Efecto ecotóxico y preventivo del uso de aceites esenciales en la mastitis bovina / Ecotoxic and preventive effect of the use of essential oils in bovine mastitis

The essential oils of Lippia citriodora (Ort.) and Lippia origanoides (Kunth) have shown antimicrobial activity associated with mastitis. The objective of this study was to evaluate its ecotoxic effect with the Artemia salina bioassay and the prevention of mastitis through an in vivo test in cattle (n=20) with a product based on these oils using a conventional product as a control. Contact hypersensitivity, the effect on somatic cells, and residuality in mil k samples were evaluated. The results of the Artemia salina bioassay were 10.05 and 19.36 (µg/mL) respectively. No negative effects or contact hypersensitivity were observed, and no residual metabolites were found in post - test milk. The somatic cell count showed 75% effectiveness in the prevention of mastitis with essential oils compared to 62.5% with the conventional product. The evaluated formulation could be used in the prevention of bovine mastitis safely, further investigation is required.

Los aceites esenciales de Lippia citriodora (Ort.) y Lippia origanoides (Kunth), han mostrado acti vidad antimicrobiana asociada a la mastitis. El objetivo de este estudio fue evaluar su efecto ecotóxico con el bioensayo Artemia salina y la prevención de mastitis mediante un ensayo in vivo en bovinos (n=20) con un producto a base de estos aceites utiliz ando como control un producto convencional. Se evaluó la hipersensibilidad de contacto, efecto en células somáticas y residualidad en muestra de leche. Los resultados del bioensayo de Artemia salina fueron 10,05 y 19,36 (µg/mL) respectivamente. No se obser varon efectos negativos, ni hipersensibilidad de contacto, y no se encontraron metabolitos residuales en leche posterior al ensayo. El conteo de células somáticas mostró efectividad en la prevención de mastitis del 75% con aceites esenciales frente al 62.5 % del producto convencional. La formulación evaluada podría ser utilizada en la prevención de la mastitis bovina de forma segura, se requiere profundizar en la investigación.

Avaliação "in vitro" do efeito do ozônio em Staphylococcus aureus isolados de leite de vacas com mastite / Evaluation "in vitro" of the ozone effect in Staphylococcus aureus isolated from cow milk with mastitis

O ozônio possui efeito bactericida, fungicida e viricida e tem sido usado para o trat amento de diversas enfermidades. O objetivo do trabalho, foi avaliar a ação bactericida do ozônio, in vitro, contra Staphylococcus aureus isolados de vacas leiteiras. O experimento foi realizado com vacas, produtoras de leite, uma fazenda do Sul da Bahia. Foram avaliadas vacas que foram positivas para mastite, depois de ter sido feito o teste California Mastitis Test. No laboratório realizou-se os testes de coloração de gram, catalase e coagulase, acetoína, maltose e trealose e foi realizada a diluição seriada das amostras em solução salina. Foi realizada também a ozonização das colônias na concentração de 40 microgramas por mililitro por 5 minutos. Nas análises após a ozonização, observou-se uma significativa diminuição do crescimento de colônias.

Presença de resíduo de ceftiofur no leite / Presence of ceftiofur residue in milk

Atualmente um novo grupo de fármaco vem ganhando destaque para tratamento de mastite clínica em bovinos: as cefalosporinas. Neste grupo encontra-se o ceftiofur; um antimicrobiano bactericida de amplo espectro que segundo os laboratórios não apresenta período de carência por não ser excretado via leite. Este estudo teve como objetivo analisar o leite de animais tratados com este medicamento. Cinco animais positivos para a afecção foram selecionados e tratados durante cinco dias, com dose de 1mg/Kg e aplicação com intervalo de 24 horas. A cada 12 horas foi realizada a análise do leite com o teste qualitativo Beta Star Combo®. Após a aplicação da droga todos os animais apresentaram resíduos no leite. Um animal teve carência até 60 horas, três animais com 84 horas e um animal 120 horas após última aplicação. Isso mostra que o ceftiofur apresenta carência tendo efeito residual significativo quando usado via sistêmico, necessitando-se de mais estudos para entendimento da ação do fármaco.

