Trypanosoma cruzi trypomastigotes induce cytoskeleton modifications during HeLa cell invasion

It has been recently shown that Trypanosoma cruzi trypomastigotes subvert a constitutive membrane repair mechanism to invade HeLa cells. Using a membrane extraction protocol and high-resolution microscopy, the HeLa cytoskeleton and T. cruzi parasites were imaged during the invasion process after 15 min and 45 min. Parasites were initially found under cells and were later observed in the cytoplasm. At later stages, parasite-driven protrusions with parallel filaments were observed, with trypomastigotes at their tips. We conclude that T. cruzi trypomastigotes induce deformations of the cortical actin cytoskeleton shortly after invasion, leading to the formation of pseudopod-like structures.

A century of research: what have we learned about the interaction of Trypanosoma cruzi with host cells?

Since the discovery of Trypanosoma cruzi and the brilliant description of the then-referred to "new tripanosomiasis" by Carlos Chagas 100 years ago, a great deal of scientific effort and curiosity has been devoted to understanding how this parasite invades and colonises mammalian host cells. This is a key step in the survival of the parasite within the vertebrate host, and although much has been learned over this century, differences in strains or isolates used by different laboratories may have led to conclusions that are not as universal as originally interpreted. Molecular genotyping of the CL-Brener clone confirmed a genetic heterogeneity in the parasite that had been detected previously by other techniques, including zymodeme or schizodeme (kDNA) analysis. T. cruzi can be grouped into at least two major phylogenetic lineages: T. cruzi I, mostly associated with the sylvatic cycle and T. cruzi II, linked to human disease; however, a third lineage, T. cruziIII, has also been proposed. Hybrid isolates, such as the CL-Brener clone, which was chosen for sequencing the genome of the parasite (Elias et al. 2005, El Sayed et al. 2005a), have also been identified. The parasite must be able to invade cells in the mammalian host, and many studies have implicated the flagellated trypomastigotes as the main actor in this process. Several surface components of parasites and some of the host cell receptors with which they interact have been described. Herein, we have attempted to identify milestones in the history of understanding T. cruzi- host cell interactions. Different infective forms of T. cruzi have displayed unexpected requirements for the parasite to attach to the host cell, enter it, and translocate between the parasitophorous vacuole to its final cytoplasmic destination. It is noteworthy that some of the mechanisms originally proposed to be broad in function turned out not to be universal, and multiple interactions involving different...

Effect of Cysticercus cellulosae fractions on the respiratory burst of pig neutrophils

Neutrófilos, eosinófilos e macrófagos são células que interagem com os parasitas no corpo do hospedeiro desenvolvendo atividade antiparasitária. A reação inicial destes leucócitos é a geração de espécies reativas de oxigênio (ERO) a fim de expulsar os parasitas. No presente trabalho estudou-se o efeito da fração total, de escolex e de membrana de Cysticercus cellulosae sobre a explosão respiratória de neutrófilos de suínos. A produção de peróxido de hidrogênio (H2O2) pelos neutrófilos incubados com as frações de C. cellulosae apresentou acréscimo de 190% (extrato total), 120% (escolex) e 44% (membrana). Alta atividade de catalase (33%, 28% e 28% para extrato total, escolex e membrana respectivamente) foi observada nos neutrófilos incubados com as frações de metacestodeo, podendo representar a própria proteção celular do neutrófilo. Frações de escolex e de membrana aumentaram a capacidade fagocitária dos neutrófilos (44% e 28%, respectivamente). Por outro lado, a fração total do cisticerco não alterou a capacidade fagocitária dos neutrófilos, o que pode estar relacionada com modificações na função da membrana celular causadas pela alta produção de ERO na presença da fração total. O extrato total de C. cellulosae é tóxico para os neutrófilos, indicada pela diminuição da capacidade fagocitária, provavelmente pela indução de alto nível de ERO. A diferença de toxicidade do extrato total, de escolex e de membrana para os neutrófilos pode ocorrer pelo efeito antigênico presente no fluido vesicular no extrato total de C. cellulosae.

