O papel de imunoglobulinas na nefropatia da leptospirose em suínos / The role of immunoglobulins in nephropathy of leptospirosis in pigs

A leptospirose é uma antropozoonose endêmica em todo o mundo, que afeta o homem e várias espécies de animais domésticos e silvestres. No início da infecção há produção de IgM para o controle da infecção e após alguns dias, IgG são produzidas e provocam lise das leptospiras circulantes. Objetivou-se neste estudo identificar depósitos de antígeno de leptospiras e imunoglobulinas no tecido renal, para avaliar o papel de imunoglobulinas na patogênese da nefropatia da leptospirose em suínos. Foram colhidas 139 amostras de sangue e rim de suínos das cidades de Teresina/PI e Timon/MA, que foram avaliadas pela SAM, imunoistoquímica e PCR. Nefrite intersticial, fibrose, vasculite, tumefação do tufo glomerular e hipercelularidade difusa foram as principais alterações histopatológicas encontradas. A imunoistoquímica detectou antígeno de leptospira em 60 suínos. Depósitos de IgG, IgM e IgA foram observados no endotélio de capilares glomerulares, dos capilares intertubulares e na cápsula de Bowman, com marcação focal, difusa, global e segmentar. A deposição de IgM e IgA foi significantemente maior nos suínos infectados. Estranhamente depósitos de IgG foi significantemente maior nos suínos não infectados, onde não havia presença de antígeno de leptospiras e nem lesão túbulo-intersticial. Concluímos que antígeno de leptospiras no rim de suínos está relacionado a depósitos de IgM e IgA mas não a depósitos de IgG.

Leptospirosis is an endemic worldwide anthropozoonosis, affecting humans and several species of domestic and wild animals. At the beginning of infection is the production of IgM to control the infection and after a few days, IgG is produced and cause lysis of circulating leptospires. The objective of this study was to identify deposits of immunoglobulins and antigens of leptospires in kidney tissue, to assess the role of immunoglobulins in the pathogenesis of leptospirosis nephropathy in pigs. We collected 139 blood samples and kidney of pigs from the cities of Timon/MA and Teresina/PI, to be evaluated by SAM, immunohistochemistry and PCR. Interstitial nephritis, fibrosis, vasculitis; swollen glomeruli hypercellularity and diffuse in a pig were main pathological changes found. Immunohistochemistry leptospira antigen detected in 60 pigs. Deposits of IgG, IgM and IgA were observed in the endothelium of glomerular capillaries, the capillaries intertubulares and the Bowman's capsule, marked focal, diffuse, global and segmental. The deposition of IgM and IgA was significantly higher in infected pigs, strangely deposits of IgG was significantly higher in non-infected pigs, where there was no presence of antigen leptospires nor tubulointerstitial injury. We conclude that Leptospira antigen in porcine kidney relates to deposits of IgM and IgA but not IgG deposits.

Detection of hepatitis A antibodies by ELISA using saliva as clinical samples

The possibility of detecting acute infection and immunity using body fluids that are easier to collect than blood, mainly in children, would facilitate the investigation and follow-up of outbreaks of hepatitis A (HAV). Our study was carried out to evaluate the detection of anti-HAV IgM, IgA and total antibodies in saliva using serum samples as reference. Forty three paired serum and saliva samples were analyzed. From this total, 24 samples were obtained from children and 1 from one adult during the course of acute hepatitis A; an additional 18 samples were obtained from health professionals from Adolfo Lutz Institute. The sensitivity to detect anti-HAV IgM was 100 per cent (95 per cent CI: 79.1 to 100.0 per cent), employing saliva as clinical samples. In detecting anti-HAV IgA, the sensitivity was 80.8 per cent (95 per cent CI: 60.0 to 92.7 per cent) and for the total antibodies was 82.1 per cent (95 per cent CI: 62.4 to 93.2 per cent). The specificity was 100 per cent for each. The rate of agreement was high comparing the results of serum and saliva samples for detecting HAV antibodies. We conclude that saliva is an acceptable alternative specimen for diagnosing acute hepatitis A infection, and for screening individuals to receive hepatitis A vaccine or immunoglobulin.