Identification and antimicrobial suceptibility profile of bacteria causing bovine mastitis from dairy farms in Pelotas, Rio Grande do Sul / Identificação e perfil de suscetibilidade antimicrobiana de bactérias causadoras de mastite bovina em propriedades leiteiras de Pelotas, Rio Grande do Sul

Abstract Mastitis is an inflammatory process of the udder tissue caused mainly by the bacteria Staphylococcus aureus. The indiscriminate use of antibiotics fosters conditions that favor the selection of resistant microorganisms, suppressing at the same time susceptible forms, causing a serious problem in dairy cattle. Given the importance in performing an antibiogram to select the most adequate antimicrobial therapy, the aim of this study was to identify bacteria isolated from cow's milk with mastitis, in dairy farms situated in the city of Pelotas, Rio Grande do Sul, and to determinate the susceptibility profile of these isolates against the antibiotics used to treat this illness. A total of 30 isolates of Staphylococcus spp., were selected from milk samples from the udder quarters with subclinical mastitis whose species were identified through the Vitek system. The susceptibility profile was performed by the disk diffusion assay, against: ampicillin, amoxicillin, bacitracin, cephalexin, ceftiofur, enrofloxacin, gentamicin, neomycin, norfloxacin, penicillin G, tetracycline and trimethoprim. In the antibiogram, 100.0% of the isolates were resistant to trimethoprim and 96.7% to tetracycline and neomycin, three strains of Staphylococcus spp., (10.0%) presented resistance to the 12 antibiotics tested and 24 (80.0%) to at least eight. These results showed the difficulty in treating mastitis, due to the pathogens' resistance.

Resumo A mastite se constitui no processo inflamatório da glândula mamária causada principalmente por bactérias Staphylococcus aureus. O uso indiscriminado dos antibióticos promove condições que favorecem a seleção de micro-organismos resistentes e, ao mesmo tempo, suprime formas suscetíveis, causando um grave problema para a bovinocultura leiteira. Tendo em vista a importância da realização do antibiograma para a seleção da terapia antimicrobiana mais adequada, o objetivo deste estudo foi identificar bactérias isoladas de leite de vaca com mastite, oriundas de propriedades leiteiras localizadas na cidade de Pelotas, RS, bem como determinar o perfil de suscetibilidade desses isolados frente a antibióticos usados para o tratamento desta doença. Foram selecionados 30 isolados de Staphylococcus spp. de amostras de leite provenientes de quartos mamários com mastite subclínica, cujas espécies foram identificadas através do sistema Vitek. O perfil de suscetibilidade foi realizado pela técnica de difusão em disco, frente a: ampicilina, amoxicilina, bacitracina, cefalexina, ceftiofur, enrofloxacina, gentamicina, neomicina, norfloxacina, penicilina G, tetraciclina e trimetoprima. No antibiograma, 100,0% dos isolados foram resistentes a trimetoprima e 96,7% a tetraciclina e a neomicina, três cepas (10,0%) foram resistentes aos 12 antibióticos testados e 24 (80,0%) a pelo menos oito. Esses resultados demonstram a dificuldade encontrada no tratamento da mastite devido à resistência dos agentes patológicos.

Considerações sobre o tratamento das mastites / Considerations on the treatment of mastitis

