RESUMO
Se describe un procedimiento para la síntesis de anfolitos aplicables a la formación de gradientes de pH para isoelectroenfoque. Se utiliza tetraetilenpentamina a la cual se le agrega N, N'-metilenbisacrilamida como reactivo de condensación, con las finalidades de incrementar la diversidad de componentes anfotéricos, y/o de aumentar el número de grupos amino en la molécula resultante del acoplamiento de tetraetilenpentamina de a pares. En una operación posterior se hacen reaccionar estos productos con un ácido alfa, ß-insaturado. El procedimiento utilizando ácido acrílico se describe en detalle. Se estudia la uniformidad del gradiente de pH cortando el gel de poliacrilamida en fracciones de 1 x 1 cm y efectuando la medición del pH en cada una de ellas por el método de elución. La capacidad de formar gradientes estables de pH del producto sintetizado se demuestra realizando isoelectroenfoques de lisados eritrocitarios en geles de poliacrilamida de 1 mm de espesor