Frequency of Staphylococcus aureus virulence genes in milk of cows and goats with mastitis / Frequência de genes fatores de virulência de Staphylococcus aureus em leite de vacas e cabras com mastite

The present study determined the frequency of Staphylococcus aureus virulence genes in 2,253 milk samples of cows (n=1000) and goats (n=1253) raised in three different geographical regions of the state Pernambuco, Brazil. The presence of genes of virulence factors associated to adhesion to host cells (fnbA, fnbB, clfA and clfB), toxinosis (sea, seb, sec, sed, seg, seh, sei, tsst, hla and hlb), and capsular polysaccharide (cap5 and cap8) was evaluated by PCR. A total of 123 and 27 S. aureus strains were isolated from cows' and goats' milk, respectively. The sec and tsst genes were detected exclusively in goats' isolates, while the seh gene was only identified in cows' isolates. The number of toxin genes per strain showed that goats' isolates are likely more toxic than bovines' isolates. The cap5 genotype predominated in both host species, especially in strains collected from cows raised in the Agreste region. The cap8 genotype is likely more virulent due to the number of virulence genes per strain. The results of the present study demonstrate that S. aureus may pose a potential threat to human health in Brazil, and, therefore, these results should support actions related to mastitis control programs.(AU)

O presente estudo determinou a frequência de genes de virulência de Staphylococcus aureus em 2253 amostras de leite, sendo de vacas n=1000 e de cabras n=1253, procedentes das três regiões geográficas do estado de Pernambuco, Brasil. A presença de genes de fatores de virulência associados à adesão às células hospedeiras (fnbA, fnbB, clfA e clfB), toxinosis (sea, seb, sec, sed, seg, seh, sei, tsst, hla e hlb) e polissacarídeo capsular (cap5 e cap8) foram avaliadas por PCR. Um total de 123 e 27 cepas de S. aureus foram isoladas do leite de vacas e cabras, respectivamente. Os genes sec e tsst foram detectados exclusivamente em isolados de cabras, enquanto o gene seh foi identificado apenas em isolados de vaca. O número de genes de toxina por cepa mostrou que os isolados de cabras são potencialmente mais tóxicos do que os isolados obtidos de bovinos. O genótipo cap5 predominou em ambas as espécies hospedeiras, especialmente em cepas coletadas de vacas criadas na região Agreste. O genótipo cap8 é potencialmente mais virulento devido ao número de genes de virulência por isolado. Os resultados do presente estudo demonstram que S. aureus pode representar uma ameaça potencial para a saúde humana no Brasil e, portanto, estes resultados devem subsidiar ações relacionadas aos programas de controle de mastite.(AU)

Fatores de risco, etiologia e aspectos clínicos da mastite em ovelhas de corte no Paraná / Risk factors, etiology and clinical aspects of mastitis in meat ewes of Parana, Brazil

A mastite em ovelhas da raça Santa Inês apresenta-se como um problema de grande proporção e gravidade e é dificilmente tratada com sucesso. O objetivo deste estudo foi caracterizar aspectos clínicos, epidemiológicos e etiológicos da mastite clínica em ovelhas de corte criadas no norte do Paraná. O presente estudo foi realizado entre os meses de outubro de 2009 a setembro de 2010 envolvendo 54 rebanhos de ovinos de corte de diferentes raças. Durante as visitas às propriedades, um questionário foi preenchido com a finalidade de caracterizar o problema. Setenta ovelhas com mastite clínica foram examinadas e amostras de secreção láctea foram colhidas para exame microbiológico. A mastite foi considerada um problema relevante em 39 propriedades (72,3%), com frequência média de 6,74%. Casos crônicos e agudos de mastite foram observados em 69% e 31% das ovelhas examinadas, respectivamente. Em ambos os casos, a mastite flegmonosa foi a forma mais encontrada (65,5% dos casos). O agente etiológico mais prevalente foi Staphylococcus coagulase negativo (54,5%), seguido por S. aureus e A. pyogenes (11,5% cada). Mannheimia haemolytica foi isolada em dois casos. Sistema de criação não extensivo e raça Santa Inês foram identificados como fatores de risco para o desenvolvimento de mastite clínica. Secagem das fêmeas após 120 dias de lactação e separação de fêmeas doentes do rebanho foram associadas com menor ocorrência da doença. Recomenda-se a limpeza adequada das instalações e a secagem mais tardia, principalmente em rebanhos Santa Inês.