A mastite é considerada o maior problema dos animais destinados à produção de leite. Altera a sua composição e aumenta a contagem de células somáticas (CCS). Os micro-organismos envolvidos na doença podem ser origem infecciosa, como Staphylococcus aureus, ou ambiental, tal como Escherichia coli. A cultura bacteriana é uma ferramenta de diagnóstico e auxilia na detecção do patógeno causador da mastite. No entanto, fatores como fagocitose podem desencadear um resultado negativo. Quando estabelecido um programa de controle de mastite, o diagnóstico precoce e o início do tratamento adequado dos casos clínicos são fundamentais para se atingir os objetivos e seu sucesso, está relacionado com o patógeno envolvido. A indicação do tratamento de longa duração, ou terapia estendida, tem melhorado a resposta ao tratamento em casos de mastite por S. aureus, no entanto, com 30-50% de cura. Do ponto de vista do manejo dos animais, devido a alta contagiosidade deste patógeno, sua persistência no rebanho e custo em função ao tratamento, muitas vezes, o descarte do animal tem sido priorizado a fim de controlar os casos de mastite em propriedades. As medidas de controle são muito importantes para contribuir com a redução de casos de mastite por este patógeno. A indicação do tratamento intramamário associada com sistêmico tem poder efetivo em casos de mastite por E. coli, cujos casos agudos apresentam-se com sepse e toxemia. São abordados ainda aspectos de tratamentos alternativos das mastites, utilizados principalmente no processo orgânico de produção leiteira.(AU)

Mastites are considered a major problem on animals for milk production. Changes the milk composition and increases the somatic cell count (SCC). The microorganism involved in the disease may be infectious origin such as Staphylococcus aureus or environmental such as Escherichia coli. Bacterial culture is a diagnostic tool and aids in the detection of pathogenic causing masitis. However factor such as phagocytosis may result a negative result. When established a mastitis control program early diagnose and the initiation of appropriate treatment of clinical cases are fundamental for achieving the goals and success is related to the pathogen involved. The indication of treatment of long duration, or extended therapy has improved the response to the treatment in cases of matitis by S. aureus, however with 30-50% of cure. From the view point of handling of animals, given the high infectiousness of this pathogen, its persistence in the herd and cost-effective as a function of response to treatment often has prioritized the animal's discard in order to control the mastitis cases in properties. Control measures are very important to contribute the reduction of cases of mastitis symptoms by this pathogen. The indication of intramammary treatment associated with systemic has power effective in cases of mastitis by ­E. coli, whose acute cases present with sepsis and toxemia. Also address aspects of alternative treatments of mastitis, mainly used in the organic process of milk production.(AU)

Evaluación de la eficacia antimicrobiana del aceite esencial de Minthostachys verticillata y limoneno contra cepas de Streptococcus uberis aislados de mastitis bovina / Evaluation of the antimicrobial efficacy of Minthostachys verticillata essential oil and limonene against Streptococcus uberis strains isolated from bovine mastitis

Bovine mastitis is a disease that causes great economic losses per year, being Streptococcus uberis the main environmental pathogen involved. The aim of the present study was to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum bactericidal concentration (MBC) of Minthostachys verticillata essential oil and limonene for S. uberis strains isolated from bovine mastitis. In addition, the effect of MIC on biofilm formation was analyzed. MIC values for the essential oil ranged from 14.3 to 114.5 mg/ml (1.56-12.5% v/v) and MBC between 114.5 and 229 mg/ml (12.5-25% v/v). MICs for limonene ranged from 3.3 to 52.5 mg/ml (0.39-6.25% v/v) and MBC was 210 mg/ml (25% v/v). Both compounds showed antibacterial activity and affected the biofilm formation of most of the strains tested. In conclusion, these compounds could be used as an alternative and/or complementary therapy for bovine mastitis caused by S. uberis.

La mastitis bovina es una enfermedad que causa grandes pérdidas económicas por año, Streptococcus uberis es el principal patógeno ambiental involucrado. El objetivo del presente estudio fue determinar la concentración inhibitoria mínima (CIM) y la concentración bactericida mínima (CBM) del aceite esencial de Minthostachys verticillata y del limoneno sobre cepas de S. uberis aisladas de mastitis bovina. Además, se analizó el efecto del aceite esencial y el limoneno en la CIM determinada en caso sobre la formación de biofilm de estas cepas. Los valores de CIM del aceite esencial oscilaron entre 14,3 y 114,5 mg/ml (1,56%-12,5% v/v) y los de CBM entre 114,5 y 229 mg/ml (12,5%-25% v/v). Las CIM del limoneno oscilaron entre 3,3 y 52,5 mg/ml (0,39% - 6,25% v/v) y la CBM fue de 210 mg/ml (25% v/v). Ambos compuestos mostraron actividad antibacteriana y afectaron la formación de biofilm de la mayoría de las cepas. En conclusión, estos compuestos podrían ser utilizados como terapia alternativa o complementaria para la mastitis bovina causada por S. uberis.

