend the use of eCG at the time of the removal of the implant for management optimization.(AU)

Farmacopuntura utilizando os acupontos Hou Hai e Bai Hui em protocolos de sincronização de estro em cabras / Pharmacopuncture using acupoints Hou Hai and Bai Hui in estrous synchronization protocols in goats

Avaliou-se a eficiência da administração de subdoses de eCG nos acupontos Bai Hui e Hou Hai em protocolos de sincronização de estro em cabras. Na primeira etapa, 57 cabras foram distribuídas aleatoriamente em quatro tratamentos: T1- 300UI de eCG intramuscular (IM); T2- 60UI de eCG no acuponto Hou Hai; T3- 60UI de eCG no acuponto Bai Hui e T4- 60UI de eCG IM; e na segunda etapa, 28 cabras foram distribuídas aleatoriamente em três tratamentos: T1- 300UI de eCG IM; T2- 30UI de eCG no acuponto Bai Hui e T3- 30UI de eCG IM. Ao final do tratamento hormonal, as cabras foram monitoradas para detecção do estro, realização das coberturas e avaliação do comportamento reprodutivo. Os dados foram submetidos à análise de normalidade, seguida dos testes estatísticos adequados para cada variável. Na primeira etapa experimental, obteve-se maior duração de estro nas cabras do T1 (P=0,009). Na segunda etapa experimental, obteve-se maior número de animais em estros no T1 (P=0,03). As demais variáveis para ambas as etapas não sofreram influência dos tratamentos (P>0,05), demonstrando que a administração de subdoses de eCG nos acupontos Bai Hui e Hou Hai foi eficiente para sincronizar o estro.(AU)

The efficiency of administration of subdoses of eCG in the Bai Hui and Hou Hai acupoints in oestrus synchronization protocols in goats was evaluated. In the first stage, 57 goats were randomly assigned to four treatments: T1- 300UI of intramuscular eCG (IM); T2- 60UI of eCG in acupoint Hou Hai; T3- 60UI of eCG in the Bai Hui acupoint and T4- 60UI of eCG IM; and in the second stage, 28 goats were randomly assigned to three treatments: T1-300UI of eCG IM; T2-30UI of eCG in the Bai Hui acupoint and T3- 30UI of eCG IM. At the end of the hormonal treatment the goats were monitored for estrus detection, and evaluation of reproductive behavior. The data were submitted to normality analysis, followed by appropriate statistical tests for each variable. In the first experimental stage, a longer duration of estrus in the T1 goats (P= 0.009) was obtained. In the second experimental stage, a greater number of animals were obtained in estrus at T1 (P= 0.03). The other variables for both experiments were not influenced by the treatments (P> 0.05), demonstrating that administration of eCG subdoses in the Bai Hui and Hou Hai acupoints was efficient to synchronize the estrus.(AU)

Efeito do eCG ou benzoato de estradiol associado ao norgestomet na taxa de concepção de vacas de corte submetidas à IATF no pós-parto / Effect of eCG or estradiol benzoate associated with norgestomet on the conception rate of beef cows submitted to FTAI in the postpartum

Este estudo objetivou comparar as taxas de concepção, em vacas de corte no período pós-parto (PPP), tratadas com Gonadotrofina Coriônica Eqüina (eCG) ou Benzoato de Estradiol (BE), após o uso de Norgestomet submetidas à inseminação artificial em tempo fixo(IATF). A hipótese é que a administração de eCG ou BE aumenta as taxas de concepção. Vacas Nelore (n=138) e Brangus (n=63), lactantes,entre 26 e 118 dias do PPP, foram divididas em três grupos homogêneos e dentro de cada grupo subdivididas em dois blocos, um com um PPP < 45 dias (PPP1; n=107) e outro > 45 dias (PPP2;n=94). Todas as fêmeas receberam um implante auricular contendo 3mg de Norgestomet (Crestar®), seguido pela administração de 5mg de Valerato de Estradiol. Os implantes auriculares foram mantidos durante 10 dias. Na retirada dos implantes, as fêmeas receberam 1mL de solução fisiológica (n=68; Grupo Controle) ou 500 UI de eCG (Folligon®; n=67; Grupo eCG) ou 1mg de Benzoato de Estradiol (Index; n=66; Grupo BE) 24 horas após a retirada do implante. AIATF foi realizada 54 horas após a retirada do implante. O diagnóstico de gestação foi realizado por ultra- sonografia 30 dias após a IATF. Houve interação entre os tratamentos e o PPP. No PPP1, a taxa de concepção foi maior no grupo eCG comparado ao BE (47,22% vs.15,38%; P<0,01). No PPP2, as taxas de concepção dos grupos eCG eBE foram maiores que no grupo controle (41,93%, 44,44% vs.22,22%; P<0,01). Conclui-se que vacas, com até 45 dias do PPP, o eCG associado ao Norgestomet aumenta as taxas de concepção.