Mastits is infrequent in meat ewes. However Santa Ines ewes have a high incidence of this disease and it is severe and difficult to treat. The goal of this study was to characterize clinical, epidemiological and etiological aspects of clinical mastitis in meat ewes reared in the north of Parana, Brazil. Fifith four farms were visited from October 2009 to September 2010. The surveyed data included frequency, breeds of sheep affected, lamb mortality rates, main clinical signs, attempts and outcome of treatment, method and period of weaning and management features. Seventy ewes with clinical mastitis were fully examinated and samples of mammary secretion were asseptically taken for bacteriological culture. Mastitis was identified in 39 farms (72.3%) as a relevant problem (mean frequency was 6,74%). Chronic and acute mastitis were observed in 69% and 31% of the examinated ewes, respectively. In both cases, phlegmonous mastitis was the most prevalent form (65.5%). Coagulase negative Staphylococccus (CNS) was the main isolated microorganism (54.5%), followed by Staphylococcus aureus and Arcanobacterium pyogenes (11.5%, each one). Mannheimia haemolytica was found in two cases. The risk factors for clinical mastitis were intensive management system and Santa Ines breed. Weaning after 120 days of lactation and isolation of affected ewes were associated with lower frequency of mastitis. Preventive measures recommended are daily cleaning of facilities and delayed weaning, mainly in Santa Ines flocks.

Monitoramento microbiológico da mastite ovina na região de Bauru, SP / Microbiological monitoring of the region of ovine mastitis Bauru, SP, Brazil

As mastites são inflamações agudas ou crônicas da glândula mamária, caracterizadas por alte-rações físicas, químicas e bacteriológicas no leite. O leite ovino tem ocupado uma importância cada vez maior no mercado, podendo ser utilizado na produção de queijo e outros derivados, contribuindo para o aumento da receita do produtor rural. Entretanto, a mastite pode determinar redução, tanto na quantidade quanto na qualidade do leite produzido, levando à redução do ganho de peso dos cordeiros e causando aumento da mortalidade nos animais. Ressalta-se ainda o aspecto de saúde pública, pela redução do nível de nutrientes, assim como a intensa multiplicação microbiana que pode ocasionar diarreias e outras zoonoses. Pretendeu-se com este trabalho avaliar a frequência de casos de mastite em 159 ovelhas procedentes de vinte pequenas propriedades localizadas em Bauru, SP, e região. Das 309 amostras colhidas, em 97 (31,4%) foram isolados micro-organismos do gênero Staphylococcus sp., sendo 27,5% Staphylococcus sp. coagulase negativos e 3,9% Staphylococcus sp. coagulase positivos. Dos 177 isolamentos, 97 (54,8%) foram representados pelo gênero Staphylococcus, sendo 57 (58,8%) obtidos em cultura pura e 40 (41,2%) em associação. A maioria dos agentes isolados foi sensível aos antimicrobianos utilizados no teste. Assim, pôde-se verificar o isolamento de micro-organismos contagiosos, como Staphylococcus sp. coagulase negativo e positivo, sendo que, assim como na bovinocultura leiteira, medidas de profilaxia para obtenção higiênica do leite são de extrema importância para adquirir-se um produto final de qualidade, e seguro do ponto de vista microbiológico e alimentar.

Mastitis is an acute or a chronic inflammation of the udder, represented for physical, chemical and bacteriological milk alterations. It is notable that ovine milk represents high economic importance, and it can be used in the production of cheeses and other derivates, contributing for the farmer's recipe enlargement. However, the mastitis in animals can determine the reduction of milk quantity and quality in infected animals. This may determine lambs' weight loss and increase animal's mortality. By the other hand, considering Public Health issues, mastitis can cause milk nutrients losses and promote the microorganisms' multiplication that may lead to diarrheas and to other zoonosis in humans. This study aimed to evaluate 159 sheep mastitis status in 20 small farms located in Bauru (SP) region. Of the 309 colected samples, in 97 (31.4%) were isolated microorganisms of the genus Staphylococcus sp., which them 27.5% being coagulase negative Staphylococcus and 3.9% coagulase positive Staphylococcus. Of 177 isolates, 97 (54.8%) were represented by the genus Staphylococcus sp., which them 57 (58.8%) from pure culture and 40 (41.2%) in association. Most agents isolated were sensitive to antibiotics used in the test. Thus, we could verify the isolation of infectious microorganisms such as coagulase positive and negative Staphylococcus and, as well in dairy cattle, preventive measures to obtain hygienic milk are extremely important in order to get a final product with quality and safe in food and microbiological point of view.