Prevalencia y sensibilidad a antibióticos de especies de estafilococos coagulasa negativos provenientes de mastitis subclínica en bovinos de tambos de la región central de Argentina / Prevalence and antibiotic susceptibility of coagulase-negative Staphylococcus species from bovine subclinical mastitis in dairy herds in the central region of Argentina

Coagulase-negative staphylococci (CNS) are a common cause of bovine subclinical mastitis (SCM). The prevalence of CNS species causing SCM identified by genotyping varies among countries. Overall, the antimicrobial resistance in this group of organisms is increasing worldwide; however, little information exists about a CNS species resistant to antibiotics. The aim of the present study was to genotypically characterize CNS at species level and to determine the prevalence and antibiotic resistance profiles of CNS species isolated from bovine SCM in 51 dairy herds located in the central region of the province of Cordoba, Argentina. In this study, we identified 219 CNS isolates at species level by PCR-restriction fragment length polymorphism of the groEL gene. Staphylococcus chromogenes (46.6%) and Staphylococcus haemolyticus (32%) were the most prevalent species. A minimum of three different CNS species were present in 41.2% of the herds. S. chromogenes was isolated from most of the herds (86.3%), whereas S. haemolyticus was isolated from 66.7% of them. The broth microdilution method was used to test in vitro antimicrobial susceptibility. Resistance to a single compound or two related compounds was expressed in 43.8% of the isolates. S. chromogenes and S. haemolyticus showed a very high proportion of isolates resistant to penicillin. Resistance to two or more non-related antimicrobials was found in 30.6% of all CNS. S. haemolyticus exhibited a higher frequency of resistance to two or more non-related antimicrobials than S. chromogenes.

Los estafilococos coagulasa negativos (ECN) son una causa frecuente de mastitis subclínica (MSC) en bovinos. La prevalencia de especies de ECN causantes de MSC identificadas por métodos genotípicos varía entre países. La resistencia antimicrobiana en este grupo de organismos se está incrementando en el mundo; sin embargo, existe poca información acerca de las especies de ECN resistentes a antibióticos. Los objetivos del presente estudio fueron caracterizar genotípicamente los ECN a nivel de especie y determinar la prevalencia y los perfiles de resistencia a antibióticos de las especies de ECN aisladas de MSC en bovinos de 51 rodeos situados en la provincia de Córdoba, Argentina. Mediante polimorfismos de los fragmentos de restricción del gen groEL identificamos 219 aislamientos de ECN a nivel de especie. Staphylococcus chromogenes (46,6%) y Staphylococcus haemolyticus (32%) fueron las especies más prevalentes. Un mínimo de 3 especies diferentes de ECN estuvieron presentes en el 41,2% de los tambos. S. chromogenes fue aislado en la mayoría de los tambos (86,3%), mientras que S. haemolyticus fue aislado en el 66,7% de aquellos. Para el análisis de sensibilidad a los antimicrobianos in vitro se usó el método de microdilución en caldo. La resistencia a un único compuesto o a 2 compuestos relacionados fue expresada en el 43,8% de los aislamientos. S. chromogenes y S. haemolyticus mostraron una muy elevada proporción de aislamientos resistentes a penicilina. La resistencia a 2 o más antimicrobianos no relacionados fue hallada en el 30,6% de los ECN. S. haemolyticus exhibió una frecuencia de resistencia a 2 o más antimicrobianos no relacionados más elevada que S. chromogenes.