This study aimed to compare conception rates at the post partum period (PPP) in beef cows which were administered either Equine Chorionic Gonadotrophin (eCG) or Estradiol Benzoate (EB) after Norgestomet and submitted to fixed-time artificial insemination(FTAI). The hypothesis was that the administration of eCG or E Benhances the conception rate. Lactating Nelore cows (n=138) and Brangus (n = 63), between 26 and 118 days of post partum period(PPP) were divided into three homogeneous groups, and subdividedin two blocks, inside each group one of them with a PPP d” 45 days (PPP1; n=107) and another with a PPP > 45 days (PPP2; n=94). Allcows received an auricular implant containing 3mg Norgestomet(Crestar®), followed by the administration of 5mg Estradiol Valerate.The auricular implants were kept during 10 days. Cows received 1mL saline solution (n=68, Control Group) or 500IU eCG (Folligon®;n=67; eCG Group) or 1mg Estradiol Benzoate (Index, n=66; EB Group) 24 hours after the removal of the implant. FTAI was made 54 hours after the implant removal. The pregnancy diagnosis was carried through ultrasonography 30 days after FTAI. There was an interaction between treatments and PPP. In the PPP1, the conception rate was higher in the eCG Group than in the EB Group (47.22% vs.15.38%; Pd”0.01). In the PPP2, the conception rates of the eCG and EB Groups were higher than in the Control Group (41.93%, 44.44%vs. 22.22%: Pd”0.01). It was concluded that in cows up to 45 days of PPP, the eCG associated with Norgestomet enhances the conception rates.

Response related enzymatic changes in ovaries of superovulated mice.

Adult female mice were superovulated with PMSG followed by HCG and 140 blastocysts and 69 morulae were recovered from 24 mice. On the basis of the response, mice were divided into six groups; non responders, 1-5, 6-10, 11-20, 21-30 and >30 embryos. The ovaries of the animals were pooled group wise, homogenized in PBS (pH 7.4) and after centrifugation for 10-15 minutes, the supernatant was analyzed for the enzymes, guanine oxaloacetate transaminase (GOT), guanine pymvate transaminase (GPT), acid phosphatases (ACP) and alkaline phosphatases (AKP). Acid and alkaline phosphatase activities did not show any variation in relation to response to superovulation but GOT and GPT showed significantly increased activity in response to induction of superovulation. A statistically significant positive correlation was found between GOT and GPT activities and the superovulatory response in mice.

Inmunomodulación de factores producidos por las trompas de falopio de rata sobre la proliferación linfocitaria in vitro / Immunomodulation of factors produced by rat Fallopian tubes on the in vitro lymphocytic proliferation

Se plantea que la inducción de tolerancia inmune parece ser un mecanismo que participa en el normal funcionamiento del aparato genital femenino. Se propuso en este trabajo el estudio de la producción de sustancias inmunomoduladoras por las células epiteliales de las trompas de Falopio de rata en cultivo. Se obtuvieron las muestras de ratas y se cultivaron en medio RPMI 1 640 y en medio MEM D-val. Se colectó el medio y se le determinó la capacidad inmunomoduladora sobre la proliferación de linfocitos estimulados con mitógenos. Se comprobó que los cultivos realizados con RPMI 1 640 crecieron más rápido a predominio de células fusiformes, supuestamente fibroblastos, y brindaron una inhibición de la proliferación linfocitaria dosis dependiente y que aquellos cultivos donde se empleó el medio MEM D-val crecieron lentamente, con predominio de células redondeadas, presumiblemente epiteliales, y se inhibió la proliferación linfocitaria dosis dependiente lo cual permite inferir que las sustancias inmunomoduladoras son producidas fundamentalmente por las células epiteliales del lumen de las trompas, pudiendo ser este un mecanismo de tolerancia inmune que facilita el transporte de espermatozoides y del blastocito a través del oviducto(AU)

Obtención de óvulos de Hamster Dorado (Mesocricetus Auratus Weterhouse) libres de zona pelúcida / Ova obtention from golden hamsters (Mesocricetus Auratus Waterhouse) zona-free

