Avaliação do efeito de Novaluron, um inibidor da síntese de quitina sobre a formação de larvas de Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) / Evaluation of the effect of Novaluron, an inhibitor of chitin synthesis on the formation of larvae of Aedes aegypti (Linnaeus, 1762)

Várias populações de Aedes aegypti, vetor da dengue e da febre amarela urbana, apresentaram resistência aos inseticidas clássicos utilizados em seu controle. Sendo assim, torna-se imperativo o estabelecimento de estratégias alternativas. Nesse sentido, a biossíntese de quitina é um alvo potencial. Em artrópodes, a quitina é considerada o principal constituinte da cutícula (ou exoesqueleto). A quitina Sintase (do inglês Chitin Synthase, CHS) é uma enzima-chave na biossíntese desta molécula, e os compostos benzoil-fenil-uréias (BPUs) possuem atividade inibidora da síntese de quitina, interferindo na formação da cutícula em diversas espécies de insetos. Novaluron é um BPU recentemente recomendado pela WHO para uso em água potável, o que o qualifica como uma alternativa viável para o controle de larvas do vetor da dengue. Neste trabalho investigamos, durante o desenvolvimento larvar de Ae. aegypti, a influência de novaluron sobre: 1) o conteúdo de quitina; 2) a expressão do gene AaCHS1, evidenciada por seus transcritos alternativos AaCHS1a e AaCHS1b e, 3) a estrutura do exoesqueleto e da membrana peritrófica. Para tanto, inicialmente foi necessário observar os momentos das ecdises larvais. Os pontos definidos para a coleta das amostras levaram em conta o processo de síntese de cutícula a cada instar larvar. Foram escolhidos pontos tentativamente representativos do início (i), meio (int) e fim (f) do terceiro (L3) e do quarto (L4) instares. Os pontos de L3i, L3int, L3f, L4i, L4int e L4f foram definidos como 53, 59,5, 68, 75, 92,5 e 98 horas após a eclosão (HAE), respectivamente. Novaluron foi então administrado continuamente a larvas L3, a partir de 51 HAE, em concentrações definidas em relação ao seu percentual de inibição de emergência do adulto (IE): IE20, IE50 e IE99. Foi observado um aumento significativo no conteúdo de quitina de larvas controle, desde L3i até L4f. Novaluron afetou significativamente a produção de quitina de forma dose-dependente, ao longo do desenvolvimento larvar. A abundância relativa de mRNA dos transcritos AaCHS1a e AaCHS1b foi avaliada por PRC quantitativo em tempo real, de L3i e L4f, em larvas controle e tratadas com dose de IE99. O perfil de expressão dos transcritos AaCHS1a e AaCHS1b é similar em larvas controle, ainda que a variação temporal de AaCHS1b seja maior. O BPU parece ter um efeito mais proeminente sobre o perfil de expressão de AaCHS1b, que se acentua nas primeiras horas após tratamento. Com base nos resultados obtidos, duas hipóteses são discutidas: mecanismo de feedback positivo ou atraso fisiológico do desenvolvimento. Ensaios histológicos preliminares validaram a metodologia utilizada para preparo e observação da morfologia de larvas tratadas e controle. Cortes longitudinais evidenciaram a preservação de estruturas internas, inclusive as quitinosas, o que abre a perspectiva de ensaios futuros de marcação específica para quitina.

Efeito do Novaluron - um inibidor da síntese de quitina - sobre Aedes aegypti em laboratório e simulado de campo / Effect of the Novaluron - an inhibitor of the chitin synthesis - on Aedes aegypti in simulated laboratory and of field

A dengue é um grande problema de saúde pública. Esta arbovirose é transmitida por mosquitos do gênero Aedes, sendo o principal vetor o Aedes aegypti. Ainda hoje o alvo principal das campanhas de controle dessa doença é o vetor e, dentre as possibilidades, o controle químico é ainda mais comum. Atualmente para o controle de aedes aegypti no Brasil são utilizados principalmente os larvicidas temephos e Bti e o adulticida deltametrina. Detectamos por meio de ensaios tipo dose-resposta, resistência a temephos nas quatro populações avaliadas - Cuiabá, MT, Uberaba, MG, Aracajú, SE e Henrique Jorge/Fortaleza, CE. Henrique Jorge foi notadamente a população com maior alteração na resposta a temephos. Por outro lado, somente Cuiabá se mostrou sensível a deltametrina, enquanto as outras populações apresentaram resistência incipiente. Com o aumento da resistência aos inseticidas químicos usados, novas alternativas de controle, se fazem necessárias. Dentre estas se encontram os inibidores de síntase de quitina (CSI). O novaluron é um inibidor da síntese de quitina e foi recentemente recomendado pela OMS para uso em água potável, o que o qualifica como uma alternativa viável ao controle de larvas do vetor de dengue. Em condições de laboratório novaluron apresentou grande eficácia sobre larvas de Aedes aegypti da cepa Rockefeller: total inibição da emergência de adultos viáveis desta cepa foi obtida com a concentração 0,4(miu)g/L. Novaluron também se mostrou eficaz sobre as populações do campo testadas e nenhuma delas apresentou resistência a este CSI, independente de seu status de resistência aos inseticidas químicos avaliados. Em simulado de campo, foram avaliadas a cepa Rockefeller e as populações Aracajú e Henrique Jorge. Com a concentração 20(miu)g/L, o produto mostrou boa persistência em área externa e interna sobre larvas de Aedes aegypti. Em área externa, no período de março a maio, mortalidade acima de 70por cento foi obtida até a sexta semana, enquanto...químicos.