Proteinograma e teores de cobre, ferro e zinco no soro sanguíneo de ovelhas da raça Santa Inês com mastite experimental por staphylococcus aureus / Proteinogram and serum concentrations of copper, iron and zinc in Santa Inês ewes with staphylococcus aureus experimentally induced mastitis

Este estudo teve por objetivo avaliar o proteinograma e os teores de cobre, ferro e zinco no soro sangüíneo de ovelhas com mastite induzida por cepa de campo de Staphylococcus aureus. Foram utilizadas 10 ovelhas da raça Santa Inês, primíparas, recém-paridas, com aproximadamente dois anos de idade e bom estado nutricional. Inoculou-se na metade direita da glândula mamária 1,0x10(4) UFC/mL da bactéria, enquanto que a metade esquerda serviu como controle. Os animais foram acompanhados diariamente e a partir do diagnóstico clínico de mastite, procedeu-se colheita do material para realização do proteinograma sérico em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) e para determinação do teor plasmático de fibrinogênio e das concentrações séricas de cobre, ferro e zinco em 16 momentos a saber: antes da inoculação (controle) e 12h, 24h, 36h, 48h, 60h, 72h, 84h, 96h, 108h, 120h, 132h, 168h, 180h, 288h e 336h após a inoculação (p.i.). Todas as ovelhas apresentaram quadro clínico de mastite, com perda da funcionalidade da glândula mamária. O proteinograma permitiu a identificação de 23 proteínas, cujos pesos moleculares (PM) variaram de 26.000 a 185.000 dáltons (Da), incluindo proteínas de fase aguda, IgG e IgA. Notou-se aumento significativo nas concentrações de haptoglobina e ceruloplasmina, assim como de IgG e IgA. Não se constatou alteração nos teores de antitripisina e de glicoproteína ácida .Verificou-se diminuição nos teores de ferro e zinco e elevação na concentração de cobre. Constatou-se correlação positiva entre o teor plasmático de fibrinogênio e as concentrações séricas de ceruloplasmina (r=0,74), a haptoglobina (r=0,62) e IgA(r=0,62). Estes resultados mostram a importância das proteínas de fase aguda ceruloplasmina e haptoglobina como indicadores auxiliares da infecção intramamária de ovelhas, assim como ratifica a relevância do fibrinogênio como marcador inflamatório em razão de sua alta correlação com as proteínas...

The aim of the present study was to evaluate the effect of Staphylococcus aureus experimentally induced mastitis on proteinogram and serum concentrations of cupper, iron and zinc levels of Santa Ines primiparous ewes . The right mammary gland of ten healthy ewes was inoculated with 1,0x10(4) UFC/mL of S. aureus. Clinical examination and determination of serum concentrations of proteins by electrophoresis in polyacrylamide gel (SDS-PAGE), cupper, iron and zinc, as well plasma level of fibrinogen were measured before the inoculation (control) and 12h, 24h, 36h, 48h, 60h, 72h, 84h, 96h, 108h, 120h, 132h, 168h, 180h, 288h and 336h after bacteria inoculation. All animals experimentally infected presented clinical mastitis and subsequent loss of mammary gland function. The electrophoretogram allowed the identification of 23 proteins with molecular weights (MW) ranged from 26.000 to 185.000 daltons (Da) including acute-phase proteins, IgG and IgA. A significant increase (P<0,05) in haptoglobin, ceruloplasmin, IgG and IgA concentrations was observed. Antitrypsin and acid glicoprotein concentrations did not alter. The levels of iron and zinc decreased and the cupper concentration increased . A positive correlation between plasma fibrinogen and serum ceruloplasmin (r=0.74), haptoglobin (r=0.62) and IgA (r=0.62) was also identified. Results showed the importance of ceruloplasmin and haptoglobin as acute-phase proteins in ewes with intramammary infections and confirms fibrinogen as an inflammatory marker because its high correlation with specific proteins. The alterations in the serum levels of Cu, Fe and Zn suggest the action of inflammatory mediators triggered by S. aureus.