Estandarización de ELISA IgM e IgA para el inmunodiagnóstico de la triquinosis humana / Standarization of ELISA IgM and IgA for inmunodiagnosis of human trichinosis

An ELISA test for trichinosis using as antigen a larvae soluble fraction from trichinella spiralis was carried out for the detection of IgM and IgA specific antibodies in 45 serum samples from patients confirmed or suspected to have trichinosis by strong clinical and epidemiological evidences. All the patients had positive serology detected by precipitin test, bentonite floculation test, indirect hemagglutination tes and ELISA IgG test. The cut off value was determined using two criteria. Criterion A was determined in each plate, using three positive controls and two negative ones; the average of the negative controls and the weakest positive control, muliplied by a 1,2 factor was, considered the cut off value. Criterion B was determinated using the average plus three standard deviations from 64 apparently halthy persons serum samples. In both cases, three serum dilutions (1:10, 1:100 and 1:500) were used. The sensitivity of ELISA IgM was 100,0, 93,3 and 82,2 percent using serum dilution of 1:10, 1:100 and 1:500 respectively (criterion A) and 100,0, 97,8 and 95,6 percent for the same dilutions (criterion B), whereas the values for ELISA IgA were: 100,0 91,1 and 86,7 percent (criterion A) and 100,0 100,0 and 91,1 percent (criterion B). In order to find out the specificity of ELISA IgM and ELISA IgA, additional 118 serum samples from individuals with other parasitoses, such as cysticercoss (18) hydatidosis (39), fascioliasis (12), toxocariasis (30), Chagaïs disease (12) and individuals with non specif eosinophilia (7), were also tested. ELISA IgM presentes a specificity of 92,3, 93,4 and 97,3 percent (criterion A) and 96,2, 97,8 and 97,8 percent (criterion B) whereas the results for ELISA IgA were 97,8, 98,9 and 99,4 percent (criterion A) and 98,4 percent for the 1:10 and 1:100 dilutions and 100,0 percent for the 1:500 dilution (criterion B). The positive predictive values of ELISA IgM were 76,3, 77,8 and 88,1 percent (criterion A) and 86,5, 91,7 and 91,5 percent (criterion B) whereas the negative ones were 100,0, 98,3 and 95,7 percent (criterion A) and 100,0, 99,4 and 98,9 percent (criterion B). The positive predictive values of ELISA IgA were 91,8, 95,3 and 97,5 percent (criterion A) and 93,8, 93,8 and 100,0 percent (criterion B) whereas the negatives ones were: 100,0, 97,9 and 96,8 percent (criterion A) and 100,0, 100,0 and 97,8 percent (criterion B). The use of ELISA IgM and ELISA IgA in the inmunodiagnosis of trichinosis is discussed

Enfermedadf por igA lineal / Lineal igA disease

Presentamos dos pacientes con enfermedad por ig A lineal, de 2 y 3 años de edad respectivamente, ambos del sexo masculino, se llegó al diagnóstico por la clínica dermatológica, la histología y la inmunofluorescencia directa, donde se detectó ig A lineal en la zona de la membrana basal. Fueron tratados con diamino difenil sulfona (DAPS), con una rápida y efectiva respuesta y con antihistamínicos (difenhidramina) para mejorar el prurito. Los controles se realizaron periódicamente desde el comienzo de la afección hasta la actualidad. Consideramos que la enfermedad por igA lineal no es una dermatosis muy frecuente en la infancia, pero se debe tener presente. Loas diagnósticos diferenciales obligados so: la dermatitis herpetiforme y el penfigoide ampollar, sin dejar de tener en cuenta otras afecciones ampollares no geneticas como el impétigo ampollar, la epidermólisis ampollar adquirida de la infancia y el eritema poliformo ampollar

Estudio clínico y anatomopatológico en cinco casos de vasculitis portadores de anticuerpos anticitoplasmáticos de neutrófilos con patrón citoplasmático / Clinical and anatomopathological study in 5 cases of vasculitis carrying neutrophil anticytoplasmatic antibodies with cytoplasmatic pattern

We report five patients with vasculitis and antineutrophil cytoplasmic antibodies with cytoplasmic pattern. All had severe upper and lower respiratory tract necrotizing lesions. Three had kidney failure due to rapidly progressive glomerulonephritis. The pathological study showed a crescentic glomerulonephritis, a chronic granulomatous inflammation in the lungs and in the nasal mucosa, an acute nonspecific inflammation or a chronic granulomatous inflammation and focal blood vessel fibrinoid necrosis. All patients with simultaneous involvement of lungs and kidneys had high titers of antineutrophil cytoplasmic antibodies. The nomenclature and classification of these diseases is discussed