Susceptibility and resistance to antimicrobial Staphylococcus aureus under biofilm / Susceptibilidade e resistência a antimicrobianos de Staphylococcus aureus em condições de biofilme

Staphylococcus is an important agent of mastitis, especially when biofilm producers are related to a number of mechanisms of resistance to different types of infections. The objective of this research was to evaluate the susceptibility and resistance of Staphylococcus aureus strains isolates from cases of bovine mastitis and milking environment under conditions of biofilm, compared to three different concentrations in different antimicrobials. Thirty-two strains used were S. aureus that, due to the inhibition tests, minimal biofilm eradication concentration were tested using cephalexin, amoxicillin and rifampin at concentrations of 30 mg/mL, and 50 mg/mL 100 mg/mL for 12 hours, and efficiency of tests evaluated by counting the colony forming units and the microplate test. The results revealed that among the tested antibiotics cephalexin showed the best efficiency at the three concentrations tested, and rifampin and amoxicillin were more efficient at concentrations of 50 and 100 mg/mL. These data demonstrate the importance of targeted antibiotic therapy associated with the correct cleaning of milking equipment, thus, preventing the formation of biofilm, avoiding persistent microbial adhesion in equipment, and the spread of microorganisms by ascending channel teats among herd animals.

Os Staphylococcus, principais agentes causadores da mastite, quando em biofilmes, estão relacionados a uma série de mecanismos de resistência em diferentes tipos de infecções. O presente trabalho avaliou a susceptibilidade e resistência dos Staphylococcus aureus, isolados de casos de mastite bovina e do ambiente de ordenha, em condições de biofilme, frente a três antimicrobianos distintos em diferentes concentrações. Foram utilizadas trinta e duas estirpes de S. aureus testadas frente aos testes de inibição da concentração mínima de erradicação de biofilmes, utilizando cefalexina, amoxicilina e rifampicina, nas concentrações de 30 mg/mL, 50 mg/mL e 100 mg/mL, por doze horas de contato, e a eficiência dos testes avaliada pela contagem das unidades formadoras de colônias e pelo teste de microplacas. Os resultados revelaram que, entre os antimicrobianos testados, a cefalexina foi o que apresentou melhor eficiência nas três concentrações testadas, e a rifampicina e amoxacilina tiveram maior eficiência nas concentrações de 50 e 100 mg/ mL. Esses dados demonstram a importância sobre antibioticoterapia orientada associada com a correta higienização dos equipamentos de ordenha, evitando-se, assim, a formação de biofilmes, a adesão microbiana persistente em equipamentos, e a difusão dos microrganismos pelo canal ascendente dos tetos entre os animais do rebanho.

Relação da idade na presença de bactérias resistentes a antimicrobianos em rebanhos leiteiros no Rio Grande do Sul / Age related to the presence of antimicrobial resistant bacteria in twenty one dairy herds in Rio Grande do Sul, Brazil

[...] As bactérias foram isoladas de amostras de leite compostas de todos os quartos mamários de cada vaca após descartar os primeiros três ou quatro jatos de leite. Para acessar os potenciais fatores de risco, características dos animais foram obtidas através de uma entrevista com os produtores. Os exames laboratoriais foram realizados de acordo com as recomendações do National Mastitis Council. Um total de 242 isolados foi obtido de 195 vacas a partir da amostra do rebanho total (251 vacas). A prevalência de infecções foi descrita em grupos de acordo com o perfil epidemiológico: bactérias ambientais, contagiosas e outras. Estas perfizeram 57,3 por cento, 26,3 por cento e 11,2 por cento, respectivamente, dos animais amostrados. Testes de suscetibilidade antimicrobiana contra 12 diferentes antimicrobianos foram realizados em 159 isolados. No total, 30 por cento dos isolados testados mostraram resistência a pelo menos três grupos diferentes de antimicrobianos e foram classificados como multirresistentes. Foram observadas as freqüências mais elevadas de resistência contra a ampicilina para os estafilococos coagulase-negativo, seguida de eritromicina para estafilococos coagulase-positivo e tetraciclina para estreptococos. A análise de regressão logística mostrou uma relação significativa entre a idade das vacas e a presença de estafilococos coagulase-positivo multirresistentes e distribuição de classes diferentes de bactérias nos diferentes estratos etários, o que sugere uma concorrência dinâmica ao longo do tempo (p < 0,05). Animais com três a quatro anos tiveram 13,7 vezes mais chances (IC95 por cento 1,4 - 130,2, p = 0,02) de ter estafilococos coagulase-positivo multirresistentes em comparação com aqueles com dois ou três anos. O tempo de exposição a agentes infecciosos e consequentes terapias sugere uma maior chance de colonização do úbere por patógenos resistentes devido à pressão de seleção repetida durante a vida.