Caracterização da mastite subclínica em caprinos produzidos em sistema orgânico no Rio Grande do Sul / Characterization of subclinical mastitis in dairy goats herds raised on an organic system in Rio Grande do Sul

O leite e derivados são reconhecidos como veículos de patógenos para humanos, secundário a contaminação pós-ordenha ou de infecções do próprio animal, particularmente na mastite. Foi estudada a ocorrência de mastite e aspectos do manejo em cabras de três propriedades criadas em sistema orgânico. O exame clínico da glândula mamária de 64 cabras em diferentes períodos de lactação, não acusou a presença de mastite clínica. Entretanto, o Califórnia Mastitis Test (CMT) identificou 54 (22,7 por cento) metades mamárias reagentes (+ ou ++). Foram colhidas 238 amostras de leite, das quais houve isolamento bacteriano em 37 (15,6 por cento). Em apenas oito amostras houve coincidência entre o isolamento bacteriano e o resultado do CMT, indicando sensibilidade de 21,6 por cento para este teste no diagnóstico de mastite subclínica em caprinos. Staphylococcus coagulase negativa (SCN) foi o microrganismo mais freqüente (83,8 por cento). O teste de sensibilidade microbiana in vitro revelou resistência das linhagens de SCN ao cotrimoxazol (50 por cento), ampicilina (48,1 por cento), nitrofurantoína (7,7 por cento), cefaclor (7,14 por cento) e oxacilina (3,85 por cento). Cefalotina, gentamicina, neomicina, estreptomicina e tetraciclina foram os antimicrobianos mais efetivos frente aos isolados. Não se evidenciou relação entre a ocorrência de mastite subclínica com a raça, a fase de lactação, sistema de ordenha ou qualidade da água utilizada nas propriedades.

Milk and derivates are recognized as vehicle of different pathogens for humans. These micoorganisms may manifest as post-milking contamination or as in infections in the animal itself, particularly in mastitis. The aim of present study was characterizes the occurrence of mastitis and management aspects in dairy-goats raised in three farms of organic milk. The correlation between mastitis and goat husbandry was also investigated. The clinical exam of the mammary glands of 64 dairy-goats did not reveal the presence of clinical mastitis. Nevertheless, the California Mastitis Test (CMT) identified 54 (22.7 percent) reactive mammary halves (+ or ++). From 238 milk samples collected, 37 (15.6 percent) were positive for bacterial isolates. Coincident positive results for bacterial isolate tests and CMT were observed in only eight samples, which indicate a sensitivity index of 21.6 percent for the caprine subclinical mastitis diagnosis test. Coagulase-negative staphylococci (CNS) were identified as the most frequent pathogen in milk samples (83.8 percent). The in vitro sensitivity test revealed CNS strains resistant to cotrimoxazole (50 percent), ampicillin (48.1 percent), nitrofurantoine (7.7 percent), cefaclor (7.14 percent), and oxacilline (3.85 percent). Cefalotine, gentamicin, neomycin, streptomycin, and tetracycline were the most effective drugs. No correlation was observed between the occurrence of subclinical mastitis and race, lactation period, drinking water quality in farms, or milking system as adopted in the present study.

[Breast tuberculosis: study of 15 cases]

Mammary tuberculosis is a rare disease especially seen in underdeveloped countries. Describe the epidemiological, clinical parameters of mastitis tuberculosis and determinate the interest of imagery and histology in diagnosis. Fifteen cases of tuberculous mastitis diagnosed at the Infectious Diseases and Gynaecology departments of F. Bourguiba hospital during the period from January 1988 to March 2006. The mean age of our patients was 29.2 years [21 - 56 years]. History of tuberculosis was found in 33.3% of the cases. Sixty percent presented with fever and 73.4% complained of skin abscess. We noted symptoms of tuberculosis impregnation in 53.3% of cases. The fine needle aspiration achieved for all patients was negative in 14 cases and brought back the caesium in the other. The diagnosis has been made, for all our patients, after histological study when we found typical tuberculosis lesions on pieces of tumorectomy or biopsy. All patients had an anti-tuberculosis medical treatment. The median duration of treatment was 10 months [9 -18 months]. Although tuberculosis of breast is extremely rare, it should be kept in mind particularly in undeveloped countries. In front of symptoms evoking tuberculosis, biopsies must be done to eliminate an eventual cancer

