Influenza virus and proteolytic bacteria co-infection in respiratory tract from individuals presenting respiratory manifestations / Vírus influenza e bactéria proteolítica co-infectantes em trato respiratório de indivíduos com manifestações respiratórias

A role for proteolytic bacteria in the exacerbation of influenza virus has been shown in natural hosts such as pigs and humans. Four hundred seven samples were collected from the respiratory tract of individuals presenting clinical manifestations, during influenza season (2003-2005) in São Paulo City. The aim of this study was to evaluate the incidence of determined bacteria co-infecting virus in human respiratory tract. Tests, such as bacteriological, immunofluorescence (IF), RT/PCR and hemagglutination (HA) were used for bacterial and viral investigation. Thirty seven (9.09 percent) positive for influenza virus were screened by IF. The RT/PCR confirmed the presence of influenza virus in these samples. Bacterial and agar casein tests demonstrated that 18 (48.64 percent) individuals were infected with proteolytic bacteria such as Staphylococcus spp., Streptococcus spp. and Pseudomonas spp. Among these samples, 13 (35.13 percent) were co-infected with influenza A virus. Influenza type B, co-infecting bacteria were found in five (13.51 percent) samples. In vitro the S. aureus protease increased the influenza HA titer after contact for 30 min at 25 ºC. Results revealed the occurrence of co-infection with proteolytic bacteria and influenza in the evaluated individuals. This finding corroborates that virus versus bacteria synergism could be able to potentiate respiratory infection, increasing damage to hosts.

O papel da bactéria proteolítica na exacerbação do vírus influenza tem sido demonstrado em hospedeiros naturais como porcos e humanos. Foram coletadas 407 amostras do trato respiratório de indivíduos apresentando manifestações clínicas, durante a estação da influenza (2003-2005) na cidade de São Paulo. Este trabalho teve como objetivo avaliar a incidência de determinadas bactérias que junto com vírus co-infectarem o trato respiratório humano. Testes bacteriológicos, e virológicos como imunofluorescência (IF), RT/PCR e hemaglutinação (HA) foram usados nas investigações viral e bacteriana. Pelo teste de IF foram selecionadas trinta e sete (9,09 por cento) amostras positivas para o vírus influenza. A presença do vírus influenza foi confirmada pela técnica de RT/PCR. Pelos testes bacteriológicos e do agar caseina, verificou-se que 18 (48,64 por cento) dos indivíduos foram infectados com bactérias proteolíticas tais como Staphylococcus spp., Streptococcus spp. e Pseudomonas spp. Destas amostras, 13 (35,13 por cento) foram co-infectadas com vírus influenza tipo A, e 5 (13,51 por cento) com influenza tipo B. No experimento in vitro com influenza e S. aureus, detectou-se aumento do título hemaglutinante deste vírus, após contacto de 30 min a 25 ºC. Os resultados obtidos revelaram a ocorrência de co-infecção com bactéria proteolítica e vírus influenza nos indivíduos avaliados. Estes achados corroboram com a investigação do sinergismo, entre bactéria e vírus, que poderia ser capaz de potencializar infecção respiratória, aumentando os riscos aos hospedeiros.

Co-infection between influenza virus and flagellated bacteria

Tripsina é necessária na ativação da clivagem do vírus influenza A in vitro. Esta clivagem é importante para entrada do vírus na célula por endocitose mediada pelo receptor celular. Bactérias presentes no trato respiratório são fontes de proteases que podem contribuir na replicação do vírus influenza in vivo. Entre 47 amostras coletadas de cavalos, suínos e humanos, a influenza foi isolada e confirmada em 13 que estavam co-infectadas com bactéria flagelada: Stenotrophomonas maltophilia desde o início destes experimentos. Apesar do tratamento das amostras com antibióticos, as bactérias resistiram em diversas delas (48.39%). A protease (elastase), secretada pela Stenotrophomonas maltophilia, desenvolveu papel decisivo na potencialização da infecção pelo vírus influenza. Essa atividade proteolítica foi detectada pelo teste de ágar-caseína. Amostras positivas para o vírus influenza isolado em animais, bem como em humanos tiveram potencialização da infectividade (ECP) em células MDCK e NCI-H292, sempre que a Stenotrophomonas maltophilia esteve presente. Os referidos microorganismos, bactéria e vírus foram observados ultra-estruturalmente. Esses achados in vitro demonstram como complicações respiratórias podem ocorrer in vivo, através da contribuição de protease microbiana, provocando aumento da inflamação ou destruição dos inibidores celulares de proteases endógenas, nos hospedeiros susceptíveis à influenza.

Myxo and paramyxovirus surface structures: antigenic and functional studies

Amostras de vírus da Doença de Newcastle (cepas SO-93, B1 e La Sota) e da Influenza (cepa A/PR/8/34 (H1N1) foram analisadas especificamente quanto à presença de carboidratos específicos, de comprovada importância no processamento das atividades biológicas virais. As amostras virais foram concentradas por sedimentaçäo, avaliadas quanto ao seu teor proteico e título hemaglutinante e, entäo, estudadas quanto aos seus resíduos carboidratos. O estudo realizado com uso de lectinas e açúcar específico (inibidor de Concanavalina A) revelou a importância e especificidade do caráter carboidratado de estruturas peptídicas de superfície viral, o que pode ser observado através da inibiçäo do aparecimento das linhas de precipitaçäo entre Concanavalina A e soro específico para vírus da Doença de Newcastle

Comparison of Overt and Inapparent Influenzal Infection in Ferret

In relation rto the size of viral inoculum, influenzal infection in ferrets caused by the inoculation of a mouse-adapted subline of PR 8 strain of type A influenza virus was studied. The results are summarized as follows; 1) When ferrets were inoculated with a highly diluted virus (10-7), a small proportion of them experienced inapparent infections and the rest of them escaped the infection. 2) With the increased size of viral inocula, there was a good correlation between the size of infecting does and the frequency of overt infections in ferrets. 3) Nasal tissues were the main locus of viral multiplication in ferrets at 72 hours after viral inoculation. Viral multiplication in nasal tissues was demonstrated only in a small proportion of ferrets which were inocu1ated with a 10-7 dilution of virus; however, when the size of vira1 inoculum was increased above this level, all ferrets had viral growth in their nasal tissues. 4) The involvement of pulmonary tissues, viral growth in those tissues and the development of gross lung lesions were significantly rare. There was no dear-cut relationship between the size of infecting doses and the frequency of such plumonary involvements in ferrets.