[...] Bacteria were isolated from composite milk samples obtained from all quarters of each cow after discarding the initial three or four streams of milk. To access potential risk factors, animal characteristics were obtained through an interview with the producers. Laboratory tests were done according to National Mastitis Council recommendations. A total of 242 isolates was obtained from 195 cows out of 251 cows sampled. The prevalence of animal infections was described in groups according to the epidemiological profile: environmental, contagious and other bacteria. These were 57.3 percent, 26.3 percent and 11.2 percent, respectively of the sampled animals. Antimicrobial susceptibility tests against 12 different antimicrobials were performed in 159 isolates. Altogether, 30 percent of the isolates tested showed resistance to at least three different antimicrobial groups and were classified as multidrug-resistant. Higher frequencies of resistance were observed against ampicillin to coagulase-negative staphylococci, followed by erythromycin to coagulase-positive staphylococci and tetracycline to streptococci. The logistic regression analysis showed a significant relationship between age of the cows and presence of multidrug-resistant coagulase-positive staphylococci and distribution of different class of bacteria, suggesting a competition dynamic throughout the ages (p < 0.05). Animals with three to four years old had 13.7 times more chances (IC95 percent 1.4 - 130.2; p = 0,02) to have multidrug-resistant coagulase-positive staphylococci compared to those with two to three years. Time of exposure to infectious agents and consequent therapies suggests a greater chance of udder's colonization by resistant pathogens due to repeatedly selection pressure during lifetime.

Risk factors associated with bacteriological cure, new infection, and incidence of clinical mastitis after dry cow therapy with three different antibiotics

Factors affecting bacteriological cure rates (BCR) and new intramammary infections (IMI) during the dry period as well as clinical mastitis (CM) during early lactation were investigated in 414 German Holstein dairy cows receiving dry cow therapy. Cows were treated with either benethamine benzylpenicillin (300,000 IU), penethamate hydriodide (100,000 IU), and framycetin sulphate (100 mg, n = 136), or cefquinome (150 mg, n = 135), or benzathine cloxacillin (1,280 mg, n = 143). Overall BCR, IMI, and CM at parturition were 86.4%, 20.7%, and 4.3%, respectively. The three antibiotic treatments differed only in BCR, with cloxacillin yielding better results than the others. Udder quarters from cows with > 4 lactations had a higher risk of IMI and CM at calving. Chronic changes in udder tissues were linked to a lower BCR and were associated with a higher risk of CM during early lactation. The risk of CM at calving was higher in udder quarters with unspecific or subclinical mastitis before drying off. In conclusion, with antibiotic dry cow therapy, age and health status of the udder appear to be major determinants of IMI and CM during the dry period and early lactation, while BCR was associated with the antibiotic type and udder tissue status.