An unusual gangrenous goat mastitis caused by Staphylococcus aureus, Clostridium perfringens and Escherichia coli co-infection

Relata-se, pela primeira vez no Brasil, a ocorrência de mastite gangrenosa caprina atípica causada pela co-infecção por Staphylococcus aureus, Clostridium perfringens e Escherichia coli em uma cabra da raça Boer, na segunda semana de lactação. Descrevem-se os achados clínicos, os procedimentos de diagnóstico microbiológico e a conduta terapêutica.

Mastite lactacional e a iniciativa Hospital Amigo da Criança, Feira de Santana, Bahia, Brasil / Lactational mastitis and Baby-Friendly Hospital Iniciative, Feira de Santana, Bahia, Brazil

O objetivo desse estudo foi estimar se o acompanhamento das lactantes nos hospitais credenciados como Amigos da Criança demonstrou ser fator de proteção contra a mastite no Município de Feira de Santana, Bahia, Brasil. Trata-se de um estudo transversal, com avaliação de 2.543 mães de crianças menores de um ano, entrevistadas por 104 universitários, em unidades de vacinação, selecionadas por estratificação simples. Foram calculadas medidas de associação (razão de prevalência, com IC95 por cento) e de significância estatística, através do teste do qui-quadrado com respectivo valor de p. Realizou-se análise multivariada através do modelo de regressão logística. Foi observada prevalência significantemente menor de mastite entre as mulheres que pariram nos hospitais com o programa (3,6 por cento versus 5,3 por cento) (RP = 0,68; IC95 por cento: 0,46-1,01). As variáveis associadas a menores probabilidades de mastite foram: nascimento em hospitais com o programa (RP = 0,71; IC95 por cento:0,48-1,06), ausência de fissura mamilar (RP = 0,27; IC95 por cento:0,19-0,40) e ausência de trabalho materno fora do lar (RP = 0,64; IC95 por cento:0,44-0,94). Notou-se, assim, efeito protetor contra a mastite nas mulheres atendidas nos hospitais com o programa.

Profile of breast lesions among women with positive biopsy findings in Yemen

This study described the profile of breast pathology based on records from a reference histopathology laboratory in Yemen of 773 women with positive biopsy or mastectomy findings. Cancers were classified according to the International classification of diseases for oncology. Benign lesions were found in 79.9% of cases. Fibroadenoma was the most prevalent lesion [30.0%] with a mean age at presentation of 22.2 years, followed by fibrocystic disease [27.4%] and breast inflammation [13.1%]. Invasive carcinoma was found in 155 cases [20.1%], at a mean age of 44.7 years

Características físico-químicas e contagem de células somáticas de leite proveniente de vacas naturalmente infectadas por streptococcus spp / Physic-chemical characteristics and somatic cell count in bovine milk naturally infected by streptococcus spp / Características físico-químicas y cómputo de células somáticas de leche de vacas naturalmentee infectadas por streptococcus spp

Foram estudadas 1051 vacas da raça Holandesa de seis propriedades leiteiras do estado de São Paulo. As amostras de leite foram cultivadas em ágar sangue ovino 8% e ágar MacConkey, sob aerofilia, por até 96 horas na intenção de isolar Streptococcus spp em estado puro. Confirmada a presença do agente, bem como a ausência de outros microrganismos aeróbicos nas amostras, realizaram-se as seguintes provas: densidade, gordura, extrato seco total (EST), extrato seco desengordurado (ESD), acidez (ºD), crioscopia, prova quantitativa para proteína, prova quantitativa para cloretos, contagem de células somáticas (CCS), bem como a classificação taxonômica do agente. A análise estatística dos resultados revelou que os Streptococcus spp promoveu alterações significativas no que diz respeito aos parâmetros densidade, gordura, teor de cloretos e contagem de células somáticas. Os resultados referentes aos padrões de proteína, EST, ESD e acidez não apresentam alterações estatisticamente significativas entre o grupo de amostras positivas para o agente e o grupo negativo. Com base nas alterações observadas conclui-se que o Streptococcus spp, como agente etiológico das mastites, causa perdas econômicas significativas aos produtores, indústria e consumidores da cadeia do leite.