L-ascorbic acid ameliorates postnatal endosulfan induced testicular damage in rats.

The aim of the present study is to investigate the effect of L-ascorbic acid on postnatal exposure of endosulfan induced testis damage in the rat. Four groups of seven day old male Wistar rats were treated with 3, 6, 9 and 12 mg/kg endosulfan orally (10 pups/group), from postnatal day 7 to 60 at intervals of 24 h. For 2 more groups (n = 10/group), endosulfan (9 mg/kg and 12 mg/kg) was administered along with L-ascorbic acid (20 mg/kg). The sperm morphology, sperm count and sperm motility was analyzed in all the groups on postnatal day 70. Endosulfan significantly affected the testicular function enhancing the incidence of abnormal spermatozoa, decreasing the sperm count and sperm motility in a dose dependent manner. Abnormalities were of both head and tail and increase in their frequency was more than two-fold of the control value. Sperm count abruptly decreased in 12 mg/kg group and sperm motility decreased up to 50% of the control value. L-ascorbic acid has nullified the toxic effects of the pesticide significantly, but not to the control level. Endosulfan induces the testicular damage following postnatal exposure and L-ascorbic acid prevents the adverse effects considerably in the rat.

Efficacy of dietary protein in alleviating toxicity of monocrotophos in rats.

Monocrotophos administration at intervals induced variable responses in phosphatases, transaminases and aldolase of liver and plasma. Hepato-toxicity was aggravated under protein deficient state. A weak resistance to toxicity was observed in rats on low protein diet (5%). However, animals fed on protein enriched diet (20%) indicated an elevation in tissue defense mechanism and were able to combat toxic stress of monocrotophos, though partially. A higher protein level may prove efficient and significant for alleviating pesticide toxicity.

Efecto de la resistencia a los insecticidas sobre algunos parámetros demográficos de 3 cepas de Culex quinquefasciatus (Diptera:Culicidae), en condiciones de laboratorio

Se estudiaron las tablas de vida en condiciones de laboratorio de 3 cepas de Culex quinquefasciatus: Slab, susceptible de referencia; Habana Vieja, presionada con cipermetrina hasta su cuarta generación; y Cotorro, procedente del terreno. Se encontró que los diferentes niveles de resistencia a insecticidas organofosforados y piretroides presentes en las cepas Cotorro y Habana Vieja no influyeron en la duración del período de desarrollo de los estadios inmaduros ni en la proporción sexual de los adultos emergidos, y ejercieron un efecto favorable y directamente proporcional sobre la supervivencia y longevidad de los adultos. Sin embargo, influyó de manera negativa e inversamente proporcional sobre la reproducción y el crecimiento poblacional de estas cepas. Se proporcionan datos de utilidad para el uso y manejo de insecticidas dentro de las estrategias de control de Culex quinquefasciatus, importante vector de la filariasis linfática.

The life tables of 3 strains of Culex quinquefasciatus were studied under laboratory conditions: Slab, susceptible to reference; Old Havana, treated with cypermethrin until its fourth generation; and Cotorro, from the field. It was found that the different levels of resistance to organophosphate insecticides and pyrethroids present in the Cotorro and Old Havana strains did not influence either on the duration of the period of development of the inmature stages or in the sexual proportion of the emerged adults, but they had a favorable and directly porportional effect on the survival and longevity of the adults. However, they exerted a negative and inversely proportional influence on the reproduction and population growth of these strains. Useful data for the use and management of insecticides within the strategics of control of Culex quinquefasciatus, an important vector of lymphatic filariasis, are provided.