Relationship between in vitro susceptibility of bovine subclinical mastitis isolates and bacteriological outcome of intramammary treatment with cefquinome

The objective of the present study was to determine whether there was an association between the in vitro antimicrobial susceptibility test results of subclinical mastitis pathogens and bacteriological outcomes of intramammary treatments using cefquinome. A total of 110 intramammary pathogens from 51 cows were assessed in this study. Most intramammary infections were due to coagulase-negative staphylococci, environmental streptococci, and coliforms. The antimicrobial susceptibility to cefquinome was determined using the Kirby-Bauer disc diffusion method. Bacteriological cure rates for the sensitive, intermediate, and resistant isolates in the standard treatment group [three intramammary infusions of 75 mg cefquinome at 16 h intervals] were 82.4%, 90%, and 87.5%, respectively. These figures in the extended treatment group [six intramammary infusions of 75 mg cefquinome at 16 h intervals] were 83.3%, 100%, and 100%, respectively. Treatment outcomes were not associated with the results of sensitivity tests in the standard group. However, in the extended group, the probability of a bacteriological cure was lower in quarters from which cefquinome-sensitive pathogens were isolated than the quarters from which intermediate or resistant pathogens were isolated. Based on this study, the Kirby-Bauer susceptibility test result is a poor predictor for the bacteriological cure of subclinical mastitis treated with intramammary cefquinome

Utilizaçäo da enrofloxacina (Baytril) no tratamento da mastite bovina estafilocócica / Utilization of enrofloxacina (Baytril) on staphylococcal bovine mastitis

A açäo da enrofloxacina pela administraçäo via intramamária e sistêmica na mastite bovina subclínica por Staphylococcus aureus foi avaliada. Como tratamento local, infundiram-se, após as ordenhas da manhä e da tarde, 250mg do produto, diluídos em água estéril, a um volume final de 10ml, durante três dias. O tratamento sistêmico constituiu na aplicaçäo de 5mg/kg do produto, pela via intramuscular, uma vez ao dia, durante o mesmo período. A estimativa de cura deu-se através da realizaçäo do California Mastitis Test (CMT) e do cultivo bacteriano em agar sangue e MacConkey, três semanas após o término do tratamento. Dos 184 quartos acometidos por Staphylococcus aureus, a droga mostrou-se eficiente em 72,0 por cento e 75,0 por cento, pelas vias intramamária e sistêmica, respectivamente. A análise dos resultados mostrou näo haver diferença estatística significante, com p<0,50 para as duas formas de tratamento.

Mastite bovina causada por Prototheca zopfii: relato de um caso / Clinical bovine mastitis caused by Prototheca zopfii: a case study

Um caso de mastite clínica causada por Prototheca zopfii em uma vaca de um rebanho leiteiro localizado na zona da Mata do Estado de Minas Gerais foi estudado. O animal apresentou sinais clínicos nos quartos mamários anteriores e queda acentuada na produçäo de leite. Após o diagnóstico inicial, o animal foi observado durante onze meses, do início da manifestaçäo da doença até 12 dias após o parto. Exames microbiológicos do leite foram realizados aos 7, 30, 39, 49, 65, 326 e 331 dias após o isolamento inicial, sendo os dois últimos exames realizados 7 e 12 dias após o parto. As amostras de P. zopfii isoladas apresentaram resistência in vitro a: ampicilina, canamicina, cefaloridina, enrofloxacina, estreptomicina, gentamicina, neomicina, oxacilina, penicilina, sulfonamidas e trimetoprim x sulfametoxazol. Foi avaliada a susceptibilidade in vitro das amostras de P. zopfii a um produto natural constituído de extrato de sementes de frutas cítricas, obtido comercialmente. A menor concentraçäo que inibiu totalmente a alga foi 1:500. Recomendou-se um tratamento com a diluiçäo a 1:200 do extrato em soluçäo fisiológica estéril contendo timerosal a 1:30.000 como conservante, em doses diárias de 20ml, por via intramamária. O tratamento foi realizado inicialmente durante sete dias. Após este período houve reduçäo, mas näo a completa eliminaçäo dos organismos do leite. Foi, entäo, recomendado mais um período de 15 dias de tratamento, de modo semelhante ao primeiro. Trinta e nove dias após o diagnóstico inicial näo foi mais isolado P. zofii do leite dos quartos afetados e a produçäo retornou a níveis semelhantes de antes da infecçäo. Amostras de leite naturalmente infectadas foram congeladas a 20§C. Células viáveis de P. zofii foram recuperadas de amostras mantidas até 38 dias nestas condiçöes.