The nuclear 16-kD protein methylation increases in the early period of liver regeneration in a hepatectomized rat

Methylation events play a critical role in various cellular processes including regulation of gene transcription and proliferation. We observed that methyltransferase activity underwent time-dependent changes in the cytosol of the rat hepatocytes upon partial hepatectomy. However, any change in the methylation of nuclear proteins is not clear during hepatocyte proliferation. The nuclear fraction possesses basal level of methyltransferase to catalyze methylation of several proteins ranging from 7 to 70 kD prior to any hepatecmony. The specific p16 (16 kD) band was transiently and heavily methylated post 1 day hepatectomy, and then became non- detectable, but not in the control liver. Methylation of p16 band was completely inhibited by exogenously added histones, particularly 2AS, 1, 2A and 2B subtypes. The methylated p16 protein remains stable in either acid or alkali- induced demethylation conditions, indicating that methylation is not likely to occur on isoaspartyl or C-terminal cysteinyl residues. Exogenous addition of non-hydrolyzable GTP caused a dose- dependent suppression of a p16 methylation suggesting that G-proteins might play a role as an endogenous methylation inhibitor in vivo. Taken together, we have identified the proliferation event associated-methylation of the nuclear p16 protein in the hepatocytes undergoing liver regeneration.

Hormonas tímicas como mediadoras de la integración inmunogonadotropa / Thymic hormones as mediators of the inmunogonadotroph integration

Existe significativa evidencia sobre la existencia de un eje timo-hipofiso-gonadal. En razón de que estudios previos de los autores habían demostrado que la Hormona Homeostática Tímica, un dímero de histonas H2A y H2B, posee múltiples efectos in vivo sobre la secreción de hormonas hipofisarias, resultó de interés evaluar el efecto in vitro de distintas preparaciones tímicas y proteínas nucleares relacionadas, sobre la liberación de prolactina (Prl), hormona foliculoestimulante (FSH) y hormona luteinizante (LH). Células hipofisarias frescas de ratas hembras se dispersaron con colagenasa y se empaquetaron en una columna de Biogel P-2 mantenida a 37oC. Las células se perifundieron continuamente con medios EBSS, o,5 por ciento de BSA, 1 por ciento de ácido ascórbico y 50 IU de aprotinina/ml (medio de perifusión, MP). Las sustancias a ser testeadas (estímulos) se disolvieron en MP, perifundiéndose en un volumen de 1,5 ml por estímulo a través del circuito de perifusión, al final del cual se recogieron fracciones de 1 ml. Las hormonas liberadas se dosaron por radioinmunoensayo. La viabilidad de las células dispersas osciló entre 84 y 96 porciento. Distintas diluciones de extractos de eminencia media de rata generaron, para cada hormona, una respuesta estimulatoria dosis-dependiente. En general, tanto las preparaciones de histona H2A como las de nucleohistona (ambas a una concentración de 500 µg/ml) indujeron picos secretorios significativos de LH, FSH y Prl, siendo los más elevados los correspondientes a Prl. Asimismo, la hormona tímica timulina y sobrenadantes provenientes de cultivo de células epiteliales tímicas de rata y ratón, pero no la timosina fracción ÷ o el péptido tímico MB-35, resultaron estimulatorios. Los resultados del presente trabajo sugieren que ciertos productos tímicos podrían participar en la integración inmuno-gonadotropa, actuando como señales hipofisotropas