Purification of bovine pancreatic glucagon as a by-product of insulin production

A process for purifying bovine pancreatic glucagon as a by-product of insulin production is described. The glucagon-containing supernatant from the alkaline crystallization of insulin was precipitated using ammonium sulfate and isoelectric precipitation. The isoelectric precipitate containing glucagon was then purified by ion-exchange chromatography on Q-Sepharose FF, gel filtration on Sephadex G-25 and ion-exchange chromatography on S-Sepharose FF. A pilot scale test was performed with a recovery of 87.6 percent and a purification factor of 8.78 for the first chromatographic step, a recovery of 75.1 percent and a purification factor of 3.90 for the second, and a recovery of 76.2 percent and a purification factor of 2.36 for the last one. The overall yield was 50 percent, a purification factor of 80.8 was obtained and the fraction containing active glucagon (suitable for pharmaceutical preparations) was 84 percent pure as analyzed by HPLC.

La distribución del tejido adiposo tiene relación con los niveles de insulina en la mujer obesa / The distribution of adipose tissue isrelated to insulin levels in the obese woman

Se estudiaron 54 paciientes entre 20 y 35 años de edad con sobrepeso u obesidad por índice de masa corporal (IMC = peso/talla2) mayor de 25 (normal de 20-25), asi como un grupo testigo de seis mujeres con edad similar y peso adecuado. A todas las pacientes se les midió el perímetro de la cintura y la cadera y se calculó un índice con el coeficiente de tales medidas (ICC). También se determino la concentración de insulina en suero, tanto basal como en respuesta a una carga de 75g de glucosa a los 30, 60, 90, 120, y 180 minutos. Todos los estudios se efectuaron 3 a 6 días después de un sangrado genital espontáneo o inducido con progestágeno. EIICC mostró una distribución normal con mayor frecuencia en 0.87. Las pacientes se clasificaron así: con predominio del tejido adiposo en el segmento superior cuando el índice fue mayor o giaual a 0.85 y con mayor adiposidad en el segmento inferior cuando fue manor o igual a 0.84. los valores promedio de insulina en respuesta a la glucosa, de las pacientes con predominio del tejido adiposo en segmento superior fueron significativamente mayores (U de Mann-Whitney=0,p<0.02) que los correpondientes a las que tenían mayor adiposidad en el segmento inferior. Además, los valores de ICC y los valores de insulina a los 30 minutos de la carga de glucosa se correlacionaron significativamente (r de Pearson = 0.331, p p<0.002). Estos resultados indican que existe relación entre la distribución del tejido adiposo y los niveles de insulina, siendo estos mayores en las pacientes.

Utilizaciòn de un método rápido para la separación de la hormona libre y unida en el radioinmunoensayo de insulina / Use of a rapid method for separating the bound and unbound hormone in insulin radioimmunoassay

Se desarrolló un método para acelerar la reacción del segundo anticuerpo (Ac) en el radioinmunoensayo (RIA) de insulina (ins) mediante el uso de polietilenglicol (PEG). El método permite acortar el tiempo de duración del ensayo en un día, lo cual representa una ventaja sobre el RIA habitual, ya que al aumentar el número de corridas semanales aumenta la productividad de los técnicos y constituye un ahorro de salario. Al comparar este método con el del segundo anticuerpo, se comprobó que no existe diferencia entre los resultados de ambos métodos y que hay una buena correlación entre los mismos. lo que brinda perspectiva para poder optimizar dicho método con vistas a su aplicaciòn en la asistencia y en la investigación