Quantificaçåo de plasmócitos produtores de IgA, IgM e IgG em mucosa de intestito delgado de crianças- padronizaçåo do método / Density of IgA, IgM and IgG-producing cells of small bowell mucosa of children

A densidade numérica de plasmócitos produtores de IgA, IgM e IgG, na mucosa do intestino delgado, foi obtido através do estudo das biópsias realizadas em 6 crianças com idade de 15 meses a 7 anos. Duas delas, com imunoglobulina A sérica abaixo dos valores normais para a idade e sem história de diarréia. As outras 4, com diarréia crônica e dosagem de IgA sérica normal. Os fragmentos obtidos por biópsia com a cápsula de Crosby, tamanho pediátrico, foram fixados em formol a 5 por cento, ph 7,0 e lavados em sacarose a 30 por cento e, a seguir, congelados em hexano-nitrogênio líquido. Cuidados especiais foram tomados durante a orientaçåo e inclusåo do material para se conseguirem cortes perfeitamente perpendiculares à muscular da mucosa. Os cortes foram obtidos em criostato e processados para a demonstraçåo de plasmócitos produtores de IgA, IgM e IgG, pela técnica de imunoflorescência direta (Nairn, 1969; Fry & Wilkinson, 1963). A determinaçåo do número de cada categoria de plasmócitos foi conseguida através da aplicaçåo da fórmula morfométrica: N= 2n. Vp/A (id + 2t) do método II de Aherne (1967) para contagem de células. Para cada tipo de célula contendo imunoglobulina A, M e G foram efetuadas contagens, segundo dois procedimentos. No primeiro, as contagens individuais de IgA, IgM e IgG de cada caso foram efetuadas, em 200 campos, procedendo-se do seguinte modo: contava-se o número de células em campos microscópicos sucessivos, que eram obtidos pela varredura dos cortes da base para o topo (isto é da regiåo da muscular da mucosa até o topo do vilo). A faixa lateral seguinte do corte, a ser varrida, era medida a alguma distância da primeira, partindo a varredura do topo para a base. Neste procedimento nåo se anotava a procedência do campo, se da regiåo superior, média ou inferior da mucosa. Para cada caso, os resultados das contagens individuais de plasmócitos IgA, IgM e IgG apresentaram desvio padråo de elevado valor. Assim, para medidas feitas com 200 campos para células produtoras de IgA, o desvio padråo variava em cada um dos seis casos de dois terços do valor da média até um valor próximo da mesma. Através de testes estatísticos adequados, evidenciou-se que valores confiáveis do número de células por mm3 de lâmina própria de mucosa seriam obtidos somente com contagens de 100 a 200 campos microscópicos. No segundo procedimento de amostragem, planejado após a análise dos dados anteriormente obtidos, os cortes de mucosa foram arbitrariamente divididos em 3 segmentos: superior, médio e inferior. O segmento superior ia do topo de vilosidade até a extremidade inferior da regiåo que representava os dois terços superiores do vilo, estendendo-se o médio do limite superior assinalado até a raiz das glândulas intestinais de Lieberkühn e o inferior, do limite inferior acima até a muscular da mucosa. Verificou-se em todos os casos que a concentraçåo de células produtoras de IgA por mm3 de lâmina própria era menor na regiåo superior que na regiåo média, ocorrendo a maior concentraçåo de plasmócitos na regiåo inferior. Para células IgM e IgG, as maiores concentraçoes ocorriam em segmentos médios e inferior, havendo menor concentraçåo celular também ao nível do topo de vilosidade. O desvio padråo das contagens feitas neste segundo procedimento representava aproximadamente 1/5 1 1/13 avos do valor da média. Através de testes adequados, mostrou-se que resultados consistentes do número de plasmócitos produtores de IgA, IgM e IGG podiam ser obtidos em cada caso com contagens apenas de 10 campos da regiåo superior, 10 campos da regiåo média e 10 campos da regiåo inferior. Deve-se destacar que, apesar de se ter detectado, uma variaçåo segmentar da base para o topo, na concentraçåo numérica dos diferentes tipos de plasmócitos em crianças com deficiência parcial de IgA e naquelas com diarréia sem esta deficiência, tal fato nåo deve ser interpretado como indicativo de que este padråo de estratificaçåo tenha necessariamente ocorrência geral.