Lectin receptors distribution in the surface membrane of Trypanosoma cruzi blood forms collected from mice submitted to specific treatment

The author investigated the distribution of lectin receptors on Trypanosoma cruzi blood forms collected from mice inoculated with, respectively, the drug-resistant and drug-sensitive strains VL-10 and CL, and treated with the two standard active nitroheterocyclic compounds nifurtimox and benznidazole used for treatment of human Chagas' disease. Blood trypomastigotes purified in Fycoll-Hypaque were incubated with fluorescein-labelled lectins Con A, WGA, EE, WFA, TPA and PNA and then microscopically examined. Neither qualitative or quantitative differences in the fluorescence intensity could be detected between parasites from VL-10 and CL strains submitted or not to treatment. The results suggest that both strains do not differ in their surface membrane carbohydrate moieties. Moreover, the rapid clearance of blood forms the drug-sensitive strain in animals treated with singlo doses of both compounds is not likely to depend on membrane alterations expressed by changes in the carbohydrate components. furthermore, resistance or sensitivity to drugs is not apparently related to carbohydrate distribution on T. cruzi blood forms

Trypanosoma cruzi: modification of alkaline phosphatose activity induced by trypomastigotes in cultured human placental villi

Vilos placentários a termo foram mantidos "in vitro" em interaçäo com formas tripomastigotas sangüíneas de Trypanosoma cruzi, durante diversos períodos de tempo. Foram utilizadas concentraçöes diferentes de parasitas. Os controles näo continham T. cruzi. Determinou-se a atividade de fosfatase alcalina em vilos placentários mediante microscopia eletrônica e sua atividade específica no meio de cultura, mediante métodos bioquímicos. Os resultados mostraram que o hemoflagelado produz uma diminuiçäo significante da atividade enzimática tanto pelos estudos ultracitoquímicos como de atividade específica e esta atividade de fosfatase alcalina foi menor em culturas com altas doses de parasitas. Estes resultados säo indicadores de que a reduçäo de atividade enzimática coincide com o tempo de penetraçäo e proliferaçäo do T. cruzi nas células. Estas mudanças podem representar uma interaçäo entre o trofoblasto humano e o T. cruzi

Interacción de promastigotes de Leishmania donovani con celulas de exudado peritonial de ratones mediante la influencia de la quimotripsina / Interaction of Leishmania donovani promastigotes with peritoneal exudate cells of mice under the influence of chymotrypsin

Se hace un estudio de la interacción de promastigotes de Leishmania donovani con células de exudado peritoneal de ratón (c e p) mediante la influencia de la quimotripsina. La adhesión de los promastigotes a las c e p fue terminal y marginal, y en observaciones hechas a partir de los 10 minutos de enfrentamiento, esta adhesión fue nula hasta los 30 minutos en el grupo tratado, y sólo a las das horas hubo un pequeño incremento (2.4%) con respecto al control. Se observa marcada disminución en todos los parámetro medidos, tales como enlace, penetración, multiplicación intracelular, división de formas flageladas, en el grupo tratado. La quimiotripsina favorece la formación de formas intermedias flageladas, heciendose el parásito piriforme y esférico, apareciendo una forma aberrante de extremo anterior cilindrico que semeja a una forma coanoflagelada. Se sospecha que la enzima reduce efectivamente fragmentos proteicos o péptidos, los cuales pueden haber sido tan pequeños como para esconder a otros ligandos relacionados con la adhesión macrófago-parásito

Trypanosoma cruzi: cell charge distribution

Diferenças na carga celular entre populaçöes de epimastigotas e de tripomastigotas foram comparadas nas cepas Y, CL e Colombiana do T. cruzi. As populaçöes de tripomastigotas mostraram-se mais homogêneas quanto à carga celular do que os epimastigotas. Esta maior homogeneidade de cargas näo foi decorrente da seleçäo de sub-populaçöes de tripomastigotas por açäo do sitema imunológico do hospedeiro, mas talvez esta se deva à capa superficial formada por componentes sangüíneos dos hospedeiros