ABSTRACT: 1051 Holstein cows from six dairy farms in Sao Paulo state - Brazil were studied. Milk samples were cultivated in sheep blood agar and 8% MacConkey agar, under aerobic conditions for 96 hours in order to isolate Streptococcus spp in pure state. All the positive samples and the control group of negative ones were submitted to the following tests: density, fatness, total dry extract (EST), fatless dry extract (ESD), acidity (ºD), cryoscopy, quantitative protein proof, quantitative chlorine proof, somatic cell count (SCC) as well as the taxonomic classifi cation of the agent. The statistical analysis showed that Streptococcus spp was responsible for signifi cant alterations in the parameters of density, fatness, chlorine and CCS. The results from the standards of protein, EST, ESD and acidity didn't present alterations statistically signifi cant among the positive samples for the agent and the negative group. Based on the observed alterations it was concluded that Streptococcus spp, as etiologic agent of mastitis, can cause signifi cant economic losses to producers, industry and milk consumers.

RESUMEN: Fueron estudiadas 1051 vacas de la raza Holandeza de seis propriedades de leche del Estado de São Paulo. Las muestras de leche fueron cultivadas en agar sangre de ovino 8% y agar MacConkey, bajo aerofi lia, hasta 96 horas para intentar aislar Streptococcus spp en estado puro. Confi rmada la presencia del agente, así como la ausencia de otros microorganismos aeróbicos en las muestras, fueron realizadas las siguientes pruebas: densidad, grasa, extracto seco total EST), extracto seco sin grasa (ESD), acidez (D), crioscopia, prueba cuantitativa para las proteinas prueba cuantitativa para los cloretos, cómputo de las células somáticas (CCS), así como la clasifi cación taxonómica del agente. El análisis estadístico de los resultados reveló que los Streptococcus spp promovieron alteraciones signifi cativas para los parámetros densidad, grasa, tenor de cloretos y cómputo de células somáticas. Los resultados referentes a los moldes de proteínas, EST, ESD y acidez no presentaron alteraciones estadísticamente signifi cativas entre el grupo de muestras positivas para el agente y el grupo negativo. Basándose en las alteraciones observadas se conclui que el Streptococcus spp, como agente etiológico de la infección, causa pierdas económicas signifi cativas a los productores, a la industria y a los consumidores de la leche.

Processos inflamatórios das mamas: experiência pessoal / Inflammatory diseases of the breast: personal experience

Os autores reviram os prontuários de 40 pacientes do Ambulatório de Mastologia do Hospital Universitário São Francisco, da FCM da Universidade São Francisco, de Bragança Paulista, no período de 1993 a 1997. As pacientes estudadas foram as portadoras de processos infecciosos da mama, tendo sido avaliadas as seguintes variáveis: idade, paridade, amamentação, hábito de fumar e tipo de processo infeccioso. Observou-se idade média de 25,5 anos . Houve predominância entre as primigestas, com idade inferior a 20 anos e que haviam amamentado. Devido à falta de dados não foi possível relacionar o hábito de fumar com a presença da patologia. Verificou-se maior incidência da mastite na mama esquerda. O tipo mais freqüente encontrado foi a mastite puerperal, seguida pela aguda e finalmente pela mastite crônica recidivante

Spectrum of breast disease in young females: a retrospective study of 1315 patients.

A total of 1315 breast lesions seen in women up to 40 years of age were registered in the files of Pathology Department. Out of these 807 were benign and 508 malignant lesions. Breast carcinoma was very rare up to second decade of life but its incidence progressively increased with age. Among benign tumours fibroadenomas were the commonest tumours. This study shows a higher incidence of inflammatory diseases and malignant tumours in young females as compared to the reports from the West.