El presente estudio describe la técnica utilizada para la obtención de óvulos de Hámster Dorado (mesocricetus Aurratus Waterhouse) libres de zona pelúcida útiles para estudios de Biología Reproductiva. Cinco grupos de Hámster Dorado con 5 hembras cada uno fueron inducidas a superovular al administrar por vía intraperitoneal gonadotropina sérica de yegua preñada a diferentes dosis, el grupo testigo recibió solo 0.25 ml de agua estéril. Las hembras estimuladas produjeron en total 653 óvulos con un promedio de 32.65 y un rango de 16 a 52, en cambio el grupo testigo produjo en total 50 óvulos con un promedio de 10.0 y un rango de 0 a 14. Por parte, la dosis de 25 U.I. degonadotropina sérica de yegua preñada (GSYP) fue la óptima en cuanto a la mayor producción de óvulos maduros, al obtener un promedio de 39.0 (D.E. ñ10.93)(n = 195 óvulos). Así mismo, fueron determinadas las condiciones favorables para la denudación de los óvulos. El cumulus oophorus fue degradado con hialuronidasa al 0.01 por ciento por un tiempo medio de 10'00" (D.E. ñ 03'56") y la zona pelúcida fue disuesta con tripsina al 0.20 por ciento en 03'20" (D.E. ñ 01'19"). Conjuntamente se determinó por tincipon supravital con Eosina Y, que el 100 por ciento de los óvulos maduros (n = 681) no resultaron afectados por los procesos enzimáticos y de manipulación utilizados para su denudación. finalmente los óvulos libres de zona pelúcida fueronfijados con ácido acético al 1 por ciento y teñidos con Azul de metileno al 0.01 por ciento ambos por un tiempo de 1 a 3 minutos.ñ Con ésto se establece que la técnica implementada produce un número de óvulos suficientes para llevar a cabo ensayos biológicos y que los óvulos permanecen viables aún después de su denundación. Estos gametos brindan la posibilidad de substituir a los óvulos humanos cuando se estudian algunos aspectos de la biología reproductiva humana evitando con ello problemas de tipo práctico, ético y moral.

Superovulación con hormona folículo estimulante (FSH) o gonadotropina sérica de yegua preñada (PMSG) y anticuerpos monoclonales contra PMSG en cabras fuera de la época reproductiva / Superovularion with follicle stimulating hormone (FSH) or pregnant mare serum gonadotrophin (PMSG) and monoclonal anti-PMSG in goats during the non-breeding season

Los objetivos de este estudio fueron determinar la respuesta superovulatoria con Gonadotropina Sérica de Yegua Preñada (PMSG) u Hormona Folículo Estimulante (FSH); verificar si copn el uso de anticuerpos monoclonales (ACM) contra la PMSG se mejora la respuesta ovárica de esta hormona y observar el comportamiento reproductivo de las donadoras depués de la superovulación y la colección embrionaria. La super ovulación se realizó fuera de la estación reproductiva. Se usaron 26 cabras de la raza Alpina, a las que se les implantó una esponja intravaginal impregnada con acetato de fluorogestona (45 mg), la cual se retiró a los 15 días Cuarenta y ocho horas antes del retiro de la esponja, los animales se distribuyeron al azar entre los tres tratamientos: 1 (n=8), aplicación de 1100 UI de PMSG. 2 (n=9), similar al anterior más la asministración de ACM contra PMSG y 3 (n=9),aplicación de 14 mg de FSH en ocho fracciones decrecientes. Los embriones se colectaron entre el quinto y sexto día después del estro, mediante cirugía y con sondas de Foley. Posteriormente, los animales recibieron monta natural al detectarse el primer celo poscolección. Las cabras tratadas con FSH tuvieron significativamente mayor porcentaje (P<0.05) de colección embrionaria, mayor número de cuerpos lúteos, de óvulos más embriones colectados, de embriones totales y de embriones transferibles, Los ACM no mejoraron la respuesta superovulatoria a la PMSG. La superovulación y la colección embrionaria con sondas de Foley no tuvieron efecto detrimental sobre la gestación porterior a los tratamientos.

Superovulation and embryo recovery in rabbits (Oryctolagus cuniculus) using different doses of pregnant mare serum gonadotrophin (PMSG).

Present investigation was conducted to study the ovarian response and embryo recovery using different PMSG dose levels. Six rabbits each were assigned randomly to treatment 1 (PMSG 50 IU + hCG 100 IU), treatment 2 (PMSG 75 IU + hCG 100 IU) and the control group (no hormone administered). PMSG injection (im) was followed 68 hr later by natural mating to a fertile rabbit buck and human chorionic gonadotrophin (hCG) injection iv post coitum. Embryos were recovered 96 hr post coitum by a modified surgical method. Mean number of ovulations in the control group differed significantly from treatment 1 and 2, but no significant difference was observed between treatments 1 and 2. Mean embryo recovery percentage was lowest in treatment 2 and highest in the control group. The higher dose PMSG (treatment 2) was observed to be more disturbing in terms of recovery of embryos as well as their morphology.