Selección de una cepa de Culex quinquefasciatus resistente a lambdacialotrina y su espectro de resistencia cruzada a otros insecticidas

Se seleccionó una cepa de campo de Culex quinquefasciatus resistente al insecticida piretroide lambdacialotrina, con el objetivo de poder utilizarla como cepa de referencia en el laboratorio, en los estudios de bioquímica y genética de la resistencia; evaluar la utilidad de este insectivida para el control de mosquitos en Cuba y determinar la resistencia cruzada a insectividas organofosforados, piretroides y un carbamato. Se obtuvo una alta resistencia a lambdacialotrina después de 6 generaciones de presión de selección. Se observó baja o ninguna resistencia cruzada a otros piretroides (deltametrina y cipermetrina), a un carbamato (propoxur) y a los insecticidas organofosforados (clorpirifos y metil-pirimifos); sin embargo, se observó una alta resistencia cruzada a malatión (organofosforado).

A field strain of Culex quinquefasciatus resistant to pyrethroid lambda-cyhalothrin insecticide was selected to be used as a reference strain in the laboratory for conducting studies of biochemistry and genetics of resistance, to evaluate the utility of this insecticide for the control of mosquitoes in Cuba, and to determine the cross resistance to organophosphate insecticides, pyrethroids and a carbamate. A hig resistance to lambdacyhalothrin was obtained after 6 generations of selective pressure. Lowe or no cross resistance to other pyrethroids (deltamethrin and cyper-methrin), to a carbamate (propoxur) and to the organophosphate insecticides (clorpirifos and methyl-pyrimifos) was observed. A high cross resistance to malathion (organophosphate) was detected.

Glutatión S-transferasas en no-vertebrados y en mamíferos: su importancia en la detoxificación de insecticidas / The Glutathione S-transferases (GST) of non-vertebrate organisms and mammals

Las Glutatión S-transferasas (GST) de organismos no-vertebrados no han sido estudiadas con la misma intensidad que las de mamíferos. El interés en las GST en no-vertebrados radica en su importancia como protección bioquímica de los organismos expuestos a compuestos químicos ambientales. En efecto, se ha observado que niveles elevados de GST podrían estar asociados con la tolerancia a pesticidas. La intención de esta actualización es revisar el nivel de conocimiento actual sobre estas enzimas en no-vertebrados, comparándolas con las de mamíferos. Evaluar la contribución de estos estudios al conocimiento del rol de las glutinatión transferasas en general, e intentar discernir la dirección de las futuras investigaciones en este campo

Comparative inhibitory action of 4 standard bacteriophages on the larvicidal activity of certain mosquito pathogenic bacteria against culex pipiens larvae

Four bacteriophages [CP-51, CP-54, Yousten-4 and Yousten-14] were assayed against 7 entemopathogenic bacterial strains. The two CP ones, indicating variability of the host range of the tested phages was suggested to be related to the environmental characteristics of the tested strains. On testing the susceptibility of 5 bacterial strains to the phage Yousten-4 at different cultural ages, a correlation was found between incubation time and level of bacterial susceptibility to the tested phage. This observation was explained to be due to the number of vegetative cells and/or sporulation

field survey of bacteriophage contamination of mosquito breeding places, inhibiting bacterial insecticide

Twelve geographically different mosquito breeding places were described and sampled for the detection of naturally existed bacteriophage viruses which could transduct and lysate 5 entomopathogenic bacteria. The surveyed places are classified into seepage, sewage, and irrigation breeding water. Bacterial free filtrates of the collected samples were assayed against the tested bacteria in vitro and against 3rd instar Culex pipiens larvae as well. Nine out of the twelve places could demonstrate the presence of phages. Bacillus thuringiensis H-14 was found susceptible to phage[s] present in polluted and irrigated water of 5 locations, while B. thuringiensis Berliner was susceptible to only a specific phage of one breeding place [pollutes, sewage water]. With regard to Bacillus sphaericus strains 1593 and 114, bacteriophages of sewage and irrigated water could lysate them and these phages are characterized by being of a moderate host range, except one phage which showed high specificity with strain 114 and was detected in a polluted sewage water sample collected from Daqahlia Governorate. The detected phages proved to lysate both B. thuringiensis H-14 and B. sphaericus 1593 on their larvicidal action through a series of bioassay experiment, almost all results indicate the presence of a significant inhibitory activity

Isolation, purification and ultrastructure of bacteriophages from natural mosquito breeding places in Egypt

Two bacteriophages were isolated from field collected samples representing two different mosquito breeding places. The phage AB-1 [isolated from Abheit Village, Fayoum Governorate "seepage water"] and the phage GA-2 [isolated from El-Gabal El-Asfer, Qalyoubia Governorate "sewage drain water"] were purified. Both bacteriophages were ultrastructurally described with respect to their morphology, dimensions, phases of bacterial attack and lysogeny. No major differences were observed between both isolated phages in relation to specificity, however, they were isolated from two different types of breeding places and two different geographic areas as well. This study may assume a wide host range of the isolated phages and reflect how bacterial insecticides used for mosquito larval control could be inhibited by such bacteriophage